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大肠杆菌色氨酸高产菌株的构建

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毕业论文范文题目：大肠杆菌色氨酸高产菌株的构建，论文范文关键词：大肠杆菌色氨酸高产菌株的构建
大肠杆菌色氨酸高产菌株的构建毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：色氨酸(tryptophan,Trp)是一种重要的营养必需氨基酸,只能由微生物或植物合成。L-色氨酸是8种必须氨基酸之一,人和动物只能从食物中摄取。本实验采用诱变育种及基因克隆手段对一株大肠杆菌进行改造,以望获得能进行大规模工业化生产的L-色氨酸高产菌株。以大肠杆菌(Escherichiacoli)MD-T109为出发（此处忽略..）菌株,经NTG诱变处理,筛选得到7株酪氨酸营养缺陷型突变株。经摇瓶发酵产酸检测,其中1株产酸比出发菌株降低,4株产酸与出发株相当,只有两株L-色氨酸产量较出发菌株得到提高,其中MD-T109-06突变株产酸量较出发菌提高了11.23%,生长速率未受到影响,且遗传稳定性良好。进一步对MD-T109-06突变株进行改造。PCR扩增其trpED（略..）CBA基因并克隆到含tac启动子的pMD-T109表达载体中,电转导入宿主得到工程菌MD-trp-06。经摇瓶发酵产酸检测,其L-色氨酸产量从0.206g／dL提高到0.238g／dL,提高15.5%。工程菌邻氨基苯甲酸合成酶活性提高140%，色氨酸合成酶活性提高166%。为解决高密度发酵过程中通常存在的溶氧限制问题,将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)引入工（略..）程菌MD-trp-06中。根据Genbank公布的vgb基因及其低氧诱导启动子的序列信息,并按照大肠杆菌偏好密码子进行修饰,人工合成修饰后的vgb片段,通过酶切连接将其克隆到表达质粒pMD-trp,电转化导入MD-trp-06,获得工程菌MD-trp。经低氧诱导vgb基因的表达,摇瓶发酵验证,在250ml三角瓶中60ml（本文此处忽略..）及100ml装液量条件下,检测到vgb基因的表达工程菌相比出发菌株菌浓分别提高了21%和16%,色氨酸产量则提高了16.4%和21%。SDS-PAGE检测到VHb蛋白条带的表达。

以上为本篇毕业论文范文大肠杆菌色氨酸高产菌株的构建的介绍部分。

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