phaB、phaC基因的克隆与棉纤维发育启动子驱动的表达载体构建

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phaB、phaC基因的克隆与棉纤维发育启动子驱动的表达载体构建

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毕业论文范文题目：phaB、phaC基因的克隆与棉纤维发育启动子驱动的表达载体构建，论文范文关键词：phaB、phaC基因的克隆与棉纤维发育启动子驱动的表达载体构建
phaB、phaC基因的克隆与棉纤维发育启动子驱动的表达载体构建毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：棉花是天然优质的纺织原料，也是重要的经济作物。我国棉花的种植面积及产量均居世界首位，棉花生产的发展不但促进了棉纺织业的发展，而且使我国成为棉纺织品的最大出口国，年均创汇额达300亿美元，已成为我国出口创汇的支柱产业，在整个国民经济中占有重要的地位。而优良品种的选育对发展棉花生产起到了其它技术不可取代的作用。近几十年来，经过广大棉花育种家多年的不懈努力，已为生产上提供了许多优良品种。尽管我国在棉花育种方面已取得了很大成就，但过去偏重于产量和绒长的改进，而对纤维的内在品质重视不够，致使育成品种一般产量高，而纤维的内在品质不理想。随着纺织技术的（文章此处忽略..）发展、纺织机械的更新及人民消费水平的提高，对纤维的内在品质提出了新的要求。而我国现有的棉花品种品质优良的很少，造成纺织高级纱的原料非常紧缺。因此进行棉纤维品质改良已是我国棉花育种的重要方向。聚羟基丁酸酯(poly-3-hydroxybutyrate，PHB)是一些微生物细胞内的一种内源性贮藏物质，是一种热塑性聚脂。它具有质轻，弹性、可塑性好和抗射线性等特性，是现代分子材料中的一种新型材料。另外，若在棉纤维中合成PHB，棉纤维的保暖性、抗皱性等将会得到提高。本研究从棉纤维中成功克隆了棉纤维特异启动子FbL2A、LTP12及从真养产碱杆菌中分离到聚（此处忽略..）羟基丁酸酯合成酶基因phaB、phaC，旨在将phaB、phaC基因转入棉花中以提高棉纤维的保暖性、抗皱性等性状。本实验的研究内容主要包括三个方面：1棉纤维特异启动子LTP12、FbL2A及聚羟基丁酸(PHB)合成酶基因phaB、phaC的克隆及对DNA序列的分析；2．聚羟基丁酸酯合成酶基因phaB、phaC植物表达载体的构建；3．聚羟基丁酸酯合成酶基因phaB、phaC原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的诱导表达。通过PCR扩增和克隆获得了棉纤维特异启动子FbL2A、LTP12及聚羟基丁酸酯合成酶基因phaB、phaC。对FbL2A分析结表明在FbL2A基因（本文此处忽略..）的5’起始密码子前55bp和236bp处有两个TATA盒，将克隆片段与GenBanK中的序列比较，结果同源性为100％。启动子LTP12全长771bp，在其640bp处含有一个TATA盒，将克隆片段与文献中的序列比较，只在60～130处有7个碱基不同，其余完全相同，结果同原性为98.2％。基因phaB全长751bp，编码247个氨基酸，将克隆片段与文献中的序列比较结果同原性达99%，基因phaC全长177ObP，编码594个氨基酸，将测序结果与文献中的序列比较结果同源性达99%。pBFPBPC和pBLT即B均为含有PHB合成酶基因的双价植物表达载体前者带有启动子FbLZA和基因phaB、phaC，后者为带有启动子LTP（本文此处忽略..）12和基因phaB、phaC。pETPB和pPETPC为原核表达载体，前者带有基因phaB，后者为phaC基因并将带有phaB基因和phaC基因的质粒分别在大肠杆菌中用工PTG进行了诱导表达。结果pETPB表达出约为32KD的特异蛋白条带，与phaB基因的实际表达产物的大小相符。phaC未检测到表达产物(有人报道出现这种现象或许根它在细胞中的存在状态有关，用SDS一PAGE检测不到表达产物)。

以上为本篇毕业论文范文phaB、phaC基因的克隆与棉纤维发育启动子驱动的表达载体构建的介绍部分。

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