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大鼠胚胎后肾跟胸腺原基结合异种移植与引诱免疫耐受的实验研究

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毕业论文范文题目:大鼠胚胎后肾跟胸腺原基结合异种移植与引诱免疫耐受的实验研究,论文范文关键词:大鼠胚胎后肾跟胸腺原基结合异种移植与引诱免疫耐受的实验研究
大鼠胚胎后肾跟胸腺原基结合异种移植与引诱免疫耐受的实验研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:胚胎后肾移植在同种SD成年大鼠体内可能再血管化,构成器官并存在必定的泌尿功能;然而排斥反应仍然是影响胚胎后肾同种跟异种移植后器官构成的最重要制约。只管利用免疫克制剂对排斥反应有必定的克制造用,然而,长期全身非特异性免疫克制,增加了并发症的产活力会。引诱免疫耐受是目前实验跟临床研究的重点。中心型耐受因为它提供了全身性的、持续毕生的胸腺阴性抉择,因此被认为是T细胞耐受中最富强的类型,是最有临床利用盼望的引诱耐受的方法。胸腺移植是另一很有盼望引诱中心型移植免疫耐受的打算。本研究拟在有关胚胎后肾原基移植研究的基本上,利用无胸腺裸小鼠进行大鼠胚胎后肾跟胸腺原基结合移植,初步探讨结合胸腺移植后免疫功能重建与引诱受者对异种供者器官的特异性免疫耐受的关联。材料与方法1、雌性大鼠受孕干净级近交系Lewis大鼠同系雌雄之间同笼配种一整夜,次日凌晨雌性大鼠呈现阴道栓提示受孕(本文此处忽略..)成功,该日视作受孕第0天(Embryonicday0,E0)。取受孕第16d(E16)的胚胎后肾、胸腺原基分组进行实验。2、大鼠胚胎及后肾、胸腺的提取受孕第16d(E16)的Lewis大鼠麻醉后剖腹从子宫中摘取胚胎,胚胎破即置于0—4℃冷生理盐水中,手术显微镜帮助下,从胚胎中提取胚胎后肾、胸腺原基。解剖、清理胚胎后肾、胸腺原基,置于0~4℃冷生理盐水中保存。15—25分钟内植入成年近交系Balb/c裸小鼠腹腔内,其中胚胎后肾植入大网膜内,而将胸腺原基植入右肾包膜下。3、大鼠胚胎后肾植入成年受体网膜近交系Balb/c裸小鼠40只作为移植受体,雌雄不限,随机数字法分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组。表1-1实验动物分组及移植方法按照设计随机分组,每组近交系Balb/c裸小鼠10只,其中第Ⅰ组各只裸小鼠腹腔大网膜内植入成对胚胎后肾,右肾包膜下植入成对胸腺原基;第Ⅱ组各只裸小鼠仅在大网膜内植入成对胚胎后肾,不作胸腺原基移植:第Ⅲ组各只裸(此处忽略..)小鼠仅在右肾包膜下植入成对胚胎胸腺原基,不作后肾原基移植;第Ⅳ组各只裸小鼠仅作开腹手术,不作移植,用作对比。小鼠移植后第21天中举35天开腹察看存活裸鼠的移植器官构成情况,取标本进行组织病理学、移植后肾功能等检测,并作切除双肾后的生存时光比较。移植后6周进行皮肤移植实验,移植后12周行脾细胞单向混淆淋巴细胞反应(MLR)检查及外周血T淋巴细胞流式细胞学检测。成果1、病理学表示移植第3周跟第5周,各受体鼠E16移植胸腺及胚胎后肾皆发育完好,病理切片及电镜检查可见发育畸形的移植胸腺及后肾组织构造。2、移植后肾积液的生化检测及功能检测移植后第5周,Ⅰ组、Ⅱ组部分受体小鼠开腹,切除双侧肾脏,抽吸E16后肾的输尿管或肾盂积液,测其尿素氮、肌酐值;Ⅳ组也取部分小鼠切除双侧肾脏;察看比较各组双肾切除后的生存时光。成果显示,Ⅰ组、Ⅱ组各受体生存时光均明显善于Ⅳ组。另外比较Ⅰ组、Ⅱ组的双肾切除后的生存时(略..)光,发明前者明显善于后者。3、皮肤移植实验移植后6周,分辨取供体Lewis大鼠、同种对比C57BL/6(H-2~b)小鼠、第三品系BN大鼠皮肤片及受体BALB/c裸小鼠本身皮片分辨移植至Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ跟Ⅳ组受体裸小鼠,进行皮肤移植实验。成果,移植至第Ⅰ组跟第Ⅲ组的C57BL/6(H-2~b)小鼠、第三品系BN大鼠皮肤片均匀存活时光明显小于移植至Ⅱ组跟Ⅳ组的皮片;移植至Ⅰ、Ⅲ组的胸腺供体来源的供体Lewis大鼠皮肤均匀存活时光明显大于C57BL/6(H-2~b)小鼠、第三品系BN大鼠皮肤片均匀存活时光。4、不同组受体裸小鼠脾细胞单向混淆淋巴细胞反应(MLR)成果胚胎胸腺跟/或后肾原基移植后12周,不同组受体BALB/c裸小鼠分辨取供体Lewis大鼠、同种对比C57BL/6(H-2~b)小鼠中举三品系BN大鼠脾细胞进行单向混淆淋巴细胞反应(MLR)。Ⅰ、Ⅲ组的脾细胞对供体Lewis大鼠脾细胞的刺激呈低反应;Ⅰ、Ⅲ组的脾细胞(文章此处忽略..)对同种异体C57BL/6小鼠中举三品系BN大鼠的脾细胞的刺激有良好的反应性。5、流式细胞仪测定受体T淋巴细胞的重建情况实验成果表明异种胸腺植入裸小鼠12周后,Ⅰ、Ⅲ组的CD3~+CD4~+T细胞的百分率有明显升高,CD3~+CD8~+T细胞的百分率升高不明显。论断1.E16Lewis大鼠胚胎胸腺、后肾原基结合移植至细胞免疫缺点的裸小鼠,移动物可成长分化构成器官并发挥功能。2.E16Lewis异种胸腺移植能使裸小鼠达到免疫功能重建,使受者有排斥同种异体移动物的免疫力;3.E16Lewis胸腺原基与胚胎后肾结合移植,并在裸小鼠腹腔良好成长发育,有可能引诱特异性异种移植免疫耐受。


以上为本篇毕业论文范文大鼠胚胎后肾跟胸腺原基结合异种移植与引诱免疫耐受的实验研究的介绍部分。
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