太空环境对链球菌菌体多糖分子表白的影响

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太空环境对链球菌菌体多糖分子表白的影响

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毕业论文范文题目：太空环境对链球菌菌体多糖分子表白的影响，论文范文关键词：太空环境对链球菌菌体多糖分子表白的影响
太空环境对链球菌菌体多糖分子表白的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：研究背景家喻户晓,浩瀚的太空疆域无垠,有着地面上难以比较的环境前提。目前研究证明太空环境存在强辐射、高真空、微重力、高干净等特点,存在着诱产生物体渐变的多种因素。早在20世纪60年代,美国、苏联等科学家就进行了太空环境对病毒、细菌、动物染色体等研究,发明空间环境辐射可导致多种生物体DNA链断裂、细胞分化异样及致渐变率较高等特点。其后代界各航天强国陆续进行太空环境对其余有生命物质影响的摸索,在宏观层面多为诱变物的性状、功能方面的研究,而微观方面也大多是蛋白质及基因方面的研究。他们证明了太空环境除具改变生物体性状及功能的作用外,还可能引诱基因的渐变及影响蛋白质的表白。复合糖在生物的分化、繁殖、信号传导、免疫机制等方面存在重要的生物功能。然而,至今太空环境对多糖分子表白影响方面的研究尚少。太空环境作为一个全新的区域,已成为世界各国空间科学研究的热点,其在能源、制药等多方面发挥侧重要作用。有关材料表明,若到太空环境中制药一个月的产量可相称于地球上30-60年的产量。我国就有多少种药品是通过卫星载入太空后获得的,存在非常好后果。由此可见,利用太空环境的诱变效利用来制药将有着非常广阔的前景。多糖分子是生物体中包含动物、动物以及微生物在内的所有有生物质重要的组成成分,它有着维系生命的重要功能,存在组成骨性支架、组合受体、调节机体免疫等众多生物活性。微生物中如细菌中存在大量的多糖分子,它有着非常重要的各种功能。据研究其具多种生物学活性,在刺激骨髓造血、引起巨噬细胞增殖及凋亡、制造多糖菌苗、抗体及医治多种疾病等方面表示出非常高的利用价值。α-溶血性链球菌作为链球菌种属的一种,也称为甲型溶血性链球菌,为前提致病菌,其发酵产物糖肽存在较高的生物学价值,在抗肿瘤、刺激骨髓造血及调节本身免疫等方面有重要作用。凝集素是一类无免疫原性、能（文章此处忽略..）辨认糖链构造的蛋白质,其结合的专一性类似于抗原抗体反应。根据凝集素的糖结合特异性,凝集素可分为七类:(1)D-甘露糖或(D-葡萄糖)组;(2)N-乙酰葡萄糖胺组;(3)N-乙酰半乳糖组;(4)D-半乳糖;(5)L-岩藻糖组;(6)唾液酸组;(7)复合糖组。凝集素存在很多重要的生物学活性,其在抗养分性、防守功能、细胞成熟跟分化标记、肿瘤诊断及免疫组织化学等方面发挥侧重要的作用。另外,动物凝集素作为一种重要的天然产物,是分别纯化跟研究糖复合物构造与功能的重要工具,是研究糖跟蛋白质彼此作用机制的幻想模型。其在转基因抗虫、生物固氮、药物开发、骨髓移植及疾病鉴定等多个方面将有着广泛的利用。研究目标在不同品种的凝集素中各选取一种有代表性的凝集素,分辨是ConA、WGA、SNA、RCA-Ⅰ及PHA,利用改进的过碘酸钠法用辣根过氧化物酶标记凝集素,利用凝集素的糖结合特点,检测α-溶血性链球菌菌体中上述5种凝集素辨认多糖分子的程度,懂得进入太空环境前及进入太空环境后链球菌菌体内多糖分子表白的状况,旨在从多糖分子程度懂得太空环境是否存在菌种的诱变作用,探讨太空环境是否对链球菌菌体多糖分子的表白有影响,并且是否能为细菌多糖生物产品的筛选、促进机能或进步产量等方面提供新的道路,以及是否能为太空诱变菌生物功能的研究提供新的实验根据。材料跟方法1.菌种太空链球菌种由陕西太空生物制药工程技巧研究核心提供。系在个别α-溶血性链球菌种中,筛选产量高、敏感性大、变异幅度广的菌株处理后,置入培养基封装,装入神舟飞船返回舱内,进行数天轨道运行(近地点高度200公里、远地点高度350公里)后返回。而后经过多次搭载不同的卫星进入太空环境供其诱变,并反复筛选得到的正变异太空菌种。将上述两菌种经过钴60照射9000GY后灭活,保存于—80℃冰箱超低温保存,待检。2.菌种的粉碎,蛋白多糖分子的提取采取超声波粉碎法粉碎细菌,离（本文此处忽略..）心取上清,而后利用盐溶法提取蛋白多糖分子,上清中参加硫酸铵至饱跟度为60%～90%,持续搅拌10～30min,4℃静置3～5h,离心,将积淀溶于蒸馏水,采取Sevage法脱除游离蛋白,离心收集上清液,旋转蒸发脱除残余溶剂,4℃透析,冷冻干燥,得蛋白多糖粉末。打算细菌粉碎率及蛋白多糖获取率。3.凝集素的标记采取改进的过碘酸钠法用HRP标记凝集素,标记后经过SephadexG-200层析柱,行蛋白凝胶电泳检测酶标凝集素标记后通过亲跟层析法的过滤后果,测酶标抗体标记率及ELISA测效价。4.多糖分子的检测检测方法蛋白多糖分子-HRP标记凝集素法(类似直接法ELISA),利用菌体蛋白多糖分子包被96孔酶标板,参加标记好的HRP-凝集素,充分结合,洗脱未结合的酶标凝集素,通过TMB-H_2O_2溶液显色,测接收值,菌体中的多糖分子越多,与HRP标记的凝集素就结合越多,经过显色后OD值就越高,反之就越低。5.统计学处理文中所有OD值数据均以均数±标准差(—x±s)表示,用SPSS13.0软件包测验分析,采取的具体统计学方法为独破样本t测验,成果以P≤0.05认为差别存在统计学意思,若P＞0.05认为差别无统计学意思。研究内容及成果1.菌种的粉碎,蛋白多糖分子的提取成果:根据公式打算细菌绝对粉碎率=(1-超声后细菌积淀湿重/超声前细菌积淀湿重)、蛋白多糖得率=蛋白多糖/细菌分量×100%;得出细菌绝对粉碎率为99%,蛋白多糖得率:地面链球菌为1.36%,太空链球菌为1.58%。2.凝集素的标记成果:HRP-凝集素标记率(测OD403nm/OD280nm得标记率)分辨为0.73、0.78、0.75、0.73及0.75;用ELISA检测酶标凝集素效价分辨为1:1000、1:000、1:1000、1:800跟1:600。3.两菌种多糖分子得检测成果(1)地面个别链球菌菌体蛋白多糖中测得ConA相干末端N-高甘露糖型多糖分子的OD值为:0.97±0.05,太空型链球菌菌体蛋白多糖中该多糖分子的OD值为1.18±0.03,阳性对比组OD值为1.46±0.05,（本文此处忽略..）阴性对比组OD值为0.05±0.00,两菌种OD值比较,P值为0.000,小于0.05,差别有统计学意思。(2)地面个别链球菌菌体蛋白多糖中测得WGA相干末端GlcNAc多糖分子的OD值为:1.16±0.04,太空型链球菌菌体蛋白多糖中该多糖分子的OD值为1.16±0.03,阳性对比组OD值为1.46±0.03,阴性对比组OD值为0.05±0.00,两菌种OD值比较,P值为0.967,大于0.05,差别无统计学意思。(3)地面个别链球菌菌体蛋白多糖中测得SNA相干末端Neu5Aca2-6Gal多糖分子的OD值为:0.56±0.03,太空型链球菌菌体蛋白多糖中该多糖分子的OD值为0.75±0.04,阳性对比OD值为1.35±0.04,阴性对比组OD值为0.05±0.00,两菌种OD值比较,P值为0.000,小于0.05,差别有统计学意思。(4)地面个别链球菌菌体蛋白多糖中测得RCA-Ⅰ相干末端Galβ1-4GlcNAc多糖分子的OD值为:1.19±0.06,太空型链球菌菌体蛋白多糖中该多糖分子的OD值为1.38±0.08,阳性对比组OD值为1.42±0.05,阴性对比组OD值为0.05±0.00,两菌种OD值比较,P值为0.001,小于0.05,差别有统计学意思。(5)地面个别链球菌菌体蛋白多糖中测得PHA相干末端Gal-NAC多糖分子的OD值为:0.85±0.06,太空型链球菌菌体蛋白多糖中该多糖分子的OD值为0.84±0.05,阳性对比组OD值为1.44±0.06,阴性对比组OD值为0.05±0.00,两菌种OD值比较,P值为0.664,大于0.05,差别无统计学意思。重要论断本实验通过利用改进的过碘酸钠法利用辣根过氧化物酶标记各种凝集素,采取超声波法行细菌粉碎,盐溶法提取菌体蛋白多糖分子,而后根据凝集素能特异性检测相干多糖分子的原理,利用凝集素是一类无免疫原性、能辨认糖链构造的蛋白质,其结合的专一性类似于抗原抗体反应,利用类似ELISA法的原理,用HRP标记的凝集素法检测检测两菌种蛋白多糖分子。本实验当选用ConA结合N-高甘露糖型多糖分子、WGA结合末端GlcNAc多糖分子,SNA可结合末（此处忽略..）端相干Neu5Aca2-6Gal多糖分子,RCA-Ⅰ结合末端Galβ1-4GlcNAc多糖分子及PHA可结合末端Gal-NAC多糖分子的原理特点,检测个别型α-溶血性链球菌及太空型链球菌菌体内的多糖分子程度差别,研究两种链球菌体内多糖分子表白的情况,论断显示:1、从多糖分子程度证明了太空环境存在对α-溶血性链球菌的诱变作用;2、实验证明太空环境对α-溶血性链球菌多糖分子的表白有抉择性影响作用,能使ConA相干N-高甘露糖型多糖分子、SNA相干末端Neu5Aca2-6Gal多糖分子及RCA-Ⅰ相干末端Galβ1-4GlcNAc多糖分子的表白增加;对WGA相干末端GlcNAc多糖分子及PHA相干末端Gal-Nac多糖分子的表白无影响。3、根据太空环境对细菌多糖分子表白的影响作用,为细菌多糖生物产品的筛选、进步机能或进步产量等方面提供新的可能道路,并为太空诱变菌生物功能的研究提供了新的实验根据;4、太空环境对链球菌多糖分子表白影响的机制有待进一步研究。

以上为本篇毕业论文范文太空环境对链球菌菌体多糖分子表白的影响的介绍部分。

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