间变性大细胞淋巴瘤ALK基因转位及其融合蛋白表白意思的研究

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间变性大细胞淋巴瘤ALK基因转位及其融合蛋白表白意思的研究

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毕业论文范文题目：间变性大细胞淋巴瘤ALK基因转位及其融合蛋白表白意思的研究，论文范文关键词：间变性大细胞淋巴瘤ALK基因转位及其融合蛋白表白意思的研究
间变性大细胞淋巴瘤ALK基因转位及其融合蛋白表白意思的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：一、研究背景跟目标间变性大细胞淋巴瘤(Anaplasticlargecelllymphoma,ALCL)长短霍奇金淋巴瘤中的一个特别类型,是由一组状况、表型、细胞遗传学跟临床病程各异的疾病组成,其细胞状况变更多样,特点为淋巴结副皮质区跟窦状隙内有表白CD30的间变性大淋巴细胞浸润。但因为该标记特异性不强,以往有很多病例被误诊为恶性组织细胞增生症、窦状隙大细胞淋巴瘤、退行性非典范组织细胞增生、转移癌、黑色素瘤或淋巴细胞消减型霍奇金病等,因此病理亟待寻找更特异的诊断标记物。间变性淋巴瘤激酶(anaplasticlymphomakinase,ALK)是ALCL病例中比较特异的标记。遗传学研究发明约60%-85%ALCL患者存在ALK融合蛋白,这是因为2号染色体的ALK基因与5号染色体的核磷酸蛋白(nucleophosmin,NPM)基因融合导致。值得留神的是,ALK基因在绝大多数非造血体系肿瘤跟畸形组织中缺乏表白,且有ALK融合基因的ALCL病例预后要明显好于阴性病例,二者的临床特点有很大差别,可将ALCL分为ALK阳性ALCL及ALK阴性的ALCL,由此可见检测ALK对病理诊断意思重大。组织微阵列(tissuemicroassays（本文此处忽略..）)是由大量组织标本高密度排列而成的,存在高信息量,实验误差小,标本利用率高跟本钱低等长处;如同个别组织切片一样可能做苏木素跟伊红(hematoxylinandeosin,HE)、特别组织化学、免疫组化染色跟原位杂交,利用于寻找肿瘤基因、检测生物试剂等方面。染色体荧光原位杂交(Fluorescenceinsituhybridization,FISH)技巧近年己广泛利用于医学生物范畴,但在国内病理诊断中的利用非常少见,除了商品化探针价格昂贵、实验成果察看须要特别设备外,对材料的请求比较高也是一个重要因素。日常病理工作中的材料多为福尔马林固定石蜡包埋组织,而国内目前成功地对福尔马林固定石蜡包埋组织微阵列(tissuemicroarray,TMA)进行FISH实验研究报道极少。本实验应用组织芯片技巧跟核芯片技巧,观测30例ALCL病理学特点、免疫表型特点、T细胞β、γ受体基因重排情况;同时应用FISH及免疫组化方法对福尔马林固定石蜡包埋ALCL的组织芯片中ALK融合基因其产物进行对比检测,比较它们在临床诊断中的作用,并探讨ALK融合基因其产物与患者预后的关联。二、方法收集1997-2005年间30例ALCL的临床材料较齐全病例并进行随访。采（此处忽略..）取2001年WHO对于淋巴造血组织肿瘤分类进行组织学分型。利用组织微阵列技巧,构建了包含30例ALCL及2例对比组织(每例3个点)共96点阵的石蜡组织芯片。免疫组化染色采取链霉素抗生素蛋白——过氧化物酶(SP)法,分辨对室温保存的组织芯片做CD3、CD20、CD45RO、CD79a、CD30跟ALK标记,以进一步明白免疫表型跟ALK的表白等。利用PCR检测TCR-β、TCR-γ受体基因重排。采取双色FISH检测ALCL病例中的ALK融合基因。统计学方法上,利用SPSS软件(SPSS13.0forWindows)进行One-wayANOVA测验,以P＜0.05作为差别明显性标准来测验之间的差别性。三、成果1、组织学:原发皮肤型ALCL2例,体系性ALCL28例。体系性ALCL分为个别型22例(22/28,78.6%),淋巴组织细胞型4例(4/28,14.3%),小细胞型2例(2/28,7.1%)。2、免疫组织化学:30例ALCL中,29例CD30阳性(29/30,96.7%),23例T细胞标记阳性(CD3跟/或CD45R0阳性),另7例无T细胞标记为阴性(CD3跟CD45R0均阴性)。2例原发皮肤型ALK表白为阴性;28例体系性ALCL中有20例(71.4%,20/28)ALK阳性,其中个别型16例(72.7%,16/22),淋巴组织细胞型3例(75%,3/4),小细胞型1例(50%,1/2);经统计学分析,ALK表白在各组织学亚型中无明显性差别(P＞0.05)。20例ALK阳性的病例中（略..）17例为T细胞标记阳性,余3例为T、B细胞标记均阴性。ALK表白定位在细胞浆与细胞核。3、基因重排检测:2例原发皮肤型ALCL中1例(1/2,50%)同时检测到T细胞β跟γ受体基因重排;28例体系性ALCL中20例(20/28,71.4%)检测到T细胞γ受体基因重排,13例(13/28,46.4%)检测到T细胞β受体基因重排,11例(11/28,39.3%)同时检测到T细胞β跟γ受体基因重排。4、FISH检测:在17例(17/28,60.7%)体系性ALCL中检测到ALK融合基因,而2例原发皮肤型ALCL中FISH阴性。5、在30例ALCL中,ALK蛋白阳性组的年纪低于ALK蛋白阴性组的年纪,两者差别存在明显性(P=0.003)。ALK蛋白阳性组的预后好于ALK蛋白阴性组的预后,两者差别存在明显性(P=0.0018)。四、论断本研究通过对30例ALCL病例的组织病理学、免疫表型以及TCR基因重排的研究分析及同时应用FISH及免疫组化方法检测了福尔马林固定石蜡包埋ALCL的组织芯片中ALK融合基因其产物。实验成果经过统计学分析后得出以下论断:1.因为检测到ALK融合基因的ALCL病例与未检测到ALK融合基因的ALCL在临床珍断跟预后上有着明显的差别性,因此辨别两者很有意思。2.ALK免疫组化染色在检测ALK融合蛋白时存在较高的敏感性,FISH在检测ALK基因转位时（本文此处忽略..）存在较高的特异性,而ALK融合蛋白免疫组化染色因为其简单、快捷、价廉成为惯例病理外检中的首选方法,在具备FISH前提时,因为其正确性也可能将检测ALK基因转位作为首选。3.首次结合应用组织芯片技巧,免疫组化跟荧光原位杂交检测石蜡包埋间变性大细胞淋巴瘤ALK融合基因及其产物,后果良好,在临床病理诊断中有着良好的利用前景。4、ALK融合基因及其产物在ALCL病例中有很高的检出率,尤其是低年纪组的患者,它可能成为ALCL的诊断、辨别诊断跟断定预后的一个独破重要指标。

以上为本篇毕业论文范文间变性大细胞淋巴瘤ALK基因转位及其融合蛋白表白意思的研究的介绍部分。

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