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引诱小鼠成纤维细胞为多能干细胞的研究

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毕业论文范文题目:引诱小鼠成纤维细胞为多能干细胞的研究,论文范文关键词:引诱小鼠成纤维细胞为多能干细胞的研究
引诱小鼠成纤维细胞为多能干细胞的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:引诱多能干细胞是当今的研究热点之一,该项技巧在生物医学、细胞工程、组织工程跟转基因动物出产等范畴存在广泛的利用前景。本研究在克隆获得Sox2、Oct4、Klf4跟c-Myc基因的基本上,构建逆转录病毒载体pMXs-Sox2、pMXs-Oct4、pMXs-Klf4跟pMXs-cMyc并获得病毒悬液。将获得的病毒悬液感染小鼠成纤维细胞后,察看其构成细胞克隆的才能及检测细胞克隆的碱性(略..)磷酸酶活性,为进一步发展小鼠iPS的相干研究奠定基本。本研究的研究成果如下。(1)利用小鼠肝组织DNA扩增获得经PCR跟酶切鉴定约在1000bp处呈现特异条带的Sox2基因;利用小鼠囊胚RNA扩增获得经PCR跟酶切鉴定约在1400bp处呈现特异条带的Oct4基因;利用小鼠孕期19.5d皮肤组织RNA扩增获得经PCR跟酶切鉴定约在1500bp处呈现特异条带的Klf4基因;利用小鼠乳腺癌细胞RNA扩增获得经PC(此处忽略..)R跟酶切鉴定约在1400bp处呈现特异条带的c-Myc基因。对所获得的Sox2、Oct4、Klf4跟c-Myc基因进行序列分析,其与GenBank中相应序列的同源性分辨为100%、99.91%、99.72%跟100%。(2)利用克隆获得的Sox2、Oct4、Klf4跟c-Myc基因,与逆转录病毒载体pMXs构建获得经PCR、酶切跟测序鉴定正确的逆转录病毒载体pMXs-Sox2、pMXs-Oct4、pMXs-Klf4跟pMXs-cMy(此处忽略..)c。(3)Sox2、Oct4、Klf4跟c-Myc引诱因子的病毒悬液通过细胞免疫荧光检测其存在感染才能;将其感染小鼠成纤维细胞,经惯例方法传代后第3d可见到ES样克隆呈现,第7d进行挑克隆传代3次后引诱细胞存在典范的小鼠ES细胞克隆状况,并且碱性磷酸酶活性检测浮现阳性的蓝紫色。综上所述,本研究应用成功克隆获得的Sox2、Oct4、Klf4跟c-Myc基因与逆转录病毒载体pMXs构建相应逆转(略..)录病毒pMXs-Sox2、pMXs-Oct4、pMXs-Klf4跟pMXs-cMyc,利用其引诱小鼠成纤维细胞获得与小鼠ES细胞在状况学及生物学特点中极为类似的细胞克隆,为进一步探讨哺乳动物iPS的相干研究奠定基本。


以上为本篇毕业论文范文引诱小鼠成纤维细胞为多能干细胞的研究的介绍部分。
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