大蒜油对小鼠酒精性脂肪肝防治作用的实验研究

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大蒜油对小鼠酒精性脂肪肝防治作用的实验研究

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毕业论文范文题目：大蒜油对小鼠酒精性脂肪肝防治作用的实验研究，论文范文关键词：大蒜油对小鼠酒精性脂肪肝防治作用的实验研究
大蒜油对小鼠酒精性脂肪肝防治作用的实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：研究目的酒精对肝脏有明显的毒性作用,酗酒是导致酒精性肝病(ALD)的首要因素。酒精性脂肪肝(AFLD)是ALD的一种早期表现,可以发展为酒精性肝炎、酒精性肝纤维化,甚至酒精性肝硬化。近年来我国酒类产量不断增加,酒精性脂肪肝在我国呈现逐年增多的趋势,已成为一大医学和社会问题。AFLD发病机制非常复杂,尚不完全清楚,目前临床上无有效的治疗药物,因而研发能够防治AFLD的药物具有重要的意义。大蒜油为大蒜经水蒸气蒸馏制得的一种挥发油,含有大蒜的主要的活性成分,包括二烯丙基硫、二烯丙基二硫、二烯丙基三硫、大蒜烯等多种含硫的功效成分。近年来的研究证实,大蒜油具有拮抗化学性肝损伤的作用。国内外的研究发现：大蒜油能够拮抗乙醇、四氯化碳以及对乙酰氨基酚引起的急性肝损伤,并且大蒜油能够预防大鼠实验性的非酒精性脂肪肝。因而大蒜油可能具有防治酒精性脂肪肝的功效。我们参考相关文献,灌胃给予小鼠酒精辅以高脂饲料成功建立酒精性脂肪肝模型,通过观察给予大蒜油后各组小鼠的生化、病理等关键指标,确定大蒜油是否对酒精性脂肪肝具有防治效果。并从机体抗氧化系统、肝脏CYP2E1的表达以及脂肪代谢等方面探讨大蒜油防治酒精性脂肪肝的机理。研究方法1.动物模型建立参考范建高等人的造模方法并加以改良。健康雄性昆明小鼠SPF级,18-22g,适应性喂养3天后,随机分为酒精性脂肪肝模型组和正常对照组。模型组小鼠每天喂养高脂饲料(脂肪10%、胆固醇2%、基础饲料88%)。并给予3g/kg.bw的乙醇,正常组每天喂养基础饲料并给予等体积的蒸馏水。造模3周后,生化及病理结果显示确认造模成功。2.动物分组与处理2.1大蒜油预防小鼠酒精性脂肪肝健康雄性昆明小鼠(90只)SPF级,18-22g,适应性喂养3天后随机分为正常对照组、模型组、大蒜油低剂量(20mg/kg)、中剂量(40mg/kg)、高剂量(80mg/kg)和凯西莱阳性药物对照组(150mg/kg)。除正常组每天喂养基础饲料并给予等体积的蒸馏水外,其它各组小鼠每天喂养高脂饲料并给予3g/kg.bw的乙醇灌胃；大蒜油和凯西莱组分别于给予乙醇后6小时给予相应剂量的大蒜油和凯西莱,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,连续给药三周。末次给药后禁食12h,眼球取血分离血清,并取肝左叶冻存。2.2大蒜油治疗小鼠酒精性脂肪肝将造模成功的小鼠(90只)随机分为正常组、大蒜油低剂量(25mg/kg)、中剂量(50mg/kg)、高剂量(100mg/kg)、凯西莱(150mg/kg)和自然（略..）恢复组,每组15只。动物均给予基础饲料喂养,大蒜油和凯西莱组分别给予相应剂量的大蒜油和凯西莱,正常组和自然恢复组给予等体积蒸馏水,连续给药一周。末次给药后禁食12h,眼球取血分离血清,并取肝左叶冻存。3.大蒜油防治酒精性脂肪肝的效果评价计算肝体比值；测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性及甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)的含量；制备肝脏匀浆,测定肝脏TG、TC和FFA含量；制备肝脏冰冻切片,苏丹染色,观察脂肪蓄积情况。4.大蒜油对机体抗氧化系统的影响称取适量肝组织,制备10%肝组织匀浆,利用试剂盒测定肝匀浆中丙二醛(MDA)和还原性谷胱甘肽(GSH)的含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)。5.大蒜油对肝脏细胞色素P4502E1(CYP2E1)蛋白水平的影响取适量肝组织,用RIPA裂解液提取总蛋白,WesternBlot技术测定CYP2E1蛋白表达。研究结果1.大蒜油预防小鼠酒精性脂肪肝1.1血清ALT和AST变化与正常组相比,模型组小鼠血清ALT和AST的活性分别增加了41.64%(P0.01)和51.80%(P0.01)；与模型组相比,大蒜油组(20,40,80mg/kg)小鼠血清ALT活性分别下降了10.10%、10.84%和12.43%(P0.05)；AST活性分别下降了22.34%、22.66%和25.80%(P0.01)；凯西组ALT和AST的活性亦有所下降,但不如大蒜油组明显。1.2血清TG和TC的变化与正常组相比,模型组小鼠血清TG和TC的含量分别增加了86.60%(P0.01)和41.64%(P0.01)；与模型组相比,大蒜油组(20,40,80mg/kg)和凯西莱组小鼠血清TG含量分别下降了14.92%(P0.01)、21.55%(P0.01)、33.15%(P0.01),和11.05%(P0.01)；TC含量分别下降了15.38%(P0.01)、18.90%(P0.01)、22.42%(P0.01)和23.30%(P0.01)。1.3肝组织TG和TC的变化与正常组相比,模型组小鼠肝组织TG、TC的含量显著升高了301.31%(P0.01)和383.33%(P0.01)；与模型组相比,大蒜油组(20,40,80mg/kg)和凯西莱组小鼠肝组织TG、TC含量明显降低,TG含量分别下降了23.12%(P0.01)、24.27%(P0.01)、27.85%(P0.01)和24.10%(P0.01),TC含量分别下降了12.93%、22.70%(P0.05)、25.00%(P0.01)和21.84%(P0.01)。1.4肝组织FFA的变化与正常组相比,模型组小鼠FFA含量显著增加了89.25%(P0.01)；与模型组相比,大蒜油组(20,40,80mg/kg)和凯西莱组小鼠肝组织FFA的含量明显降低,分别降低了25.13%(P0.01)、34.89%(P0.01)、1.13%(P0.01)和31.79%(P0.01)。1.5肝组织和血清MDA的变化与正常组相比,模型组小鼠肝组织和血清MDA的水平显著升高了183.33%和39.11%(P0.01)；与模型组相比,大蒜油组(20,40,80mg/kg)小鼠的肝组织MDA的水平分别下降了53.48%(P0.01)、57.75%(P0.01)和60.96%(P0.01),血清MDA的水平分别下（本文此处忽略..）降了15.52%(P0.01)、19.46%(P0.01)和26.27%(P0.01),凯西莱组较模型组小鼠肝组织和血清MDA的水平分别下降了43.85%(P0.01)和24.63%(P0.01)。1.6肝组织GSH的变化与正常组相比,模型组小鼠肝组织GSH水平显著下降了50%(P0.01)；与模型组相比大蒜油组(20,40,80mg/kg)小鼠肝组织的GSH水平有所提高,其水平分别提高了16.67%、33.33%和100%(P0.01)。凯西莱组小鼠GSH的水平较模型组无明显增加。1.7肝组织SOD的变化与正常组相比,模型组小鼠肝组织SOD水平显著下降了27.69%(P0.01)；与模型组相比,大蒜油组(20,40,80mg/kg)和凯西莱组小鼠肝组织的SOD水平有所提高,但是差异无统计学意义。1.8肝脏形态学改变肝脏冰冻切片苏丹Ⅲ染色结果显示,正常组未见脂滴,模型组有大量的橙黄色脂滴蓄积,大蒜油三个剂量组脂滴均明显减少变小。1.9肝组织胞浆CYP2E1的变化与正常组相比,模型组小鼠肝脏中CYP2E1的蛋白水平增加了72.00%(P0.01)；与模型组相比大蒜油组(20,40,80mg/kg)小鼠肝组CYP2E1的蛋白水平显著下降,其水平分别下降了43.60%(P0.01)、63.95%(P0.01)和76.16%(P0.01)。凯西莱组与模型组相比无明显变化。2.大蒜油治疗酒精性脂肪肝2.1酒精性脂肪肝模型的建立与正常组相比,自然恢复组小鼠肝组织TG含量增加了259.31%,肝体指数增加了58.87%,肝脏冰冻切片苏丹Ⅲ染色结果显示,正常对照组未见脂滴,自然恢复组有大量的橙黄色脂滴蓄积,呈现重度脂肪变性。2.2血清ALT和AST变化与正常组相比,自然恢复组小鼠血清ALT和AST的水平分别增加了30.29%(P0.01)和4.48%；与自然恢复组相比,大蒜油组(25,50,100mg/kg)小鼠血清ALT的水平分别下降了7.21%、16.22%(P0.05)和20.71%(P0.01)；AST活性分别下降了2.82%、5.57%和8.72%；凯西莱组小鼠血清ALT、AST的水平分别下降了9.91%和1.64%。2.3血清TG和TC的变化与正常组相比,自然恢复组小鼠血清TG和TC的含量分别增加了52.75%(P0.01)和45.81%(P0.01)；与自然恢复组相比,大蒜油组(25,50,100mg/kg)和凯西莱组小鼠血清TG含量分别下降了20.14%(P0.01)、27.34%(P0.01)、31.65%(P0.01)和20.86%(P0.01),TC含量分别下降了19.25%(P0.01),20.61%(P0.01)、22.97%(P0.01)和25.34%(P0.01)。2.4肝组织TG和TC的变化与正常组相比,自然恢复组小鼠肝组织TG.TC的含量显著了升高了241.06%(P0.01)和147.22%(P0.05)；与自然恢复组相比,大蒜油组(25,50,100mg/kg)小鼠肝组织TG含量分别下降了22.91%(P0.01)、25.83%(P0.01)、32.43%(P0.01),TC含量有所下降,但与模型组相比差异无统计学意义；凯西组组较模型组TG、TC的含量有所降低但不如大蒜油明显。2.5肝组织FFA的变化与正常组相（文章此处忽略..）比,自然恢复组小鼠FFA含量显著增加了115.55%(P0.01)；与自然恢复组相比,大蒜油组(25,50,100mg/kg)和凯西莱组小鼠肝组织FFA的含量明显降低,分别下降了22.79%(P0.01)、21.63%(P0.01)、28.36%P0.01)和25.28%(P0.01)。2.6肝组织和血清MDA的变化与正常组相比,肝组织和血清MDA分别升高了41.57%(P0.01)和16.40%；与自然恢复组相比,大蒜油组(25,50,100mg/kg)小鼠肝组织MDA分别下降了7.94%、11.11%和27.78(P0.01)%,血清MDA分别下降了4.93%、7.22%和12.26%；与自然恢复组相比,凯西莱组肝组织和血清MDA分别下降了5.56%和3.78%。2.7肝组织GSH的变化与正常组相比,自然恢复组小鼠肝组织GSH水平显著下降了36.84%(P0.01)；与自然恢复组相比,大蒜油组(25,50,100mg/kg)和凯西莱组小鼠肝组织的GSH水平有所提高,其水平分别提高了91.67%(P0.01)、108.33%(P0.01)、141.67%(P0.01)和33.33%。2.8肝组织SOD的变化与正常组相比,自然恢复组的肝组织SOD水平显著下降了8.75%(P0.01)；与自然恢复组相比,大蒜油组(25,50,100mg/kg)和凯西莱组小鼠肝组织的SOD水平分别提高了12.58%(P0.01)、12.81%(P0.01)、15.43%(P0.01)和7.73%。2.9肝脏形态学改变肝脏冰冻切片苏丹111染色结果显示,正常对照组未见脂滴,自然恢复组有大量的橙黄色脂滴蓄积,大蒜油三个剂量组脂滴均明显减少变小。2.10肝组织胞浆CYP2E1蛋白表达的变化与正常组相比,自然恢复组小鼠肝脏中CYP2E1的蛋白水平增加了58.00%(P0.01)；与自然恢复组相比,大蒜油组(25,50,100mg/kg)小鼠肝组CYP2E1的蛋白水平显著下降,其水平分别下降了23.42%(P0.01),44.94%(P0.01)和52.23%(P0.01)；凯西莱组与模型组相比无明显变化。结论：1.大蒜油对小鼠AFLD具有有效的预防作用。2.大蒜油对小鼠AFLD具有良好的治疗作用。3.大蒜油拮抗AFLD的机制可能与其抗氧化活性和抑制CYP2E1有关。

以上为本篇毕业论文范文大蒜油对小鼠酒精性脂肪肝防治作用的实验研究的介绍部分。

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