生物样品中蝶呤类化合物及氨基酸分析方法研究

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生物样品中蝶呤类化合物及氨基酸分析方法研究

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毕业论文范文题目：生物样品中蝶呤类化合物及氨基酸分析方法研究，论文范文关键词：生物样品中蝶呤类化合物及氨基酸分析方法研究
生物样品中蝶呤类化合物及氨基酸分析方法研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：国内外研究表明,蝶呤类化合物和氨基酸类化合物在生物体的代谢过程中有重要的作用,体液中其含量的改变在多种疾病(包括癌症)的早期诊断和临床病情监测等方面意义重大。本文从样品前处理技术、分析方法和临床应用等方面对蝶呤类化合物及氨基酸类化合物的研究概况进行了综述。在此基础上,应用色谱分析技术,研究建立了生物样品中多种蝶呤类化合物及氨基酸类化合物分析新方法,并将所得实验结果进行了比较,为进一步寻找新的肿瘤标志物打下了方法学基础。其研究成果如下：1.建立了高效液相色谱-荧光分析法测定生物样品中的多种蝶呤类化合物。采用水-甲醇(90：10,v/v)为流动相,流速是1.0mL/min,荧光检测波长是λex=360nm、λem=445nm。结果表明,新蝶呤、生物蝶呤、蝶呤及墨蝶呤的线性范围分别为0.005～1.50μgmL、0.05～2.00μg/mL、0.01～1.00μg/mL、0.3～10.0μgmL；检测限依次是：0.0030μg/mL、0.0020μg/mL、0.0010μg/mL、0.15μg/mL尿液在酸性介质条件下经（略..）碘-碘化钾溶液氧化30min,滴加抗坏血酸还原液,摇匀,稀释,过0.45gm水相滤膜进行液相色谱分析。细胞培养液直接过0.45μm水相滤膜得进样液用于检测。四种蝶呤类化合物在三个不同加标水平下平均回收率在84.8-120.0%之间,RSD值小于7.34%。将所建立的检测方法应用于健康人、普通病人、手术前后癌症病人尿样及细胞培养液的分析,取得了较好的效果。2.建立了高效液相色谱-荧光法同时测定人体尿液中的酪氨酸和色氨酸。流动相是水-乙腈(80：20,v/v),流速是1.0mL/min,荧光检测波长是λex=260nm、λem=340nm。酪氨酸和色氨酸的线性范围分别是0.10～6.0μg/mL及0.050～6.0μg/mL,线性方程分别是y=12.219x+0.6694(r0.9991)和y=83.612x+6.73,51(r=0.9993),检测限为0.05μg/mL和0.02μg/mL。尿液经离心、过膜、稀释后进行分析。在三个添加水平的回收中,两种氨基酸的平均回收率在86.1～122.2%之间,RSD值小于8.51%。将所建立的方法应用于健康人、普通病人和手术前后癌症病人晨尿检测,结果发现（此处忽略..）：癌症病人尿样中色氨酸的水平与健康人和普通病人相比偏低；术后癌症患者尿液中色氨酸水平与术前相比有所升高。3.采用高效液相色谱-串联质谱法检测人体尿液中的多种蝶呤类化合物,选用C18柱分离,柱温是25℃,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(10：90,V：V)等度洗脱,流速是0.4mL/min,在质谱的多反应监测正离子模式下分析。在优选的色谱和质谱条件下,新蝶呤、生物蝶呤、蝶呤和墨蝶呤的线性范围依次是：0.000704-1.99μg/mL、0.000700～1.01μg/mL、0.000705～2.03μg/mL、0.00506～1.01μg/mL,检测限分别是0.103ngmL、0.102ng/mL、0.0156ng/mL、0.0366ng/mL在三个添加水平的回收中,四种蝶呤类化合物的平均回收率为78.6～123.9%,RSD值小于6.87%。该方法应用于测定健康人和癌症病人尿液中四种蝶呤类化合物水平。结果表明,健康人尿样中新蝶呤与生物蝶呤浓度范围分别是0.0230～0.335gg/mL、0～0.530gg/mL；癌症患者尿样中新蝶呤与生物蝶呤浓度范围分别是0.0570～2.21μg/mL、0～0.193μg/mL；癌（此处忽略..）症病人尿样中新蝶呤水平与健康人相比有所升高,而生物蝶呤水平有所降低。这一规律与高效液相色谱-荧光分析法的检测结果一致。该方法样品前处理简单、分析速度快、灵敏度高,分析结果较好。4.采用高效液相色谱-串联质谱法快速测定人体尿液中的酪氨酸和色氨酸,色谱柱是AgilentXDB-C18柱(4.6×50mm,1.8μm),柱温是25℃,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(10：90,V：V)等度洗脱,流速是0.3mL/min,在质谱的多反应监测正离子模式下分析。结果表明：在优选的色谱和质谱条件下,酪氨酸和色氨酸的线性范围分别是0.001～2.00μgmL、0.001～2.03μg/mL；线性方程分别为Y=636.2003X+19176.5238(r=0.9967)、Y=2259.5523X+4005.8170(r=0.9988)；检测限分别是0.00010ng/mL和0.00025ng/mL。在三个不同添加水平的回收中,酪氨酸和色氨酸的平均回收率为74.0～124.0%,RSD值小于7.97%,.该方法的回收率与精密度均可满足实际样品检测要求。将该方法应用于尿样分析结果良好,并通过t检验法对比已建立的高效液相色谱-荧光分析（此处忽略..）法,结果表明两种分析方法之间不存在显著性差异。

以上为本篇毕业论文范文生物样品中蝶呤类化合物及氨基酸分析方法研究的介绍部分。

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