鸡感染性喉气管炎病毒gB基因的克隆及表白的研究

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鸡感染性喉气管炎病毒gB基因的克隆及表白的研究

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毕业论文范文题目：鸡感染性喉气管炎病毒gB基因的克隆及表白的研究，论文范文关键词：鸡感染性喉气管炎病毒gB基因的克隆及表白的研究
鸡感染性喉气管炎病毒gB基因的克隆及表白的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：鸡感染性喉气管是一种遍布世界各地的急性接触性呼吸道感染病，由感染性喉气管炎病毒(ILTV)引起，以呼吸艰苦、咳嗽、常咳出带血渗出物为发病特点。ILTV属于疱疹病毒科α疱疹病毒亚科，目前多用鸡感染性喉气管炎的弱毒疫苗进行防备，其中大部分弱毒疫苗株存在温跟的致病性，因此可能有毒力返强的危险。近年，ILTV基因组的大部分序列及其功能已经断定，这为基因工程疫苗的研制奠定了基本。研究表明ILTV属于疱疹病毒D型基因组（此处忽略..），gB基因编码205KD糖蛋白复合物，能引诱体液免疫跟细胞免疫，是该病毒的重要保护性抗原基因，也是研究基因工程疫苗的首选目标基因，表白gB糖蛋白是防备感染性喉气管炎的新方法。本论文以疫苗株ILTV基因组为模板扩增出gB基因片段连接到载体DGEM-TVector，对目标片段gB基因进行了序列测定跟同源性分析，与英国ThomeV882毒株、美国ILTV632毒株、澳大利亚SA2毒株gB基因的核苷酸同源性分辨为100％、100％跟99.4％，氨基（此处忽略..）酸同源性分辨为99.8％，99.9％跟98.7％，阐明它长短常保守的。而后将gB基因定向克隆于原核表白载体pBV221中构建了重组质粒pBV-gB，将其转化到受体菌DH5α中，菌株DH5α(pBV-gB)经温控引诱后，SDS-PAGE电泳可见表白的特异蛋白条带。ELISA检测阐明gB基因在大肠杆菌中的表白产物存在很好的反应原性，然而鸡胚中跟实验成果表明该重组菌株仅能部分中跟1个EID_(50)剂量的北京株ILTV强毒。原核表白的目标蛋白缺乏生物（本文此处忽略..）活性跟免疫原性，活载体疫苗可能克服这一毛病，因此本论文又构建了大肠杆菌一分枝杆菌穿梭表白质粒pRR-α-gB，并将其电转化至耻垢分枝杆菌，ELISA检测表明重组菌株M．smegmatismc~2155(pRR-α-gB)的表白产物存在很好的反应原性。Westernblot检测阐明ILTV的gB基因在分枝杆菌中获得了表白并存在良好的免疫原性。鸡胚中跟实验成果表明该重组菌株可能中跟1个EID_(50)剂量的ILTV强毒，可能保护（本文此处忽略..）SPF鸡胚抵抗强毒攻打。它在保险性方面比弱毒疫苗更加优胜，不构成埋伏感染，不会散毒。此外，该重组菌株免疫的鸡可能通过血清学方法与天然感染ILTV的鸡加以差别。因此本实验研究的工程菌M．smegmatismc~2155(pRR-α-gB)将有盼望代替现用的ILTV弱毒疫苗，彻底改变ILT防制现状。

以上为本篇毕业论文范文鸡感染性喉气管炎病毒gB基因的克隆及表白的研究的介绍部分。

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