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IBDV VP2/4/3与ChIL-18融合跟共表白真核表白质粒的构建及其免疫

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毕业论文范文题目:IBDV VP2/4/3与ChIL-18融合跟共表白真核表白质粒的构建及其免疫,论文范文关键词:IBDV VP2/4/3与ChIL-18融合跟共表白真核表白质粒的构建及其免疫
IBDV VP2/4/3与ChIL-18融合跟共表白真核表白质粒的构建及其免疫毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:感染性法氏囊病(IBD)是由感染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的急性接触性感染病,是迫害世界养禽业的重要感染病之一。IBDV重要侵害雏鸡的中枢免疫器官-法氏囊,导致免疫克制。用弱毒苗跟灭活苗免疫鸡群是目前防治IBD的重要方法,但跟着IBDV变异株与超强毒株的呈现,免疫失败时有产生。DNA疫苗因能引诱机体产生体液免疫应答跟细胞免疫应答而成为疫苗学研究的热点,但因为其引诱产生的免疫应答后果还不够幻想,因此如何加强其免疫后果成为目前DNA疫苗的关键问题。本研究小组在前期工作中已证明了IBDV多聚蛋白(VP2/4/3)DNA疫苗存在良好的免疫原性,可诱发机体产生满意的保护后果,而且鸡白细胞介素18(Ch(此处忽略..)ickenInterleukin18,ChIL-18)可能加强IBDVDNA疫苗免疫后果。为进一步进步IBDV多聚蛋白(VP2/4/3)DNA疫苗的免疫后果,本研究利用重叠延长剪切技巧(splicingbyoverlappingextension)将IBDVVP2/4/3基因与鸡ChIL-18基因融合在一起,得到融合基因片段VP2/4/3-ChIL-18跟ChIL-18-VP2/4/3,将融合基因片段定向插入真核表白载体pCI中,获得重组质粒pCI-VP2/4/3-ChIL-18跟pCI-ChIL-18-VP2/4/3;利用PCR法,在本实验室已成功构建的重组真核表白质粒pCI-VP2/4/3跟pCI-ChIL-18的基本上,构建VP2/4/3基因跟ChIL-(本文此处忽略..)18基因的共表白质粒co-pCI-VP2/4/3-ChIL-18质粒,该质粒含有2个独破的转录单元(ChIL-18跟IBDVVP2/4/3),可能同时独破的表白这2种蛋白。在脂质体介导下将上述重组真核表白载体转染Vero细胞,间接免疫荧光证明重组质粒能正确表白目标蛋白,表白的蛋白存在免疫反应性。将2周龄SPF鸡随机分为6组,以200μg/羽剂量首免:A组免疫重组真核表白质粒pCI-VP2/4/3-ChIL-18,B组免疫pCI-ChIL-18-VP2/4/3,C组免疫co-pCI-VP2/4/3-ChIL-18,D组免疫pCI-VP2/4/3,E组免疫pCI-ChIL-18+pCI-VP2/4/3,F组为空白对比,2周后以雷同剂量2免,通过察看外周血淋巴细胞增殖(此处忽略..)后果,测定血清IBDV中跟抗体程度、血清ELISA抗体程度跟攻毒保护实验等,比较各实验组IBDVDNA疫苗的免疫原性。成果表明重组质粒co-pCI-VP2/4/3-ChIL-18的免疫后果最好,pCI-VP2/4/3-ChIL-18免疫后果次之,pCI-ChIL-18-VP2/4/3与pCI-ChIL-18+pCI-VP2/4/3的免疫后果无明显差别,但均优于单独利用重组质粒pCI-VP2/4/3组。本研究成功构建了融合基因真核表白质粒pCI-VP2/4/3-ChIL-18、pCI-ChIL-18-VP2/4/3跟基因共表白质粒co-pCI-VP2/4/3-ChIL-18,并且在Vero细胞中得到了正确表白,表白产物存在免疫反应性。ChIL-18与I(文章此处忽略..)BDVVP2/4/3彼此间能产生协同作用,加强DNA疫苗的免疫后果。与IBDV多聚蛋白DNA疫苗跟ChIL-18结合免疫比拟,采取基因重组质粒进行免疫还有一针打针,便利操作,降落本钱等长处。为进一步研究ChIL-18的分子免疫佐剂作用及研制高效、价廉的IBDVDNA疫苗提供了实验根据。


以上为本篇毕业论文范文IBDV VP2/4/3与ChIL-18融合跟共表白真核表白质粒的构建及其免疫的介绍部分。
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