马感染性贫血病毒LTR关键点渐变对DLV致弱机理的研究

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马感染性贫血病毒LTR关键点渐变对DLV致弱机理的研究

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毕业论文范文题目：马感染性贫血病毒LTR关键点渐变对DLV致弱机理的研究，论文范文关键词：马感染性贫血病毒LTR关键点渐变对DLV致弱机理的研究
马感染性贫血病毒LTR关键点渐变对DLV致弱机理的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：马感染性贫血病毒(equineinfectiousanemiavirus,EIAV)可能引起马属动物的一种急性烈性感染病,以贫血、持续感染、反复发热为特点,毕生持续感染,是马属动物最重要的感染病之一。EIAV与人免疫缺点病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)同属逆转录病毒科、慢病毒属成员,两者在抗原特点、基因组构造等方面极为类似,以及从经济与保险性角度上考虑,EIAV将是研究HIV乃至慢病毒的最幻想的动物模型。沈荣显等科学家于20世纪70年代通过体外细胞传代致弱路线研制成功了马传贫驴白细胞弱毒疫苗,（此处忽略..）是迄今世界上独一大范围成功利用的慢病毒疫苗,揭示该疫苗的免疫保护机制,可为研究HIV等其它慢病毒疫苗提供有价值的鉴戒。为了阐明我国马感染性贫血病毒弱毒疫苗毒力致弱的分子机制,利用我国马感染性贫血病毒疫苗培养体系(由强毒到弱毒的不同代次病毒),对EIAV弱毒疫苗致弱过程中不同代次EIAV毒株非编码区LTR序列分析,发明病毒致弱的基因变异法则性位点,即LTRR区序列浮现法则性变更:TAR构造起始地位碱基在59代之前多数为A,而64代之后均为G;poly(A)附加位点在45代之后(除55代外)一致表示为AA,提示这些渐变引起的位点或构造变更很可能（文章此处忽略..）与病毒毒力减弱有直接关联。因此基于EIA代次毒株LTR序列分析成果,选取EIAV基因非编码区LTRR区作为研究对象,以驴胎皮肤弱毒疫苗感染性分子克隆pLGFD3-8为父本操作体系进行基因的定点渐变,即LTRR区的TAR构造起始碱基由弱毒株的G变为强毒株特点A,poly(A)附加位点碱基由弱毒株的AA变为强毒株特点CA,构成存在到处点渐变型强弱嵌合感染性的分子克隆。构建EIAV非编码区强弱毒嵌合的全基因分子克隆,将阳性重组质粒命名为pLGFD-M。将该嵌合克隆体外转染驴胎皮肤细胞(FDD)并进行FDD传代,通过逆转录酶活性实验（此处忽略..）、前病毒DNAPCR扩增、RT-PCR方法及实时定量RT-PCR等实验验证其转染成果。成果显示,LTR嵌合克隆衍生病毒感染FDD呈现明显的细胞病变,电镜下可见大量典范的EIAV颗粒,将其病毒命名为vpLGFD-M;细胞培养上清可检测到RT酶活性;前病毒DNAPCR扩增跟RT-PCR均为阳性。在细胞程度上对该嵌合克隆衍生毒及其亲本感染性分子克隆毒株复制才能进行了检测,发明此嵌合克隆衍生病毒比其父本克隆衍生病毒的复制程度略高些,保持了亲本皮肤弱毒疫苗感染分子克隆的复制特点跟细胞嗜性。本研究在分子生物学方面的新发明是—（略..）—明白了EIAVLTR反转录时,病毒RNA是先由5’LTR的R-U5与3’LTRU3重组构成前病毒基因组一端的长末端反复序列“新”3’LTR,在新构成的3’LTR上的启动子跟转录基因的领导下,进行EIAV的复制与蛋白质的合成。本项研究对进一步在分子程度上阐明我国EIAV疫苗株的复制机制跟减毒机理存在极其重要的意思,为进一步断定我国马传贫弱毒疫苗株毒力致弱及免疫保护的分子机制奠定了重要的分子生物学基本,并将为其它人跟动物慢病毒的免疫防备研究提供实验根据。

以上为本篇毕业论文范文马感染性贫血病毒LTR关键点渐变对DLV致弱机理的研究的介绍部分。

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