鸡感染性支气管炎病毒国内分别株LX4 5a、5b及N基因的研究

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鸡感染性支气管炎病毒国内分别株LX4 5a、5b及N基因的研究

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毕业论文范文题目：鸡感染性支气管炎病毒国内分别株LX4 5a、5b及N基因的研究，论文范文关键词：鸡感染性支气管炎病毒国内分别株LX4 5a、5b及N基因的研究
鸡感染性支气管炎病毒国内分别株LX4 5a、5b及N基因的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：鸡感染性支气管炎(IB)是由鸡感染性支气管炎病毒(IBV)引起鸡的一种急性接触性感染病，目前对IBV分子生物学的研究重要集中在S基因上，而对IBV其余基因的研究则绝对较少。因此，本实验在实现对IBV国内分别株LX4S基因的克隆、测序与比较分析后，进一步对IBV基因组5′末段2.2kb的片段(5a、5b、N及3′UTR)进行了克隆、测序与遗传变异分析。并进一步对N基因进行原核表白与纯化，以断定其利用于IB诊断的可行性。本实验参照已发表的IBV基因序列设计合成了一对引物，对IBV新疆分别株LX4经RT-PCR扩增得到（文章此处忽略..）我国处所分别株LX4mRNA_5跟mRNA_6的全部cDNA大小约1.7kb的片段。将该片段克隆并进行序列测定，与国内外部分参考毒株的相应序列比较分析发明：LX45a基因与Beau、CU-T2、DE072、D1466、D971及SD/97/02毒株核苷酸及推导氨基酸序列同源性分辨在83％跟86％以下，而其余株间5a基因均在90％以上。5b基因与上述毒株核苷酸及推导氨基酸序列同源性分辨在87％跟86％以上，其中5b基因核苷酸及推导的氨基酸序列均与D971同源性最高。LX4N基因与Ark99、Beau、Gray、M41、H120、H52、SD/97/02、D971、ZJ971、DB、HB及N毒株的N基因（本文此处忽略..）核苷酸及推导氨基酸同源性比较成果发明其中LX4N基因与HB跟SD/97/02同源性较高，与其余毒株同源性绝对较低。对已报道的N基因所编码蛋白的三个保守碱性区及揣测的多个功能区推导氨基酸同源性比较进一步提示：我国处所分别株LX4mRNA_5跟mRNA_6的cDNA序列与国内其余分别株同源性绝对较高，这表明他们之间存在较近的遗传演变关联。但在LX4N基因的部分功能区内，其核苷酸跟推导氨基酸与H52跟/或H120存在很高的同源性，这表明LX4的存在可能与我国利用IBV疫苗株H52跟H120有必定的接洽。本研究将鸡感染性支气管炎病毒（略..）国内分别株IBV-LX4N基因亚克隆于大肠杆菌原核表白质粒pPROEX~(TM)HTa中，构建拟表白重组鸡感染性支气管炎病毒N蛋白的重组质粒pPROEX~(TM)HTa-N。经核苷酸序列测定后的阳性质粒转化E.coliDH5α进行引诱表白。表白产物经SDS-PAGE、Westernblot鉴定表明N蛋白在大肠杆菌中获得了表白，产物分子量分辨为约56KDa跟45KDa的蛋白，其中分子量为56KDa的蛋白表白量约为菌体总蛋白量的13％。包涵体被6M盐酸胍裂解后，经ProBond~(TM)蛋白质纯化试剂盒纯化。将纯化后分子量（文章此处忽略..）为56KDa的重组蛋白进行兔体免疫，制备兔抗鸡N蛋白多克隆抗体并分辨与不同致病型鸡感染性支气管炎病毒进行琼脂扩散反应，成果表明该多克隆抗体可与各不同致病型毒株产生反应，但与亲本毒株的反应性更好。这表明鸡的感染性支气管炎病毒N蛋白有望作为群特异性诊断抗原用于IB的诊断中。

以上为本篇毕业论文范文鸡感染性支气管炎病毒国内分别株LX4 5a、5b及N基因的研究的介绍部分。

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