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恒温基因扩增技巧对饲料沙门氏菌检测的研究

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毕业论文范文题目:恒温基因扩增技巧对饲料沙门氏菌检测的研究,论文范文关键词:恒温基因扩增技巧对饲料沙门氏菌检测的研究
恒温基因扩增技巧对饲料沙门氏菌检测的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:沙门氏菌(Salmonella)作为需氧革兰氏阴性无芽胞杆菌,广泛存在于天然环境中,寄生于人跟动物的肠道内,通过传染食品跟水源,感染致发急慢性胃肠疾病,对人畜健康均有较大的迫害。动物性饲料作为沙门氏菌的“非生物贮主”,在动物跟人类沙门氏菌病的产生、传播及新菌型引进上存在重要作用。鉴此,本论文进行了三个方面的研究:沙门氏菌环媒恒温扩增技巧(LA(略..)MP)的树破及该方法用于饲料沙门氏菌的检测;用PCR介导定点渐变法对沙门氏菌invA基因定点渐变对LAMP特异性进行研究;沙门氏菌解旋恒温基因扩增技巧(HDA)的树破及该方法用于饲料沙门氏菌的检测,成果如下:以沙门氏菌invA基因为目标片段设计特异性引物,通过前提优化,成功树破了沙门氏菌LAMP、HDA法,并通过用标准株跟其余病原菌考察其特异(本文此处忽略..)性,用稀释法考察灵敏度。采集长沙附近饲料厂、养殖场108份饲料用LAMP、HDA法进行检测,同时以惯例分别培养鉴定法进行对比。LAMP检出沙门氏菌阳性20份,阳性率为18.5%(20/108),HDA检出沙门氏菌阳性19份,阳性率为17.6%(19/108),惯例法检出沙门氏菌阳性21份,阳性率19.44%(21/108)。两种方法与惯例法的阳性合乎率分辨是90.48%、95.24%,阴性合乎率100%。HDA产物克隆后送公司进行测序,成果阳性菌株(文章此处忽略..)克隆的DNA序列与GenBank中发表的入侵因子基因序列雷同。表明树破的LAMP法、HDA法检测沙门氏菌存在疾速、简便、特异、灵敏等特点,极合适基层实验室利用,存在广阔的推广前景。采取PCR介导定点渐变法对沙门氏菌invA基因定点渐变,使其T669→A669、T725→A725,用原LAMP特异性引物扩增含单核苷酸差别序列,察看扩增成果。扩增成果为阴性,原引物(文章此处忽略..)不可扩增渐变模板。LAMP技巧不能利用同一引物,检测存在单核苷酸差别的不同株型或同一株型的病原菌,而存在可辨别它们的才能,这种成果与内引物在环媒恒温基因扩增技巧中至关重要的作用有关。


以上为本篇毕业论文范文恒温基因扩增技巧对饲料沙门氏菌检测的研究的介绍部分。
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