鸡新城疫抗体检测试纸条的研制及初步利用

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鸡新城疫抗体检测试纸条的研制及初步利用

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毕业论文范文题目：鸡新城疫抗体检测试纸条的研制及初步利用，论文范文关键词：鸡新城疫抗体检测试纸条的研制及初步利用
鸡新城疫抗体检测试纸条的研制及初步利用毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：鸡新城疫(Newcastledisease,ND)是由副粘病毒科腮腺炎病毒属的1型副粘病毒(Paramyxovirus)新城疫病毒(Newcastlediseasevirus,NDV)引起的一种极易感染的覆灭性疾病,该疾病重大地妨碍了世界养禽业的发展。检测鸡群的免疫程度跟评估鸡群的免疫状况对该病的把持有侧重要的意思。而目前,新城疫抗体检测技巧重要局限于实验室检测,在临床利用时有必定的局限性。本研究利用原核表白血凝素神经氨酸酶蛋白,结合胶体金免疫层析技巧,树破了鸡新城疫病毒抗体疾速检测方法,（文章此处忽略..）获得以下研究成果：1.新城疫血凝素神经氨酸酶蛋白的原核表白及纯化用本实验室保存的NDVLaSota株通过鸡胚传代,收取尿囊液后提取病毒RNA,分辨设计带有BamHⅠ跟HindⅢ酶切位点的两对引物,利用RT-PCR扩增出HN基因的全长跟去信号肽跟跨膜区序列的片段,将两种扩增产物分辨克隆进pGEX-KG载体,成功构建了重组表白质粒pKG-HN跟pKG-HNde-sp,测序后,两条基因大小分辨为1734bp跟1593bp,扩增序列与GenBank上报道的LaSota株的基因核苷酸序列的同源性为99%。将构（略..）建好的pKG-HN跟pKG-HNde-sp质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行表白,引诱后,经SDS-PAGE电泳分析,重组表白的蛋白分子量分辨约为89KD跟80KD。经过对表白蛋白的前提进行优化,成果显示,pKG-HNde-sp在温度为37℃、IPTG浓度为1‰跟引诱5h的表白量最高,Western-Blot分析表明,表白蛋白有较好的免疫学活性。2.鸡新城疫病毒抗体疾速检测试纸条的树破用柠檬酸三钠还原法制备20nm的胶体金,用鼠抗鸡IgGFc单抗标记,标记的最佳pH为8.0,最佳标记量为9.6μL1.0mg/m（此处忽略..）L。以金标鼠抗鸡IgGFc单抗为探针,以兔抗鼠IgG作为质控线,以纯化的HN蛋白作为检测线的捕获试剂,初步树破了能检测鸡新城疫抗体的胶体金疾速检测试纸条。兔抗鼠IgG的最佳喷膜浓度为1.0mg/mL,HN表白蛋白的最佳喷膜浓度为1.1mg/mL。该试纸条与感染性法氏囊、感染性支气管炎、禽流感H9亚型、禽流感H5亚型、鸡毒霉形体等阳性血清跟无特定病原体鸡阴性血清反应均为阴性；灵敏度与血凝克制实验成果一致。该方法操作简单,特异性强,灵敏度高,可用于鸡新城疫血清抗体程度的检测。3.鸡新城疫抗体疾（本文此处忽略..）速检测试纸条的初步利用用本实验制备的鸡新城疫抗体疾速检测试剂盒进行临床利用,检测240份血清,其中试纸条检测出阳性血清222份,检出率为92.5%(222/240)；血凝克制实验(HI)检测出阳性血清220份,检出率为91.6%(220/240),二者的合乎率为99.1%(220/222),此成果表明,本试剂盒与HI实验成果基本一致,临床上可代替HI实验进行新城疫抗体效价的检测。

以上为本篇毕业论文范文鸡新城疫抗体检测试纸条的研制及初步利用的介绍部分。

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