感染性支气管炎病毒核蛋白粘膜免疫及ELISA检测方法的研究

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感染性支气管炎病毒核蛋白粘膜免疫及ELISA检测方法的研究

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毕业论文范文题目：感染性支气管炎病毒核蛋白粘膜免疫及ELISA检测方法的研究，论文范文关键词：感染性支气管炎病毒核蛋白粘膜免疫及ELISA检测方法的研究
感染性支气管炎病毒核蛋白粘膜免疫及ELISA检测方法的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：感染性支气管炎(Infectiousbronchitis,IB)是由感染性支气管炎病毒(Infectiousbronchitisvirus,IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触性感染病。IBV的N蛋白在进化上较为保守,重要与基因组核酸的包裹、RNA的合成跟细胞免疫有关,含有大量抗原决定簇,免疫原性仅次于S蛋白,能引诱机体产生穿插保护性抗体。本研究克隆表白了存在高度保守性的N蛋白基因,并将其作为免疫原制备多克隆抗体,树破检测IBV抗原的夹心ELISA法,为该病的早期诊断跟把持提供了（此处忽略..）良好工具。IBV血清型较多,新的变异株在始终呈现,且不同型毒株间缺乏穿插保护或仅有部分穿插保护,给免疫防治带来很大艰苦。本研究尝试利用霍乱毒素B亚基(CholeratoxinBsubunit,CTB)的粘膜佐剂作用,将IBVN基因的表白产物与CTB混淆或将N基因与CTB融合表白后,鼻腔免疫7日龄肉鸡,以期进步鸡鼻腔、气管跟肠粘膜名义抗IBVsIgA的抗体程度,从而达到防备跟把持IB的目标。本研究重要研究内容跟研究成果如下:1.IBV核蛋白基因(np)与霍乱毒素B亚基基因(ctb)的融合表（此处忽略..）白将ctb基因跟np基因融合后,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了成功表白,产物命名为rCTB-NP。复性后的表白产物经SDS-PAGE检测,呈现了分子量大小为72.0kDa跟92.0kDa的两条带。Westernblot分析表明,融合蛋白rCTB-NP中的N蛋白存在良好的免疫反应性。GM_1-ELISA实验成果表明,融合蛋白rCTB-NP中的CTB蛋白存在良好的免疫学活性。2.感染性支气管炎病毒重组核蛋白粘膜免疫后果研究将融合蛋白rCTB-NP,rNP、rNP+rCTB分辨免疫7日龄肉鸡,用EL（文章此处忽略..）ISA法检测血清中的IgG-NP、IgA-NP及鼻、气管跟肠粘膜部位的sIgA-NP。成果发明,二免跟三免后,血清中均能产生较高程度的IgG-NP抗体,但IgA-NP抗体程度较低;鼻、气管跟肠粘膜部位rCTB+rNP组跟rCTB-NP组的sIgA-NP抗体程度与NP组比较,前两组明显高于NP组(p＜0.05);气管粘膜部位sIgA-NP程度表示为rCTB-NP组＞rCTB+rNP组＞rNP组。成果表明,CTB与IBVN蛋白融合表白产物或与该蛋白混淆进行鼻腔免疫时,能明显进步鸡鼻腔、（文章此处忽略..）气管跟肠粘膜名义sIgA的抗体程度。3.检测感染性支气管炎病毒的夹心ELISA方法的树破以鸡抗NPIgG为包被抗体,兔抗IBVIgG为二抗,树破了检测IBV的夹心ELISA法。成果表明,鸡抗IBVIgG的最佳包被浓度为2.5μg/mL,兔抗IBVIgG的最适工作浓度为5μg/mL;该方法比血球凝集实验敏感性高8倍以上,与NDV、AIV、EDS_(-76)V、IBDV等无穿插反应,阐明该法特异性跟敏感性较高。

以上为本篇毕业论文范文感染性支气管炎病毒核蛋白粘膜免疫及ELISA检测方法的研究的介绍部分。

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