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SARS-CoV 7a蛋白的结构与功能初步研究

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毕业论文范文题目：SARS-CoV 7a蛋白的结构与功能初步研究，论文范文关键词：SARS-CoV 7a蛋白的结构与功能初步研究
SARS-CoV 7a蛋白的结构与功能初步研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：SARS是近年来爆发的一种严重的呼吸道传染疾病，SARS-CoV是SARS的病原体。基因组测序结果显示，SARS-CoV除编码冠状病毒共有的结构蛋白M、E、S和N蛋白外，还存在6个编码氨基酸大于50的ORFs，生物信息学分析没有发现这些ORFs的同源基因，推测其中可能存在SARS-CoV致病基因。在SARS-CoV特有的这些ORFs中，ORF7a即为其中之一。已有文献报（文章此处忽略..）道在SARS-CoV感染的细胞中可检测到ORF7a的表达，且其表达能诱导caspase依赖性的细胞凋亡，因此有理由认为7a可能是SARS-CoV的潜在致病基因。本课题拟对7a蛋白进行结构与功能初步研究，以期为揭示SARS-CoV致病的分子机制提供线索。我们用免疫细胞化学方法对7a的细胞内定位及拓扑异构性进行研究，发现其定位于高尔基体，N端朝胞浆，C端朝内腔。同时我们在实（略..）验中注意到转染了7a的HEK293细胞与空细胞相比，增殖变得缓慢，推测其可能有增殖抑制作用。于是构建了N端或C端带有GFP或myc标签的7a真核表达载体，转染不同细胞系后检测细胞增殖情况，发现7a的表达可明显抑制细胞增殖，阻止BrdU掺入，提示7a可能起到细胞周期调控的作用。于是我们将7a转染HEK293细胞，转染后24-60h分别用流式细胞术分析细胞周期，结果显示，转染后不同时间点，7a的表（本文此处忽略..）达均能引起细胞周期G0／G1期阻滞，且转染COS-7和Vero细胞也可观察到相似结果。为了找到7a中影响其定位和功能的结构域，我们构建了7a基因的系列缺失突变体，并对其进行定位和相关功能分析，发现决定7a定位和引起细胞G0／G1期阻滞以及凋亡的区域均位于蛋白的44-82个氨基酸处。最后，进一步探索7a引起细胞G0／G1期阻滞的机制。Rb是细胞由G0／G1期进入S期的关键调控因子，可结合转录因子E（文章此处忽略..）2F并抑制其活性。Rb磷酸化受Cyclin／cdk复合物的调节，Rb高磷酸化后释放并激活E2F，启动S期基因转录。实验中我们主要通过Westernblot的方法对这些影响细胞周期进程的蛋白因子进行研究，发现在HEK293细胞中，7a的表达可显著降低CyclinD3转录水平和蛋白表

以上为本篇毕业论文范文SARS-CoV 7a蛋白的结构与功能初步研究的介绍部分。

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