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副猪嗜血杆菌,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和猪链球菌2型三重PCR方

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毕业论文范文题目:副猪嗜血杆菌,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和猪链球菌2型三重PCR方,论文范文关键词:副猪嗜血杆菌,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和猪链球菌2型三重PCR方
副猪嗜血杆菌,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和猪链球菌2型三重PCR方毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis,HPS)病,猪传染性胸膜肺炎(Porcinecontagiouspleuropneumonia,PCP)和猪链球菌(Swinestreptococosis,SS)病是当前严重困扰我国生猪养殖业的三种常见传染性细菌疾病。其病原体分别是副猪嗜血杆菌,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和猪链球菌。三种病原菌均有多个血清型,均能引起一系列呼吸道症状。其中,HPS是猪上呼吸道正常定居菌,链球菌2型是一种人兽(略..)共患传染病病原菌。三种病原菌均主要侵害幼龄仔猪和保育猪,可以引起较高的发生率和死亡率,且在临床上鉴别难度较大,给全球生猪养殖造成了巨大的经济损失。本研究建立了基于传染性胸膜肺炎放线杆菌的APXⅣA毒素基因,副猪嗜血杆菌16SrRNA和猪链球菌2型CPS2J基因序列的三重PCR检测方法,经实验检测,具有很好的重复性,特异性和敏感性,并应用此方法对一些临床样品成功进行了检查。首先,是副猪嗜血杆菌,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和猪链球菌三重PC(文章此处忽略..)R方法的建立:针对传染性胸膜肺炎的APXⅣA毒素基因,猪链球菌2型CPS2J基因和副猪嗜血杆菌16SrRNA序列各设计1对特异性引物,分别能扩增出242bp,822bp和500bp的DNA片段。将三对引物置于25微升体系进行优化,经过对阳性模板的扩增,找出最优反应体系,并经酶切鉴定,确定目的片段得到了正确扩增。重复性,特异性实验表明:该实验具有很好的重复性,对多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等具有特异性。敏感性实验表明:最低可检测到的细菌含量为:HP(本文此处忽略..)S620cfu;SS890cfu;APP1260cfu。;最低可以检测到的细菌核酸量为:HPS2.41ng/ml;SS930pg/ml;APP1.48ng/ml其次,对采集的50份病料进行常规的细菌分离鉴定后,用本研究所建立的三重PCR及单PCR进行检查,结果表明,该三重PCR方法灵敏度与常规单PCR完全吻合,比常规细菌分离鉴定方法准确。证明本实验建立的副猪嗜血杆菌,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和猪链球菌三重PCR方法在检测上述三种疾病方面具有应用价值。另外,用本方法检测(本文此处忽略..)了采自江苏和安徽的其他230份病料。检测结果表明,当前,副猪嗜血杆菌发病率在呼吸道疾病的发病率中所占比例较高(30.9%),而胸膜肺炎放线杆菌所占比例较低(仅占2.2%),且二重感染比较明显(占7.8%)。用本方法对300份屠宰场外观健康猪的肺脏进行的检测结果表明,当前猪场中存在一定程度的副猪嗜血杆菌威胁(带菌率为13.7%)。


以上为本篇毕业论文范文副猪嗜血杆菌,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和猪链球菌2型三重PCR方的介绍部分。
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