传染性法氏囊病病毒FX株VP2基因的克隆、表达及其免疫原性研究

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传染性法氏囊病病毒FX株VP2基因的克隆、表达及其免疫原性研究

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传染性法氏囊病病毒FX株VP2基因的克隆、表达及其免疫原性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：利用RT-PCR扩增了IBDV阜新(FX)分离株VP2基因,并对扩增序列进行了分析。结果显示FX株VP2基因全长1536bp、编码512个氨基酸;与GenBank中己报道的IBDV毒株相比,VP2基因核苷酸的同源性为54.4%-99.3%,推导的氨基酸序列同源性为46.1%-98.4%;遗传进化分析表明,FX（此处忽略..）株VP2基因与Gt株同源性最高;用DNAstar软件对FX株VP2蛋白抗原表位进行分析,发现其与B87(吉林)株和B87VP2(南京)株存在差异,说明FX株与疫苗株VP2蛋白抗原特性存在差异。利用原核表达质粒pGEX-6P-1,对VP2基因进行了表达。结果表明,经酶切和PCR鉴定,表（本文此处忽略..）明获得了含VP2基因的重组蛋白pGEX-6P-1-VP2。将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,受体菌BL21(DE3)能表达结构蛋白基因VP2,经SDS-PAGE及WesternBlotting分析,表达产物分子量约40KDa,且能与IBDV阳性血清发生特异性的免（文章此处忽略..）疫反应。重组蛋白用GST标签的高亲和树脂层析柱纯化,表达量为1.168mg/mL。用生理盐水、费氏完全佐剂、融合蛋白pGEX-6P-1-VP2免疫健康鸡,四次免疫后,三组鸡同时用IBDVFX株经肌肉注射攻击感染,剂量为100μL/羽,融合蛋白pGEX-6P-1-VP2保护率为40%,佐（略..）剂组保护率10%,对照组鸡全部死亡。结果表明融合蛋白pGEX-6P-1-VP2具有一定的免疫保护力。

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