SYBR Green I荧光PCR检测犬传染性肝炎病毒方法的建立及其初步应

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SYBR Green I荧光PCR检测犬传染性肝炎病毒方法的建立及其初步应

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SYBR Green I荧光PCR检测犬传染性肝炎病毒方法的建立及其初步应毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：犬传染性肝炎是由Ⅰ型腺病毒引起的犬的一种烈性传染病,其发病率和致死率都很高,是危害犬最为严重的疾病之一。迄今为止,该病的诊断方法主要有血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验、间接血凝试验(IHA)、琼脂扩散试验(AGP)、酶标抗体技术、常规PCR等多种方法。这些方法普遍存在特异性差、耗时长、灵敏度低、易出现假阳性等问题,致使病（略..）原诊断始终较困难,所以寻找一种快速准确的诊断方法显得尤为重要。实时荧光PCR技术是一种新型的核酸检测技术,具有极大的应用价值,在临床诊断中已经用于细菌、病毒及遗传性疾病的检测。本研究针对犬传染性肝炎病毒(CAV-Ⅰ)的保守核苷酸序列设计一对引物,以此引物和CAV-Ⅰ的标准毒株DNA为模板,建立并优化了SYBRG（此处忽略..）reenⅠ荧光PCR检测犬传染性肝炎病毒的方法,待测样品的检测结果可以根据扩增曲线和Tm值进行判定。把扩增区克隆测序鉴定,其产物长度为100bp,确认设计引物正确,同时并把克隆质粒作为该方法的阳性对照;特异性试验研究表明,只有CAV-Ⅰ可被特异性扩增,其产物的Tm值为79±0.5℃,而其他干扰毒株均没有典型扩增曲线和熔解（本文此处忽略..）曲线;敏感性试验结果显示该方法比常规PCR方法敏感100倍以上,可以全面代替并优于常规PCR方法;本研究还对所建立的试验方法进行了初步应用,用SYBRGreenⅠ荧光PCR方法与酶联免疫吸附试验和血凝试验对送检的46个出入境样品进行了检测比对,结果表明该方法更适于出入境犬传染性肝炎的检疫。该方法与普通PCR相比具有闭（文章此处忽略..）管操作、无需后处理、无污染和检测时间短等优点,同时具有高度敏感性,成本低廉,可以作为一种快速检测方法应用。经反复试验和探索,根据本研究方法组装了SYBRGreenⅠ荧光PCR检测犬传染性肝炎病毒试剂盒,该试剂盒便于操作、可重复性高,适于在兽医诊断实验室应用推广。

以上为本篇毕业论文范文SYBR Green I荧光PCR检测犬传染性肝炎病毒方法的建立及其初步应的介绍部分。

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