鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其表位的鉴定

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鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其表位的鉴定

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毕业论文范文题目：鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其表位的鉴定，论文范文关键词：鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其表位的鉴定
鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其表位的鉴定毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：鸡传染性支气管炎(Infectiousbronchitism,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectiousbronchitisvirus,IBV)引起鸡的呼吸道、泌尿生殖系统和消化系统损伤的一种急性、高度接触性传染病。自1931年Schalk和Hawn首次报道了该病以来,IBV不断地发展变异,已出现30多种血清型,由于不同血清型毒株之间交叉保护力弱,给IB的诊断及防治带来了极大的困难,造成了养禽（略..）业巨大的经济损失。通过单克隆抗体技术对IBV抗原表位的研究,不但可以深入了解IBV的抗原结构,而且便于设计科学合理的表位疫苗和诊断试剂,对IB的诊治具有重要的意义。本研究将IBVCK/CH/LDL/97Ⅰ作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术,经过Westernblot和间接ELISA方法筛选克隆后,最终获得了一株能够稳定分泌IBVN蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株6D10。单克（略..）隆抗体重链为IgG1亚型,轻链为κ链。MAb6D10特异性良好,可与IBVCK/CH/LDL/97Ⅰ毒株和重组N蛋白发生特异性反应,为进一步鉴定N蛋白抗原表位和深入研究其功能奠定了基础。为了鉴定MAb6D10对应的抗原表位,本实验利用制备的IBVN蛋白MAb6D10为靶分子对噬菌体展示随机12肽库进行生物淘选。经过3轮淘选,获得一致序列FGPRTK。此序列与IBVN蛋白242FGPRTK247序列完全一致。人工合成这段多肽的（本文此处忽略..）基因编码序列并进行原核表达,再利用MAb6D10对表达产物进行Westernblot和ELISA分析,结果显示,表达FGPRTK的融合蛋白均可被MAb6D10特异性识别,由此表明242FGPRTK247为IBVCK/CH/LDL/97Ⅰ株N蛋白的一个线性B细胞抗原表位。为了检测该表位的反应原性,实验又将表位融合蛋白与鸡的IBV阳性血清进行ELISA检测,结果表位多肽与鸡的IBV阳性血清反应性良好。同源性分析发现（文章此处忽略..）,表位序列FGPRTK与所比较的不同血清型IBV毒株N蛋白相对应区域的氨基酸序列(242~247aa)的同源性为100%,因此本实验鉴定的表位是IBVN蛋白一个保守的线性B细胞抗原表位。该实验结果为进一步了解IBVN蛋白抗原结构和功能的关系,以及为建立IBV诊断方法奠定了基础。

以上为本篇毕业论文范文鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其表位的鉴定的介绍部分。

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