免疫捕捉PCR技术在严重传染病快速检测中的应用

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免疫捕捉PCR技术在严重传染病快速检测中的应用

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毕业论文范文题目：免疫捕捉PCR技术在严重传染病快速检测中的应用，论文范文关键词：免疫捕捉PCR技术在严重传染病快速检测中的应用
免疫捕捉PCR技术在严重传染病快速检测中的应用毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：免疫捕捉PCR技术(ImmunocapturedPCR,ic-PCR)是利用免疫捕捉法对传染病病原的高效富集,结合PCR技术特异扩增,是理想的快速诊断方法之一。本文探讨ic-PCR法在四种严重传染病病原:霍乱弧菌(VC)、大肠埃希氏菌O157(E.coliO157)、SARS冠状病毒和流感病毒(AIV)检测中的应用。1.三种免疫捕捉法:微孔板(Microwell)、200ulPCR管(microtube)和免疫磁珠(IMS),均可从环境样品和人体样品中（文章此处忽略..）特异捕捉霍乱弧菌(VC)、大肠埃希氏菌O157(E.coliO157)、SARS冠状病毒和流感病毒(AIV),较传统的分离培养方法可节省大量时间。免疫磁珠(IMS)法因可处理的样品量大,反应动力学特性更佳,是最合适的免疫捕捉方法。2.细菌的检测:在O1、O139群霍乱弧菌的群特异性抗原基因(rfb)和肠毒素基因(ctx)上,设计3对引物进行多重PCR,一次PCR反应即可检测出霍乱弧菌,区分血清群别及是否为流行毒株。PCR扩增序列与预计序列完全一致,检测（略..）限低于100cfu/ml;根据大肠埃希氏菌O157(E.coliO157)的rfb基因设计的巢式PCR引物扩增,可特异扩增497bp片段,序列与S83460完全一致,检测限约102cfu/ml,免疫磁珠(IMS)法略高于200ulPCR管(microtube)法。3.SARS冠状病毒的检测:微孔板(Microwell)法捕捉的病毒颗粒,经热裂解后荧光RT-PCR检测SARS病毒RNA的保守序列(15250-15650)片段,临床标本检测未出现假阳性结果,避免了直接提取标本总RNA进行荧光RT（本文此处忽略..）-PCR检测时产生假阳性的干扰,检测限10~1copies,灵敏度比推荐用的荧光RT-PCR试剂盒标称值提高了10倍,在临床病人的诊断上具有重要的参考意义。4.流感病毒(AIV)的检测:流感病毒(AIV)对人类危害最大的主要是A/H1和A/H3两型。200ulPCR管(microtube)结合RT-PCR扩增NP基因,检测限约为10~2个病毒粒子,含漱液检测未出现非特异扩增,检出率比细胞培养法提高约50%。但以免疫磁珠法结合RT-PCR扩增,灵敏度反（文章此处忽略..）而较microtube法低100倍,这可能与免疫磁珠的反应活性及RNP颗粒的完整性有关。因此我们设想ic-RTPCR法检测流感病毒的更理想策略是,以衣壳蛋白MP的抗体制备免疫磁

以上为本篇毕业论文范文免疫捕捉PCR技术在严重传染病快速检测中的应用的介绍部分。

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