水痘—带状疱疹病毒疫苗株在Vero细胞中传代适应及ELISA检测血清IgG研究

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水痘—带状疱疹病毒疫苗株在Vero细胞中传代适应及ELISA检测血清IgG研究

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毕业论文范文题目：水痘—带状疱疹病毒疫苗株在Vero细胞中传代适应及ELISA检测血清IgG研究，论文范文关键词：水痘—带状疱疹病毒疫苗株在Vero细胞中传代适应及ELISA检测血清IgG研究
水痘—带状疱疹病毒疫苗株在Vero细胞中传代适应及ELISA检测血清IgG研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：水痘是由水痘-带状疱疹病毒(Varicella-Zostervirus,VZV)引发的世界性传染疾病。为了研制疫苗和有效诊断水痘,本文研究了VZV疫苗株在Vero细胞中传代适应、制备VZV抗原工艺和ELISA方法。将VZV疫苗株在Vero细胞中连续传代培养,传至第9代时,CPE明显增多,病毒滴度从2～3logPFU/ml提高到≧4.2logPFU/ml,能在超低温条件下稳定保存（本文此处忽略..）,表明毒株获得了适应性,可用于制备VZV抗原。培养条件试验表明,15L瓶旋转培养的适宜MOI(接种比例,logPFU/cell)为0.01,收获时间在60～96h。收获病变细胞,经超声破碎、离心,制备了VZV全病毒ELISA(VARELISA)抗原。用TritonX-100裂解,通过LentilLectinSephrose4B亲和层析纯化,制备了VZV糖蛋白ELISA(gpELISA)抗原,具有VZV（略..）特异性糖蛋白。两种抗原的稀释度达1:3000～1:4000。研究了VZVVARELISA和gpELISA的反应条件,建立了相应的方法学。两种抗原最适使用稀释度为1:4000,pH7.4的PBS缓冲液为包被液,10%新生牛血清为封闭液,抗原抗体反应时间为120min,酶标抗体工作浓度为1:120,辣根过氧化物酶作用底物为邻苯二胺,酶标抗体反应时间为120min。VerogpELISA和VARELISA抗原加保护剂具有保存稳定（略..）性和可重复性。VerogpELISA检出WHOVZV国际标准血清的抗体滴度较VARELISA提高了4倍,检出下限分别为195mIU/ml和781mIU/ml,所得结果与国外成品试剂盒相符。应用抗原,通过筛查,获得了VZV阳性血清,测出的抗VZVIgG几何平均滴度优于人胚肺二倍体2BS细胞制备的VARELISA。VZV疫苗株在Vero细胞中能传代适应、制备毒种,用15L瓶旋转培养可大量（略..）制备VZV抗原。建立了Vero细胞制备的VZVIgGVARELISA和gpELISA,方法的灵敏度、特异性和可重复性良好。因此,Vero细胞用于VZV诊断制品的研究和生产是可行的,本研究为今后两种试剂盒的标准化和商品化奠定了基础。

以上为本篇毕业论文范文水痘—带状疱疹病毒疫苗株在Vero细胞中传代适应及ELISA检测血清IgG研究的介绍部分。

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