禽传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

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禽传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

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毕业论文范文题目：禽传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其特性研究，论文范文关键词：禽传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其特性研究
禽传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其特性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：鸡传染性支气管炎(InfectiousBronchitis,IB)，也叫禽传染性支气管炎(AvainInfectiousBronchitis)，由冠状病毒属(coronavirus)的成员鸡传染性支气管炎病毒(InfectiousBronchitisvirus,IBV)引起，是一种急性高度接触性的病毒性传染病，常引起鸡业严重的经济损失。感染鸡只主要表现呼吸道、消化系统和泌尿生殖系统的疾患。Schalk和Hawn于1931年首次报道了该病，其后IBV不断地发展、变异，目前已（本文此处忽略..）出现100多种血清型。由于不同血清型毒株之间交叉保护力弱，给IB的诊断及防治带来了极大的困难。通过单克隆抗体技术对IBV抗原表位的研究，不但可以深入了解IBV的抗原结构，而且便于设计科学合理的表位疫苗和诊断试剂，对IB的诊治具有重要的意义。本研究将IBVck/CH/LDL/091022作为免疫原，免疫6~8周龄BALB/c小鼠，采用传统细胞融合技术，经过Westernblot、间接ELISA以及有限稀释法筛选克隆后，最终获得2株能够稳定分泌针对IBV的单克隆抗体(Monoc（此处忽略..）lonalAntibody,ＭAb)的杂交瘤细胞株，分别命名为MAb2F2和MAb3G9。MAb2F2和MAb3G9的重链均为IgG1、轻链均为к。Westernblot和ELISA检测结果显示2株单抗均能与ck/CH/LDL/091022以及其他几种血清型毒株反应。MAb2F2与毒株反应的特异性条带大小为45kDa，MAb3G9与毒株反应的特异性条带大小为90kDa。通过制备IBVN蛋白和S1蛋白的重组蛋白并用该蛋白与2株单克隆抗体进行反应，结果表明MAb2F2为抗IBVN蛋白的单克隆抗体，MAb3G9为抗（本文此处忽略..）IBVS1蛋白的单克隆抗体。为了进一步对MAb2F2识别的抗原表位进行精确定位，以研究该表位在不同型IBV中的保守性或变异特点，以便为进一步研发诊断方法或诊断试剂提供依据，本实验设计了23段具有部分重叠的，带GST标签且覆盖N蛋白的短肽，利用Pepscan技术原理，通过Westernblot和ELISA检测方法，最终鉴定出MAb2F2识别的表位序列为397INWGDSAL404。通过将不同毒株与单克隆抗体进行Westernblot，同时分析已报道病毒的对应序列，结果显示该表（此处忽略..）位反应原性较好，且表位序列在大部分冠状病毒毒株中均保守。由于S1亚基与IBV中和活性有关，因此为了探究MAb3G9的中和活性，本研究采用固定血清稀释病毒的方法，对MAb3G9进行中和活性检测，结果显示MAb3G9的中和指数为117，中和活性较高。该抗体可作为进一步研发IBV诊断试剂或治疗制剂的候选抗体。

以上为本篇毕业论文范文禽传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其特性研究的介绍部分。

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