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2005-2006年鸡传染性支气管炎病毒中国分离株分子流行病学研究

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毕业论文范文题目:2005-2006年鸡传染性支气管炎病毒中国分离株分子流行病学研究,论文范文关键词:2005-2006年鸡传染性支气管炎病毒中国分离株分子流行病学研究
2005-2006年鸡传染性支气管炎病毒中国分离株分子流行病学研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:本研究从我国8个省市分离或收集到2005-2006年间的12株IBV病毒,并对其生物学特性进行了研究,以说明我国IBV毒株之间以及与参考毒株之间基因的遗传变异情况及系统进化关系,同时阐明我国IBV的基因型,探讨我国IB流行的背景和原因。采取现地濒死病鸡病变组织处理后,经鸡胚尿囊腔接种9-11日龄SPF鸡胚,收集72h尿囊液,同时观察胚体病变,通过致SPF鸡胚病变特征、病毒对鸡外周血红细胞凝集特性、病毒粒子形态学特征等方面的研究,结果发现,鸡胚传毒传2-8代后,死亡鸡胚表现出生长发育障碍,胚体弥漫性出血,未死亡鸡胚呈现典型的卷曲胚;病毒尿囊液不凝集鸡的外周血红细胞;在电镜下呈球形,病毒囊膜表面有疏松排列的棒状纤突,具有冠状病毒粒子的(此处忽略..)形态特征,未发现有其它病毒粒子的存在。所以可初步断定本研究所分离的病毒为鸡传染性支气管炎病毒。本研究应用RT-PCR方法扩增到了我国2005-2006年8个省市的12株IBV现地分离株的S1和部分N蛋白基因,并将其进行了克隆、序列测定及分析,为了说明我国IBV毒株之间以及与参考毒株之间基因的遗传变异情况,同时构建了系统进化树,分析了我国IBV分离株与参考毒株之间的系统进化关系。通过S1基因系统进化树分析发现,本实验中所分离的8株IBV毒株与分布于同一群内的我国分离毒株LX4具有较高的同源性(95.3-97.0%),并且此群毒株间的S1基因推导氨基酸序列具有较高的同源性(91%),亲缘关系较近,而与我国目前用于IB预防的主要活疫苗H120属于不同的基因型且氨基酸(此处忽略..)序列同源性较低(≤80.1%),这可能是导致IB疫苗免疫失败或只能产生部分免疫保护作用,以致IB在鸡群中不断发生的主要原因之一;还发现,毒株CK/CH/LSD/05I可能为一变异毒株。结合S1及N基因系统进化树分析可知:在S1基因系统进化树分析中,毒株CK/CH/LDL/05I、CK/CH/LNM/05I和CK/CH/LGX/06I与毒株tl/CH/LDT3/03属于同一进化群,并且此三个毒株具有较高的氨基酸同源性,同时,此三个毒株具有相同的插入和缺失位点,具有相似的纤突蛋白裂解位点,然而经过N基因系统进化树分析得知,毒株CK/CH/LNM/05I和CK/CH/LGX/06I与毒株CK/CH/LDL/05I和tl/CH/LDT3/03的N基因属于不同(文章此处忽略..)的基因进化群;此外还发现,毒株CK/CH/LSD/05I与疫苗株H120的N基因同源性最高(93.4%)。以上分析表明毒株CK/CH/LSD/05I可能是在IB疫苗免疫选择压力下所产生的变异毒株;毒株CK/CH/LNM/05I和毒株CK/CH/LGX/06I可能发生了基因重组;同时,以疫苗株H120作为参考毒株,分析发现,12株IBV分离株在S1蛋白基因的HVR1和HVR2高变区内含有较多插入和缺失现象;N基因及其局部功能区序列存在广泛的氨基酸替代现象。以上分析结果表明,我国IBV分离株存在较为广泛的基因突变、插入和缺失,同时,IBV毒株间的基因重组也可能是我国IBV变异株产生的另一主要原因。经S1基因系统进化树分析发现,本实验所分离的大多数IB(本文此处忽略..)V毒株(8/12)分布于同一基因进化群内,并且亲缘关系较近,因此,我们对此群中IBV毒株CK/CH/LDL/05II的致病性进行研究,以10~(5.5)×EID_(50)/0.1ml的病毒接种15日龄的SPF雏鸡,鸡群发病率为22/22(100%),死亡率为12/22(54.5%),死亡鸡以肾脏肿大、苍白、外观呈现典型的“花斑肾”,肾小管和输尿管扩张并且有尿酸盐沉积为主要病理变化。


以上为本篇毕业论文范文2005-2006年鸡传染性支气管炎病毒中国分离株分子流行病学研究的介绍部分。
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