鸡传染性支气管炎病毒（793/B）M基因与截短M基因的克隆测序、原核表达及鉴定

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鸡传染性支气管炎病毒（793/B）M基因与截短M基因的克隆测序、原核表达及鉴定

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毕业论文范文题目：鸡传染性支气管炎病毒（793/B）M基因与截短M基因的克隆测序、原核表达及鉴定，论文范文关键词：鸡传染性支气管炎病毒（793/B）M基因与截短M基因的克隆测序、原核表达及鉴定
鸡传染性支气管炎病毒（793/B）M基因与截短M基因的克隆测序、原核表达及鉴定毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：鸡传染性支气管炎(InfectiousBronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectiousbronchitisvirus,IBV)引起的一种急性高度接触性传染病。自30年代在美国爆发以来,现已成为世界各地流行的重要禽病。IBV是单股RNA病毒,该病毒基因可因点突变和重组而发生变异,故传染性支气管炎病毒血清型较多。已知的血清型有以侵害呼吸道为主的Conn、Iowa97、JMK、Florida、Arkansas99等和以侵害肾脏为主的M41、Holte、Gray、Australia“T”等30余种。Gough（本文此处忽略..）等(1992)报道了英国一种新的793/B血清型的IBV,该毒株和其它血清型传支毒株之间无交叉血清学关系;其免疫原基因S1的序列与欧洲17个传支毒株之间差异高达21～25%。目前,该血清型IBV在西班牙、德国、荷兰、意大利、泰国等国均有发生和流行,对养鸡业危害较大。2003年刁有祥、杨杰华等从山东省某蛋鸡饲养场产蛋异常下降鸡群中分离到一株793/B传染性支气管炎毒株,命名为TA03株。在此基础上,于申业等建立了鸡传染性支气管炎病毒(IBV)793/BRT-PCR检测方法及IBV(793/B)TA03株S1基因的克隆与表达;孟凡磊等对IBV(793/B)TA03株N基因进行了序列分析及地高（略..）辛标记探针、双重RT-PCR检测方法的建立与应用。根据GenBank已发表的传染性支气管炎病毒(IBV)全基因组序列设计引物,对793/B型IBV分离毒株TA03M基因进行克隆与序列分析。结果表明,793/B型IBV的M基因由669bp组成,与GenBank已发表的15株IBV的M基因相比较,793/B型IBV的M基因在第4～15位发生了3～12个核苷酸的缺失,对应1～4个氨基酸的缺失,共有30多处点突变。与其它各毒株M基因的核苷酸同源性为84.2%～93.6%,氨基酸同源性为82.1%～96.0%;进化分析显示TA03株与H52和IBN毒株之间的亲缘关系较近。该研究为进一步探讨793/B型IBV（本文此处忽略..）M基因(蛋白)在遗传变异和免疫等方面的作用奠定了理论基础。应用生物信息学技术推测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)变异株(793/B)M基因的抗原位点,应用DNAStar软件针对M基因及其抗原表位片段设计3对引物,PCR扩增并成功构建了M基因的pGEX6p-M和2种截短M基因的pGEX6p-M1、pGEX6p-M2原核表达质粒,SDS-PAGE检测分别在50kDa、32kDa和29kDa处有特异性表达条带,表明GST-M、GST-M1和GST-M2重组蛋白获得成功表达;Westernblot检测显示GST-M和GST-M1重组蛋白能被鼠抗IBV(793/B)血（本文此处忽略..）清识别,而GST-M2重组蛋白不能被识别。试验结果表明GST-M与GST-M1重组蛋白具有良好的抗原性,初步证实了M蛋白抗原表位的存在,为进一步研究IBV(793/B)M蛋白的免疫原性和制备基因工程疫苗提供了重要依据。

以上为本篇毕业论文范文鸡传染性支气管炎病毒（793/B）M基因与截短M基因的克隆测序、原核表达及鉴定的介绍部分。

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