辛伐他汀对2型糖尿病状态下心肌Bcl-2、P53基因表达的影响

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辛伐他汀对2型糖尿病状态下心肌Bcl-2、P53基因表达的影响

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毕业论文范文题目：辛伐他汀对2型糖尿病状态下心肌Bcl-2、P53基因表达的影响，论文范文关键词：辛伐他汀对2型糖尿病状态下心肌Bcl-2、P53基因表达的影响
辛伐他汀对2型糖尿病状态下心肌Bcl-2、P53基因表达的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:糖尿病患者发生心力衰竭的比例显著高于非糖尿病患者,其中糖尿病心肌病是其原因之一,而心肌细胞凋亡在糖尿病心肌病的发生、发展过程中起一定作用。本文主要从Bcl-2、P53基因及蛋白方面着手,观察糖尿病状态下,心肌细胞这两个基因会出现哪些变化。辛伐他汀(舒降之)属于3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-coA)还原酶抑制剂(他汀类药物)的一种,具有良好的降低血脂的功能,据报道还有以下作用:(1)改善血管内皮功能,(2)抑制粥样斑块炎症反应,(3)增加粥样斑块稳定性,(4)抑制血栓形成等。据文献报道舒降之除了上述作用外,还能影响细胞的生长、增殖等,而且研究表明他汀类降脂药对于脑血管具有保护作用,那么,对于心血管系统是否具有同样的保护作用呢?二甲双胍是临床上的经典用药,在糖尿病的防治中有着广泛的应用,其对心脏是否存在保护作用呢,尚不知晓。基于上述目的,本实验采用高脂饮食诱导出胰岛素抵抗再加小剂量STZ的方法,成功诱导出2型糖尿病大鼠模型,在此基础上给予辛伐他汀灌胃,以二甲双胍作为对照。在此基础上,观察心肌细胞中P53、Bcl-2基因及其蛋白的表达是否发生变化;以此来探明辛伐他汀对于糖尿病心肌病的保护作用,对糖尿病患者发生心力衰竭的防治具有（本文此处忽略..）重要的理论和实践意义。方法:1实验动物分组及标本处理本实验大鼠共分五组,正常组、胰岛素抵抗组、糖尿病组、二甲双胍组和辛伐他汀组。具体方法为:8周龄雄性SD大鼠35只,体重200-220克,适应性喂养一周后,分为正常对照组5只和高脂组30只,对照组喂普通饲料,高脂组喂养高脂饲料,其中脂肪主要为猪油,热量组成为碳水化合物占20.1%,脂肪占59.8%,蛋白质占20.1%。8周后,通过口服糖耐量试验(oralglucosetolerancetest,OGTT)证实高脂组大鼠产生了胰岛素抵抗,从中分成5只作为胰岛素抵抗组,其余高脂组大鼠禁食12h后,一次性注射小剂量2%STZ(STZ临用前用0.1M,PH4.2柠檬酸钠缓冲液配置)25mg/kg;注射72h后尾静脉采血,测定禁食6h后的空腹血糖,血糖值7.8mmol/L的大鼠纳入糖尿病组,随机分为单纯糖尿病组7只,二甲双胍组8只,辛伐他汀组8只,继续用高脂饲料喂养6周,同时二甲双胍组和辛伐他汀组每天给予灌胃,剂量分别是500mg/kg.d和25mg/kg.d。单纯糖尿病组以生理盐水灌胃。实验动物处死前禁食12h,次日25%乌拉坦6ml/kg腹腔注射麻醉,打开胸腔,迅速取出心脏,剪去血管和心脏周围结缔组织,用4℃预冷生理盐水冲洗,立即置于液氮中,分装后-80℃冻存,用于（本文此处忽略..）提取总RNA,测定心肌组织中Bcl-2和P53基因的表达。2血中葡萄糖的测定用氧化酶法测定。3Bcl-2、P53基因mRNA表达的测定用Trigol法提取心肌组织总RNA。以GAPDH作为内参照,RT-PCR法测定心肌p53、bcl-2mRNA的相对表达量。4Bcl-2、P53基因相应蛋白表达的测定提取心肌组织的总蛋白,以β-actin作为内参照测定各蛋白的相对表达量。5数据处理所有数据均用?x±s表示,采用SPSS13.0软件进行统计学处理分析,组间比较用单因素方差分析检验,检验以P0.05为差异有显著性意义。结果:1造模1.1OGTT试验高脂组各个时间点血糖值均高于对照组,差异均有统计学意义(P0.01)。1.2大鼠的血糖STZ腹腔注射后3天,检测高脂组大鼠空腹血糖值均符合2型糖尿病标准,平均值为14.49±3.67mmol/L,胰岛素抵抗组为5.25±0.43mmol/L,差异有统计学意义(P0.01),说明造模成功。2Bcl-2、P53基因mRNA的相对表达量的变化2.1Bcl-2mRNA的相对表达量RT-PCR结果显示在261bp处可见明显条带,密度扫描分析结果正常对照组为0.5882±0.128732,糖尿病组为0.6345±0.089355,二甲双胍组为1.0107±0.118929,辛伐他汀组是0.4148±0.117093。辛伐他汀组和糖尿病组相比相对表达量明显下降(P0.05),糖尿病组是（本文此处忽略..）辛伐他汀组的1.52倍,正常对照组是辛伐他汀组的1.41倍,二甲双胍是糖尿病组的1.6倍,。2.2p53mRNA的相对表达量RT-PCR结果显示在225bp处可见明显条带,密度扫描分析结果正常对照组为0.6729±0.0933,糖尿病组为0.6255±0.0365,二甲双胍组为0.6992±0.0606,辛伐他汀组为0.5147±0.0599。辛伐他汀组和糖尿病组相比相对表达量下降(P0.05)。糖尿病组是辛伐他汀组的1.22倍,正常对照组是辛伐他汀组的1.31倍。3Bcl-2、P53蛋白相对表达量的变化3.1Bcl-2蛋白的相对表达量Westernblot结果显示26KD处有一个条带,,密度扫描分析结果为正常对照组为0.6082±0.3827,糖尿病为0.6253±0.0735,二甲双胍组为0.9872±0.1359,辛伐他汀组为0.5023±0.0926。辛伐他汀组和糖尿病组相比相对表达量明显下调(P0.05),糖尿病组是辛伐他汀组的1.24倍,正常对照组是糖尿病组的1.21倍。3.2p53蛋白的相对表达量Western结果显示49KD处有一个条带,密度扫描分析结果为正常对照组为0.7352±0.0874,糖尿病为0.7885±0.0923,二甲双胍组为0.8002±0.0688,辛伐他汀组为0.6354±0.0675。辛伐他汀组和糖尿病组相比相对表达量明显下调(P0.05),糖尿病组是辛伐他汀组的1.24倍,正常对照组是舒降之组的1.16倍。结论:12型糖尿病时,糖尿病心肌病的发生率增加,这与心肌细胞中增殖、凋亡基因表达变化有密切关系。22型糖（文章此处忽略..）尿病时,辛伐他汀对机体只起到降低血脂的作用,二甲双胍除了可以降低血糖外,还可能对心肌细胞中增殖、凋亡基因的表达起到调节作用,但是具体作用机制需要进一步研究,故辛伐他汀和二甲双胍对心肌的保护作用尚需要进一步探讨。

以上为本篇毕业论文范文辛伐他汀对2型糖尿病状态下心肌Bcl-2、P53基因表达的影响的介绍部分。

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