丹参酮ⅡA磺酸钠注射液抗肝纤维化的实验研究

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丹参酮ⅡA磺酸钠注射液抗肝纤维化的实验研究

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毕业论文范文题目：丹参酮ⅡA磺酸钠注射液抗肝纤维化的实验研究，论文范文关键词：丹参酮ⅡA磺酸钠注射液抗肝纤维化的实验研究
丹参酮ⅡA磺酸钠注射液抗肝纤维化的实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：肝纤维化(HepaticFibrosis)是肝细胞发生坏死及炎症刺激时，肝内纤维及成纤维结缔组织增生的病理过程，是慢性肝病可逆转的重要病理阶段，也是发展为肝硬化形成的物质基础。肝星状细胞(HSC)是位于Disse间隙的一种间质细胞。肝损伤后期表型发生转变，可大量增殖并产生各种细胞外基质，并可通过分泌基质金属蛋白酶组织抑制物而抑制细胞外基质降解，故在肝纤维化的发生发展中起重要作用。临床上以肝脏活检为诊断肝纤维化的最可靠方法。体内实验研究以血清学四项指标和病理学检测居多。我国肝病发病率极高，据保守估计各类肝炎病毒携带者及患者超过一亿，对肝纤维化可逆转阶段的药物干预研究具有重要的理论意义和应用价值。目的：丹参酮ⅡA磺酸钠注射液目前临床用于心血管病的治疗，因其疗效确切，该药的社会需求将会逐渐增加。此药的生产工艺也已经很成熟，并且丹参已实现规范化种植(GAP)。这将为其在将来的治疗肝纤维化的新的（略..）临床应用带来极大方便和良好前景。丹参已有抗肝纤维的研究报道，丹参酮ⅡA有促进HSC凋亡的初步研究。但是丹参酮ⅡA磺酸钠注射液还无相关报道。本课题通过研究该制剂体内和体外的抗肝纤维化的作用和机制为其抗肝纤维化的临床应用提供理论依据。对此药新药理作用的研究开发必会带来广阔的社会效益和经济效益。方法：体外研究：1．体外细胞的培养：表型活化的HSC-T_6细胞用含10％胎牛血清的DMEM(高糖)培养基。置于37℃，S％CO_2恒温细胞培养箱中培养，当细胞呈单层贴壁生长至80％90％时进行传代2．台盼蓝染色检测HSC-T_6细胞存活率3．MTT比色法检测丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对HSC-T_6细胞增殖的影响4．细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)活性检测5．放免法检测丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对HSC分泌Ⅳ型胶原(cⅣ)的影响6．ELISA法检测丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对HSC分泌TGF-β_1蛋白的影响7．流式细胞仪检测丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对H（略..）SC凋亡率的影响8．对照组与药物组培养瓶或培养板置于倒置显微镜下连续动态观察丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对HSC细胞作用后的形态9．荧光染色观察正常、凋亡和死亡HSC体内研究1．模型制备：河南省实验动物中心购买清洁级大鼠108只，除正常对照组外各受试动物均采用未灭活猪血清腹腔注射，2次/周，每次0.5ml/只，连续8W。2．病理标本的制备：取肝脏左叶相同部位，常规固定、石蜡包埋、切片，做HE染色观察肝细胞变性、坏死程度3．放免法检测血清纤维化指标HA、LN、PCⅢ及Ⅳ-C的含量变化结果：体外1．随着丹参酮ⅡA磺酸钠注射液作用时间延长和药物浓度递增，HSC增值抑制的效应逐渐明显，并表现出良好的量-效相关性和时-效相关性。2．细胞形态学观察可见随着药物浓度的增加HSC分裂增殖趋于缓慢，细胞外形也从不规则的星形、梭形等变为椭圆形，圆形，并有碎裂现象。3．丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对于HSC的抑制作用不是非特异性细胞毒性（本文此处忽略..）所致。4．Ⅳ型胶原含量随着药物浓度的增加而逐渐减少，各药物组和对照组之间差异具有显著性。5．TGF-β_1蛋白含量随着药物浓度而逐渐减少。实验组与对照组相比TGF-β_1蛋白含量均有显著性差异。6．HSC的凋亡率随药物浓度增加而增加具有一定的量-效关系。体内动物情况：正常对照组发育良好，活动正常。模型组动物状态一般，体重增加缓慢但无显著性差异，药物组状态比模型组较好。病理观察：空白对照组肝脏中肝小叶分界不清，结构完整，无坏死，无炎细胞浸润及纤维组织增生(图1)。模型组肝组织病理损害严重，肝索排列紊乱，肝小叶结构被破坏，肝小叶周围明显坏死，形成假小叶，经过丹参酮ⅡA磺酸钠注射液给药后，高、中、低剂量预防组和治疗组均未出现假小叶，并且高、中剂量组纤维增生较少，局限于汇管区，肝小叶结构轻度紊乱。(图3图4)；低剂量组疗效较差，纤维组织由汇管区向周围延伸(图5)。丹参酮HA磺酸钠注射液对血清HA、CⅣ、PCⅢ、（略..）LN的影响：模型组与正常对照组相比，大鼠血清中的HA、CⅣ、PCⅢ、LN显著升高。与模型组相比，丹参酮ⅡA磺酸钠各剂量组的预防组和治疗组均在不同程度出现大鼠血清中HA、CⅣ、PCⅢ、LN显著降低，且高剂量组的降低最多。结论：体外1．丹参酮ⅡA磺酸钠注射液随着作用时间延长和药物浓度递增，HSC增值抑制的效应逐渐明显，并呈现出良好的量-效和时-效关系；并使HSC形态发生变化。2．丹参酮ⅡA磺酸钠注射液体外能抑制HSCⅣ型胶原合成、TGF-β_1蛋白表达和促进HSC的凋亡。体内1．丹参酮ⅡA磺酸钠注射液在病理学上能使免疫肝损伤肝纤维化大鼠的肝纤维化减轻或逆转2．丹参酮ⅡA磺酸钠注射液能使免疫性肝损伤肝纤维化大鼠的血清学指标HA、CⅣ、PCⅢ、LN均明显降低

以上为本篇毕业论文范文丹参酮ⅡA磺酸钠注射液抗肝纤维化的实验研究的介绍部分。

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