口服抗CD3抗体抑制大鼠动脉粥样硬化的研究

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口服抗CD3抗体抑制大鼠动脉粥样硬化的研究

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毕业论文范文题目：口服抗CD3抗体抑制大鼠动脉粥样硬化的研究，论文范文关键词：口服抗CD3抗体抑制大鼠动脉粥样硬化的研究
口服抗CD3抗体抑制大鼠动脉粥样硬化的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：中国卫生部统计信息中心2006年发布的《中国卫生事业发展情况统计公报》显示,动脉粥样硬化性疾病呈年轻化趋势,发病率及死亡率逐年增高,严重威胁着人类的健康,已成为我国主要的死亡原因之一。动脉粥样硬化的形成和发展是多种因素所致,其发病机制有多种学说,包括脂质浸润学说、血栓形成学说、动脉平滑肌细胞增殖学说以及损伤反应学说。近年有一些专家提出,动脉粥样硬化与动脉壁在炎症条件下发生的固有和获得性免疫有关,是动脉壁对各种损伤的炎症-增殖反应,许多免疫细胞都在动脉粥样硬化的进展中起着重要的作用,如T淋巴细胞、B淋巴细胞等。有人提出一种新型CD4+CD25+调节性T细胞是体内一群具有免疫调节功能的T细胞,已经明确其影响动脉粥样硬化的发生、发展。在急性冠脉综合征患者外周血CD4+CD25+Treg比例下降,而在动物模型中过继性的转移这种调节性T细胞则能使已经形成的动脉粥样硬化斑块的面积缩小。转化生长因子-β1(TGF-β1)是CD4+CD25+Treg分泌的代表性因子,在动脉粥样硬化形成过程中,TGF-β1参与免疫生理调节的多个通路和环节,是双向调控因子,一方面能缓解损伤反应、保护细胞,另一方面又引起细胞外基质的过度沉积、组织纤维化,参与再狭窄、血管和心肌重塑等系列的病理变化。CD4+CD25+Tr（本文此处忽略..）eg在体内扩增及发挥抑制作用需要TGF-β1信号的参与。有研究发现,应用抗CD3单克隆抗体后小鼠体内CD4+CD25+调节性T细胞明显增多,可用于治疗器官移植排斥及自身免疫性疾病,但是对于口服后是否可以抑制动脉粥样的研究较少。本研究以动脉粥样硬化大鼠为模型,给予口服抗CD3抗体进行干预,应用HE染色观察主动脉弓斑块动脉粥样硬化程度,检测其血脂水平,通过免疫组化法观察主动脉壁转化生长因子p1(TGF-β1)的表达,进行半定量分析,并用ELISA法检测血清中TGF-β1含量,明确抗CD3抗体与TGF-β1之间的关系,并探讨其抑制动脉粥样硬化的可能机制。实验目的：观察口服抗CD3抗体抑制大鼠动脉粥样硬化的作用及其与TGF-β1的关系实验方法：将31只健康雄性Wistar大鼠(体重220+10g),随机分为以下3组,并分别测量其体重：1、正常对照组大鼠10只,以正常饲料、普通饮水饲养5周。2、动脉硬化组大鼠12只,先以正常饲料和普通饮水饲养1周,然后在正常饲料的基础上加入2%胆固醇、0.2%丙基硫氧嘧啶、0.5%胆酸钠、维生素D3粉剂(1.25×106u/kg饲料)和3%猪油,并同时给予每只大鼠维生素D3腹腔注射,40万u/kg/d体重,连续3天。3、药物组(抗CD3抗体组)大鼠9只,和动脉硬化组行相同促动脉粥样硬化饲料饮食、维生素D3注射,并在给予促动脉粥样硬化饮食时（此处忽略..）开始连续给予插管灌胃口服抗CD3抗体5天,25ug/d。样本处理：5周后再次测量其体重。取材前所有大鼠均禁食12小时。将大鼠放入一透明密闭的玻璃容器内,底部预置少量浸过乙醚的脱脂棉,脱脂棉上垫一筛网,动物吸入乙醚后,lmin-2min后进入麻醉状态,用眼球摘除采血法取血后,颈椎脱臼法处死动物,剪开腹部正中皮肤及肌肉,分离腹主动脉,之后剪下胸腹主动脉,留取主动脉弓下约1cm处的动脉组织1cm,立即用10%甲醛溶液固定,行常规形态学及免疫组织化学检查,以3000rpm×15min离心,分离出血清,离心后的血清置于20℃冰箱保存。取血后化验血脂水平。应用HE染色观察主动脉弓斑块动脉粥样硬化程度,通过免疫组化法观察主动脉壁转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,进行半定量分析,并用ELISA法检测血清中TGF-β1含量,比较正常对照组、动脉硬化组及抗CD3抗体药物组对TGF-β1生成的影响。计量资料运用SPSS16.0统计软件包处理,行单因素方差分析,以χ±s表示,P0.05表示有统计学意义。实验结果：1、体重水平：与实验前比较,正常对照组、动脉硬化组、药物组体重均明显增高(P0.01)；实验后各组间体重变化无明显差异。2、血脂水平：动脉硬化组血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平与正常对照组相比均升高（此处忽略..）(P0.01),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与正常对照组相比明显降低(P0.01)；药物组与动脉硬化组相比,血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平与均显著降低(P0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显增高(P0.01)；药物组与正常对照组相比,血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均无明显差异。3、HE病理染色显示：正常对照组镜下可见血管管壁光滑,主动脉壁层次清晰,内皮细胞扁平胞核略凸向于管腔,中膜平滑肌细胞排列规则,核呈长杆状。动脉硬化组镜下可见血管管壁内膜有大量动脉粥样硬化大斑块形成,内膜呈偏心性增厚,斑块内充满泡沫细胞,中膜平滑肌细胞形态出现改变且可见中膜钙化破损。药物组镜下可见血管管壁有多处小斑块凸向管腔,中膜平滑肌细胞排列较为规则,核呈长杆状,斑块较动脉硬化组明显减少,接近于正常对照组。4、各组大鼠主动脉TGF-β1的免疫组化结果：在正常对照组的内皮细胞和平滑肌细胞的胞浆中,可见大量TGF-p1阳性表达,颜色为深黄色；动脉硬化组TGF-β1阳性表达明显减少,颜色变浅；在药物组的内皮细胞和平滑肌细胞胞浆中TGF-β1阳性表达较动脉硬化组明显增加,为深褐色,呈片状着色,超过正常对照组水平。3、（文章此处忽略..）免疫组化半定量分析显示：TGF-β1的阳性表达用相对灰度值表示：正常对照组(129.76±4.621)、动脉硬化组(171.4±2.708)及药物组(103.08±2.957)三组相比较,动脉内膜及中膜TGF-β1的表达药物组最多(P0.05),高脂组最低(P0.05)。6、ELISA法检测血清TGF-β1,用平均光密度表示：正常对照组(0.301±0.023)、动脉硬化组(0.259±0.040)及药物组(0.368±0.050)三组相比较,血清中TGF-β1的表达药物组最多(P0.05),高脂组最低(P0.05)。结论：1、小剂量口服抗CD3抗体具有明显的抗动脉粥样硬化作用。2、抗CD3抗体抑制动脉粥样硬化的作用可能与TGF-β1上调有关。3、抗CD3抗体可能成为心血管疾病治疗的一种新药。

以上为本篇毕业论文范文口服抗CD3抗体抑制大鼠动脉粥样硬化的研究的介绍部分。

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