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苯丙氨酸解氨酶基因遗传转化水稻的研究

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毕业论文范文题目:苯丙氨酸解氨酶基因遗传转化水稻的研究,论文范文关键词:苯丙氨酸解氨酶基因遗传转化水稻的研究
苯丙氨酸解氨酶基因遗传转化水稻的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:苯丙氨酸解氨酶(PhenylalanineAmmonia-lyase,PAL)是苯丙烷类代谢的关键酶和限速酶,也是类黄酮生物合成途径的限速酶,它的活性与黄酮类化合物的形成呈正相关。黄酮类化合物具有抗肿瘤、防癌抗癌、抗心血管疾病、抗氧化和延缓衰老、免疫调节、抗糖血病等重要的药理作用,人体不能合成黄酮类化合物,主要从食物中摄取。本研究采用基因工程技术,从本实验室筛选(本文此处忽略..)出的黄酮类物质含量特高水稻优异种质“M-1”中克隆的PAL基因,通过农杆菌介导法导入到其它类黄酮含量低稻谷产量高的水稻中,使其在胚乳特异表达,期望选育出稻谷产量高且类黄酮含量高的水稻新品系。主要的研究结果如下:1、植物表达载体PCDMAR-PAL-Hyg的构建:构建了含有PAL基因的双T-DNA植物表达载体的构建PCDMAR-PAL-Hyg,该载体含有两段相互独(文章此处忽略..)立的T-DNA区域,其中一个T-DNA区域含有目的基因PAL,另外一个T-DNA区域含有标记基因Hyg。该植物表达载体选用胚乳特异表达启动子Gt1,驱动PAL基因的表达,在PAL基因的两侧连接的两段正向重复Rb7MARs序列能增强PAL基因的表达。2、无Hyg标记的转基因水稻的获得:采用农杆菌介导的方法,将植物高效表达载体PCDMAR-PAL-Hyg导入到水稻品种(此处忽略..)“TG-9”、“527”、“MH86”中,获得“TG-9”转基因植株153株,经PCR筛选27株呈阳性;获得“527”转基因植株7株,经PCR筛选3株呈阳性;获得“MH86”转基因植株4株,经PCR筛选1株呈阳性。对转基因阳性植株单酶切基因组DNA进行Southern杂交,结果表明目的基因已整合到水稻基因组中,但不同的转基因植株中目的基因有不同的插入位点和拷贝数。对“TG-9”T_1代植株进行PCR鉴定(略..),成功筛选出了含有PAL基因而无Hyg标记的转基因水稻。3、利用紫外-可见分光光度计,测定了“TG-9”T_0代阳性转基因稻米中总黄酮的含量。与对照植株的总黄酮含量相比,有26株的转基因植株的总黄酮含量有明显的提高,其中总黄酮含量最高提高83.3%,最低提高7.05%,均达到了极显著水平。


以上为本篇毕业论文范文苯丙氨酸解氨酶基因遗传转化水稻的研究的介绍部分。
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