银杏提取物对ACS患者外周血单个核细胞CD40/CD40L炎症信号传导的影响

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银杏提取物对ACS患者外周血单个核细胞CD40/CD40L炎症信号传导的影响

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毕业论文范文题目：银杏提取物对ACS患者外周血单个核细胞CD40/CD40L炎症信号传导的影响，论文范文关键词：银杏提取物对ACS患者外周血单个核细胞CD40/CD40L炎症信号传导的影响
银杏提取物对ACS患者外周血单个核细胞CD40/CD40L炎症信号传导的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：第一部分银杏提取物对ACS患者外周血单个核细胞CD40/CD40L表达和IL-12生成的影响急性冠脉综合症(ACS)是导致人群高死亡率的重要心血管疾病。动脉粥样硬化斑块破裂、出血、局部血栓形成导致管腔完全或不完全闭塞是急性冠脉综合征(ACS)的主要病理生理机制,在不稳定斑块发生、发展的全过程中,炎症反应贯穿其始终,决定着斑块的自然进程。近年研究发现,白细胞分化抗原40(CD40)及其配体(CD40L)介导的信号通路参与了动脉粥样硬化斑块内炎症反应并起着重要的调节作用。银杏是一种古老的植物药,主要药理成分为黄酮甙类和萜类内酯。长期以来,银杏在心血管疾病治疗领域得到广泛的应用,已有研究证实,银杏可有效的清除活性氧自由基(ROS),提高冠脉血流,抑制血小板聚集；银杏提取物还有明显的抗炎作用,能有效抑制内毒素诱导的炎症反应；抑制炎性因子的生成。我们这部分的研究旨在探讨银杏提取物对CD40/CD40L介导的炎性信号传导通路的影响,进一步揭示银杏在心血管疾病治疗中的抗炎特性。目的：研究银杏提取物对ACS患者外周血单个核细胞(PMBCs)CD40-CD40L表达及白介素12(IL-12)生成的影响。方法：清晨空腹抽取23例ACS患者及9例正常对照外周全血,常规方法分离纯化PMBCs,收集细胞后配成5x106/ml的细胞悬液,尔后与不同浓度的银杏提取物(12.5mg/L,25mg/L,50mg/L、1OOmg/L)体外共同孵育24小时,以银杏提（文章此处忽略..）取物0mg/L作为空白对照；用抗CD40/CD40L的荧光抗体标记PMBCs后以流式细胞仪检测细胞表面的CD40/CD40L表达率；ELISA方法检测细胞上清液中IL-12的含量。结果：1.未用银杏提取物处理时,ACS组PMBCs表面CD40、CD40L的表达分别是17.17±9.58%和3.58±2.16%,对照组为11.8±9.17%和1.28±0.7%,两组间有显著性差异(p)0.05)；2.ACS组PMBCs经不同浓度银杏提取物作用后其表面CD40.CD40L的表达分别为13.18±5.56%和2.64±1.48%(12.5mg/L)、11.37±4.44%和1.94±1.63%(25mg/L)、11.16±5.08%和1.85±1.61%(50mg/L)、7.57±4.47%和1.34±1.06%(100mg/L),除浓度为12.5mg/L时和空白对照(17.17±9.58%和3.58±2.16%)相比无统计学差异(p0.05)外,其余各浓度组与空白对照间均有显著性差异(p0.05)：3.正常对照组PMBCs经不同浓度银杏提取物作用后其表面CD40和CD40L的表达分别为11.66±8.71%和1.17±0.69%(12.5mg/L)、10.52±5.11%和0.86±0.78%(25mg/L)、8.40±5.11%和0.83±0.67%(50mg/L)、7.53±4.33%和0.72±0.61%(100mg/L),与空白对照(11.8±9.17%和1.28±0.7%)相比,均无统计学差异(p0.05);4.ACS组PMBCs经不同浓度银杏提取物作用后其细胞上清液IL-12的含量分别是168.83±100.51pg/ml(12.5mg/L).116.87±110.48pg/ml(25mg/L).102.41±97.01pg/ml(50mg/L).76.17±47.68pg/ml(1OOmg/L),与空白对照(292.27±77.83pg/ml)相比,均有显著性差异(p0.05)结论：在体外培养条件下,银杏提取物可抑制ACS患者PMBCs表面CD40/CD40L的表达,同时（本文此处忽略..）也抑制PMBCsIL-12的分泌,具有一定的抗炎作用。第二部分银杏提取物对单个核细胞蛋白酶体功能的影响蛋白酶体作为泛素-蛋白酶体系统的一部分,是细胞内的一个重要的结构,广泛存在于真核细胞。它的主要作用是选择性降解细胞内的损伤蛋白以及参与合成细胞的重要蛋白分子,保证细胞内损伤蛋白的及时清除以及细胞内重要生理过程的正常进行,从而可以调控细胞的凋亡,细胞周期,修复DNA,细胞的内吞和炎症反应过程等最近有研究发现,蛋白酶体抑制剂硼替佐米和乳胞素可以抑制DC细胞成熟过程中表面分子CD40的表达以及促炎症因子白介素12(IL-12)的分泌,且与蛋白酶体糜蛋白酶水解活性有关。我们前期的研究工作揭示,银杏提取物能抑制ACS患者PBMCs表面CD40/CD40L的表达并减少PBMCsIL-12的分泌；那么,改变PBMCs蛋白酶体活性是否是银杏提取物这一药理作用的部分机制,目前尚无相关的文献报道。为此,我们做了如下工作。目的研究银杏提取物对ACS患者外周血单个核细胞蛋白酶体活性的影响。方法常规方法分离纯化人PMBCs,收集细胞后配成5×106/ml的细胞悬液,用裂解液分离出粗提的蛋白酶体并配成2ug/ul的蛋白样本,尔后与含不同浓度银杏提取物的反应液(6.25mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L,200mg/L)混合,以银杏提取物0mg/L作为空白对照；加入各荧光反应底物(Suc-LLVT-AM（略..）C或ZVVA-AMC或ZLLG-βNA),荧光酶标仪检测30分钟,记录荧光强度,各组荧光强度以对照组的比例(%)来表示。结果1与空白对照组相比,各浓度组银杏提取物对人肝脏纯化的20S蛋白酶体的三个活性位点的反应程度均有不同程度的抑制.2.各浓度银杏提取物对粗提的PMBCs蛋白酶体ChT-L活性位点的反应程度分别为97.15±11.64%(6.25mg/L).84.42±10.49%(25mg/L).66.38±12.33%(50mg/L).55.05±10.86%(100mg/L),29.39±15.73%(200mg/L),IC50为127.13mg/L;与空白对照组相比,6.25mg/L和25mg/L浓度组没有明显差异(p0.05),其他各浓度组均有显著性差异(p0.01)；3.各浓度银杏提取物对粗提的PMBCs蛋白酶体T-L活性位点的反应程度分别为80.41±17.54%(6.25mg/L).57.44±9.24%(25mg/L).39.17±8.04%(50mg/L).31.87±5.85%(100mg/L),15.93±1.25%(200mg/L),IC50为75.06mg/L。与空白对照组相比,除6.25mg/L浓度组没有明显差异(p0.05)外,其他各浓度组均有显著性差异(p0.01);4,银杏提取物对粗提的PMBCs蛋白酶体的PGPH-L活性位点没有反应.结论在离体条件下,一定浓度的银杏提取物可以抑制人肝脏纯化的20S蛋白酶体及粗提的外周血单个核细胞蛋白酶体的活性位点的反应,这可能是银杏提取物抑制ACS患者CD40/CD40L炎性信号传导的部分生物分子机制。

以上为本篇毕业论文范文银杏提取物对ACS患者外周血单个核细胞CD40/CD40L炎症信号传导的影响的介绍部分。

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