日本七鳃鳗唾液腺分泌蛋白的组分分析与鉴定

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日本七鳃鳗唾液腺分泌蛋白的组分分析与鉴定

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毕业论文范文题目：日本七鳃鳗唾液腺分泌蛋白的组分分析与鉴定，论文范文关键词：日本七鳃鳗唾液腺分泌蛋白的组分分析与鉴定
日本七鳃鳗唾液腺分泌蛋白的组分分析与鉴定毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：在大陆生物中,七鳃鳗(lampetrajaponica)是迄今所晓得的最原始的无颌类脊椎动物,不仅是研究脊椎动物来源与进化的关键物种,同时也是研究脊椎动物发育与分化的最佳模式动物之一。此外,日本七鳃鳗唾液腺分泌的多种活性物质赋予其极为特别的寄生生活习惯。以成功构建的日本七鳃鳗唾液腺cDNA文库为基本发展的前期研究中,已证明日本七鳃鳗唾液腺的分泌物质中存在抗凝、抗炎、抗肿瘤以及抗氧化等多种活性分子。然而,对分泌物中含有的其余蛋白成分及其机制尚不明白。本研究对日本七鳃鳗的唾液腺分泌蛋白的组分进行分析与鉴定,旨在发明跟研究与其特别的寄生生活方法相合适的特有功能蛋白质。利用生物信息学跟分子生物学等手段从蛋白跟基因两种程度对日本七鳃鳗唾液腺分泌蛋白的组分进行鉴定分析,获得了分泌物中低含量蛋白的组（文章此处忽略..）成信息,并抉择新活性氧调节基因、血清白蛋白跟细胞逝世亡调节因子样蛋白进行克隆、进化、表白跟活性分析。这有利于揭示日本七鳃鳗唾液腺分泌的功能基因在同系家族中的来源与进化,并为日本七鳃鳗特别的寄生生活习惯提供更多的实际基本。本研究利用SDS-PAGE电泳技巧进行日本七鳃鳗唾液腺分泌低含量蛋白的分别,以基质帮助激光解析电离化/飞翔时光(MALDI-TOF-MS)质谱测序手段进行低含量蛋白的质谱测序,将成果在Mascot数据库进行串联质谱检索(MS/MSIonSearch),从而鉴定日本七鳃鳗唾液腺分泌低含量蛋白的蛋白组成。抉择的六条胶带经质谱测序分辨获得了312、129、137、283、299跟248个蛋白质肽段,其中重要的匹配记录分辨为20、9、7、9、20跟10项;与唾液腺cDNA文库比较后发明匹配上的跟未匹配上的肽段总数量皆为19个;最后将未匹配（文章此处忽略..）的蛋白从新查问,终极获得了细胞骨架蛋白、代谢酶类、细胞周期相干蛋白、细胞增殖、分化跟凋亡相干蛋白跟脂质代谢相干蛋白等共计21种有意思蛋白。利用生物信息学手段解析日本七鳃鳗血清白蛋白及类白蛋白基因家族的分子进化与体系发育,获得类白蛋白基因家族成员演变图以及日本七鳃鳗血清白蛋白、鲑鱼血清白蛋白以及斑马鱼维生素D结合蛋白构造域程度上三者之间的进化关联,证明了日本七鳃鳗血清白蛋白在进化上独特而原始的地位。利用基因工程手段,克隆得到的日本七鳃鳗新活性氧调节功能基因Lj-Romo1开放浏览框长243bp,编码80个氨基酸,分子量大概8.9KDa;存在信号肽,且可作为跨膜蛋白定位于线粒体膜上;一级构造、二级构造猜测以及三维破体构造模仿成果均表明了Lj-Romo1基因与其余物种的高度同源性;进化程度的分析则验证了Lj-（此处忽略..）Romo1的原始进化地位;以semi-PCR技巧检测Lj-Romo1在日本七鳃鳗各组织中的表白情况,发明Lj-Romo1在日本七鳃鳗各组织中广泛表白,其中红细胞中绝对表白量最高,且模仿病原菌刺激后各组织中Lj-Romo1表白量明显上调,证明Lj-Romo1参加红细胞的氧化还原信号通路;原核表白不获得Lj-Romo1的重组蛋白,揭示其序列中可能含有罕见密码子;进一步进行真核转染,发明Lj-Romo1基因的亚细胞定位于线粒体上,初步证明了Lj-Romo1参加机体线粒体内的有氧呼吸过程。利用生物信息学手段研究日本七鳃鳗细胞逝世亡因子Grimin基因序列的基本性质,证明其为存在疏水性的单层跨膜蛋白,不含信号肽跟糖基磷脂酰肌醇锚定位点,存在氧化还原酶活性,在细胞内可作为转录子参加能量代谢;二级构造跟高等构造（略..）都显示Lj-Grimin存在细胞凋亡因子GRIM19基因家族的标记性特点,并且在进化上高度保守;实时荧光定量PCR法检测到Lj-Grimin广泛分布于日本七鳃鳗各组织之中,且在心脏跟红细胞中表白量最高。同时,病原菌刺激后在心脏中表白量明显上调,提示Lj-Grimin在日本七鳃鳗的生活史中起关键作用,并参加病原菌引发的的免疫防备反应。日本七鳃鳗唾液腺分泌蛋白的组分分析与鉴定,从蛋白跟基因两个程度上完美了日本七鳃鳗唾液腺分泌蛋白的组成信息,有助于咱们深刻懂得日本七鳃鳗特别的生活习惯及其特别的进化地位,并为深刻研究日本七鳃鳗唾液腺分泌的功能基因跟蛋白质组学提供了实际基本。

以上为本篇毕业论文范文日本七鳃鳗唾液腺分泌蛋白的组分分析与鉴定的介绍部分。

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