单环刺螠（Urechis unicinctus）vasa基因及β-actin基因的克隆与

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单环刺螠（Urechis unicinctus）vasa基因及β-actin基因的克隆与

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单环刺螠（Urechis unicinctus）vasa基因及β-actin基因的克隆与毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：vasa基因编码DEAD-box家族成员中一种ATP依赖的RNA解旋酶,在果蝇中作为生殖质的组成成份被首次报道。vasa基因可在许多后生动物生殖系细胞中特异性的表达,因此被广泛用作生殖细胞的分子标记物,在动物生殖细胞发生和生殖调控等研究中起到了重要的作用。单环刺螠(Urechisunicinctus)属螠虫动物门(Echiuroidea),是我国黄渤海沿岸常见的刺螠物（此处忽略..）种。本文采用同源克隆策略及SMART-RACE技术,筛选和克隆了单环刺螠vasa基因的全长cDNA序列,并利用半定量RT-PCR技术对其组织分布及发育过程的表达变化进行了分析,以期为进一步研究单环刺螠原生殖细胞的起源、分化及其生殖调控奠定基础。本研究获得的单环刺螠vasa基因的cDNA序列全长4080bp,其中开放阅读框ORF长2322bp,可以编码773个氨基酸的蛋白,5′UTR(U（文章此处忽略..）ntranslatedReagion,非编码区)为322bp,3′UTR为1436bp。Blastp分析表明由该cDNA推导的氨基酸序列与哺乳动物、鱼、两栖类、昆虫以及一些无脊椎动物的VASA蛋白序列均具有较高的相似性;除具有DEAD-box家族蛋白共有的全部8个保守motif之外,在其N端还具有RGG重复序列及甘氨酸富集区等vasa亚家族基因的专一性特征结构;进一步的系统进化分（此处忽略..）析结果也显示由该cDNA推导的蛋白序列和其他物种的VASA相关蛋白聚成一支,其与VASA亚家族成员的进化关系明显近于PL10或是P68等其他DEAD-box亚家族蛋白,表明获得的为单环刺螠的vasa基因的全长cDNA序列,并将其编码的蛋白命名为UuVASA。采用半定量RT-PCR技术研究了单环刺螠vasamRNA在不同组织中的分布,发现在两性生殖细胞中vasa基因均存（本文此处忽略..）在较高水平的表达,但在其他组织(非生殖期成体的体壁、中肠、呼吸肠、肾管及体腔液细胞)中则几乎检测不到其表达信号,表明在单环刺螠体内,vasa基因同样仅限制在生殖系细胞中表达,因此可以作为一个分子标记来追踪单环刺螠PGCs的起源、迁移和分化;对其各个发育阶段表达的RT-PCR结果显示,在卵母

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