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菟丝子黄酮在生精上皮组织培养中抗凋亡作用的研究

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毕业论文范文题目:菟丝子黄酮在生精上皮组织培养中抗凋亡作用的研究,论文范文关键词:菟丝子黄酮在生精上皮组织培养中抗凋亡作用的研究
菟丝子黄酮在生精上皮组织培养中抗凋亡作用的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:背景:男性精子数量和质量近半个世纪以来有明显下降趋势,其中很大一部分原因已被证实与环境污染加剧有关,随着环境污染问题的研究深入,越来越多的因素被证实是通过诱导生精细胞凋亡来发挥其生殖毒性。阻止、延缓或减弱污染对人类生育能力的损害,促进生精细胞凋亡后正常生精过程的恢复已经成为急需研究解决的重大课题。生精细胞的凋亡途径的研究已从死亡受体途径转移至线粒体功能的研究上。生精细胞凋亡的研究伴随着细胞凋亡机制研究的突破而不断随着自由基医学研究的发展,凋亡的线粒体途径成为研究的新热点。线粒体是细胞凋亡调控中心。氧作为呼吸链的终端电子受体参与氧自由基的形成,最终形成活性氧(ROS)造成线粒体(略..)膜通透性增高,跨膜电压下降,呼吸功能下降从而启动凋亡。衰老与线粒体呼吸链功能低下有关。鉴于菟丝子黄酮促进生殖功能同时伴随有抗机体衰老的作用,提示菟丝子黄酮可能是由于清除ROS,保护线粒体功能起到抗凋亡的作用。考虑到中药的传统在体研究手段中,药物作用复杂,量效关系不明确,本实验室参考国际先进方法,采用生精上皮组织离体培养,检测菟丝子黄酮的体外抑制生精细胞凋亡作用,为其促生殖、抗衰老的作用提供新的理论依据。助头大华医笋院硕士华世绘丈目的:1)建立生精上皮体外培养系统;2)通过病理学以及分子生物学手段,研究冤丝子黄酮抑制生精细胞凋亡作用;3)探索冤丝子黄酮抗氧化作用与其保护线粒体功能和抑制(本文此处忽略..)凋亡的能力之间的关系。从功能调控网络的角度全面认识冤丝子黄酮抑制生精细胞凋亡、促进生殖和延缓衰老的作用。夺材料与方法:雄性SPrague一Dawley(SD)大鼠,雄性BALB/c小鼠,饲养于标准动物实验房(22℃),给予规律光照(12h:12h),自由饮食,大鼠进行翠丸曲细精管培养,小鼠进行攀丸植块培养。实验分组为高剂量冤丝子黄酮组、低剂量冤丝子黄酮组、对照组、药物溶剂对照组。每组按培养时间分为24、48、72h3个亚组(n=12)。分别于培养结束时间点制备标本,HE染色观察培养各组组织学变化;采用原位末端标记法(TdT一mediatoddUDP一Xniekendlabeling,TUNEL)、流式细胞分选(Fluore(略..)seenee一Aetivatedeellsorting,FACS)、AO/EB二重染色、基因组DNA断裂(DNAladder)分析检测各组培养生精上皮组织凋亡情况;通过检测丙二醛(MDA)含量、活性氧(ROS)含量、总抗氧化能力(T一AOC)以及超氧化物歧化酶(SOD)活力测定,综合分析冤丝子黄酮的抗氧化能力;使用线粒体探针罗丹明123(Rhodamine123)观察培养各组线粒体功能的变化;运用MTS检测、增殖细胞核抗原(PCNA)分析各组细胞的增殖分化情况。结果:凋亡检测:未加药组凋亡细胞数目显著高于加药组(P钓.01)。高肋义丈笋爵学雳硕毖学夕落丈剂量组凋亡细胞数目低于低剂量组(P0.01)抗氧化能力:加药组抗氧化能力显著高(本文此处忽略..)于未加药组(P0.05)PCNA的表达:加药组PCNA指数(PI)显著高于未加药组(P0.01)MTS分析:加药组细胞活力远大于未加药组(P0.01)结论:l)生精上皮组织培养于无血清培养基中,导致组织抗氧化能力减弱,线粒体跨膜电压一「降,膜通道开放可能是导致生精细胞凋亡的机制之一。2)冤丝子黄酮是一种有效的抗氧化剂,具有抗凋亡、抗氧化、保护生精细胞线粒体功能的作用。3)冤丝子黄酮能够提高离体培养生精上皮组织的细胞活力,促进生精细胞增殖。


以上为本篇毕业论文范文菟丝子黄酮在生精上皮组织培养中抗凋亡作用的研究的介绍部分。
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