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神经成长因子(NGF)对胎兔雪旺细胞培养的影响

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毕业论文范文题目:神经成长因子(NGF)对胎兔雪旺细胞培养的影响,论文范文关键词:神经成长因子(NGF)对胎兔雪旺细胞培养的影响
神经成长因子(NGF)对胎兔雪旺细胞培养的影响毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标:雪旺细胞是四周神经体系特有的重要胶质细胞,在神经伤害修复中雪旺细胞起重要作用。目前神经伤害后功能的恢复均不幻想,神经组织工程将会给咱们带来美好的前景;因为雪旺细胞是四周神经组织工程的核心,通过体外扩增来获得大量的雪旺细胞是四周神经组织工程的基本请求,因此如何尽快获得足够数量雪旺细胞以供移植,是组织工程技巧中急待解决的关键问题。咱们研究NGF促进胎兔雪旺细胞的成长繁殖决裂,有很重要的实际意思。此外,因为胎儿组织尚未存在明显的生物学特点,免疫体系处于不成熟状况,对寄生环境有较强的依附性,因此排斥反应产生不明显,轻易导致“免疫宽容”,避免移植后产生免疫排斥反应;然而28天胎兔四周神经体系已经发育成熟,进行雪旺(略..)细胞培养是可行的。方法:实验前筹备,包含培养用液的配制、鼠尾胶的制造、培养皿的筹备。取怀孕28天的新西兰白兔,从耳静脉注入20ml空气,处死后敏捷剖腹取出胎兔,胎兔经酒精浸泡处理,生理盐水冲去酒精,在手术显微镜下无菌取胎兔坐骨神经,尽量剥除神经外膜,将神经段剪成约0.1mm3组织块,用植块法培养原代雪旺细胞,第14天细胞消化传代,结合用差速贴壁法进行细胞纯化,将纯化后的细胞分成2组,再次接种培养,一组为NGF组,另一组为对比组。传代培养24小时后,每日在倒置相差显微镜下察看细胞状况,并进WP=4行雪旺细胞计数。以增殖指数为指标,进行统计分析。成果:胎兔神经植块在第6天见细胞从组织块四周爬出,有两种细胞,一种为细胞状况梭形,有崛起,多(文章此处忽略..)为双极,偶尔可见3个苗条崛起,胞核明显,呈卵形。胞体四周有光晕,即成长晕。偶尔可见另一种细胞,胞体大,呈扁平状,外形不规矩,崛起短而多,细胞核较浅,核仁明显,有2~3个核仁。跟着时光推移,细胞向植块外延展,密度逐步增加,终极与其余部位组织块四周爬出的细胞联成片。在成长茂盛的区域,细胞排列较为整洁。14天植块四周细胞长势最好。在神经外膜剥离得非常干净的情况下,雪旺细胞纯度很高,基本上为雪旺细胞,偶尔可见成纤维细胞。传代接种24小时后,在相差显微镜下进行状况学察看,实验组与对比组均有较多细胞贴壁,少量细胞悬浮逝世亡。细胞呈卵形,双极,少数细胞呈三角形。48-72小时后,细胞呈现聚合景象,呈端对端、肩并肩、栅栏状排列,细胞核呈卵圆形(此处忽略..),根据雪旺细胞特有的特点性状况以及细胞免疫组化染色证明为雪旺细胞。细胞记数:20个培养皿随机选取60个视线进行雪旺细胞记数,以增殖指数(各次细胞计数/首次细胞计数比值)的均数±标准差进行两组比较。两组均数比较的t测验成果:第3天t值12.62,P值0.001;第4天t值10.29,P值0.001;第5天t值11.55,P值0.001;第6天t值24.88,P值0.001;第7天t值36.54,P值0.001。NGF组雪旺细胞的决裂增殖速度明显加快,统计学分析有明显的差别性。论断:四周神经伤害后,经过目前的各种方法医治,肢体功能的恢复均不幻想,神经组织工程将会解决这个问题。雪旺细胞经过多次传代培养当前状况跟功能逐步改变,不再WP=5合适组织工程的请求,解决问题的基本方法是培养长生化雪旺细胞系,使其决裂、增(本文此处忽略..)殖获得大量的细胞;Gansmmller跟PendenKW的研究已获得初步成果,培养出长生化雪旺细胞系。咱们采取植块法加差速贴壁联合法培养雪旺细胞,用NGF促进雪旺细胞成长决裂,获得大量的雪旺细胞,可能满意组织工程对雪旺细胞的须要,也可能避免雪旺细胞经过多次传代培养当前状况跟功能改变。神经成长因子(nervegrowthfactorNGF)能明显地促进雪旺细胞的增殖,在短时光内获得大量的雪旺细胞,满意组织工程的须要,从而可能促进四周神经伤害的修复。


以上为本篇毕业论文范文神经成长因子(NGF)对胎兔雪旺细胞培养的影响的介绍部分。
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