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猪PNLIPRP2基因的克隆、原核表白、启动子调控及其与出产性状的关

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毕业论文范文题目:猪PNLIPRP2基因的克隆、原核表白、启动子调控及其与出产性状的关,论文范文关键词:猪PNLIPRP2基因的克隆、原核表白、启动子调控及其与出产性状的关
猪PNLIPRP2基因的克隆、原核表白、启动子调控及其与出产性状的关毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:脂肪酶基因家族在脂类代谢跟运输中起重要作用,跟一些重大的疾病如肥胖,糖尿病跟脂肪沉滞性动脉硬化症等相干联。胰脂肪酶相干蛋白2基因(pancreaticlipase-relatedprotein2,PNLIPRP2)属于脂肪酶基因家族。在人上的研究表明,PNLIPRP2参加肠内的脂解作用。同时在鼠上也发明PNLIPRP2对乳鼠日粮中的脂肪消化起重要作用。当日粮脂肪含量达到4%时,TH鼠(一种研究Ⅱ型糖尿病的模型动物)抉择性地下调PNLIPRP2的表白量,导致脂肪沉积,体内的血糖增高。本研究将其做为影响猪脂肪沉积的(文章此处忽略..)一个候选基因,对其进行了克隆、表白谱、原核表白、启动子调控、多态性检测及其与出产性状的关联分析等研究。本研究为进一步探讨该基因对影响猪脂肪沉积的作用打下了基本,并为其将来利用于分子标记帮助抉择育种奠定了分子遗传基本。重要研究成果如下:1.以人PNLIPRP2基因cDNA为探针,在NCBI的EST数据库中比对得到猪EST序列并进行拼接。根据拼接序列设计引物克隆出猪PNLIPRP2基因cDNA编码区全长序列。通过外显子设计引物扩增出了猪1、3、4内含子序列,内含子剪接位点序列合乎GT-AG法令,同时通过(本文此处忽略..)生物信息学及比较基因组学的策略鉴定了该基因的其它内含子序列。将该基因的cDNA序列跟DNA全长提交到GenBank,获得基因收录号EU715062跟EU715063。利用CLUSTALW、TMprep、SignalP3.0、ProtParam等软件对所编码蛋白质的构造、功能等特点进行了猜测跟分析,并构建了体系进化树。2.半定量组织表白谱的研究发明,PNLIPRP2在二月龄大白猪小肠中表白量较高,在脑、脂肪中表白量较低,在骨髓、胃中表白量更低,在其它组织中多少乎不表白。PNLIPRP2在四月龄大白猪小肠中表白量也很高,卵巢(此处忽略..)中的表白量次之,在其它组织中的表白量很低。3.在第3内含子93bp处发明了大白T/梅山C的碱基渐变,并树破了PCR-Eco130Ⅰ-RFLP的检测方法。分析了在不同猪群中这个渐变位点的多态性,打算了这个位点的基因型跟基因频率,并发明各基因型在不同品种中的分布存在必定差别。对“大白×梅山”资源家系F_2代223头个体的基因型与胴体性状跟肉质性状进行关联分析,显示该渐变位点与6-7腰椎间背膘厚、失水率、系水力跟背最长肌色值有明显的相干(P<0.05)。4.构建了猪PNLIPRP2蛋白保守构造域的重组原核表白载体PGEX-KG-PL(此处忽略..)AT_PL,利用SDS-PAGE检测出该重组原核表白载体成功表白出了猪PLAT_PL蛋白。5.通过基因组PCR步移法从猪的基因组中扩增出了PNLIPRP2基因翻译起始位点上游3.7Kb的序列,并且应用NNPP、MethPrimer、TRANSFAC等生物信息学软件对猪PNLIPRP2基因的核心启动子、转录起始位点、CpG岛的分布以及与启动子相结合的转录因子进行了猜测跟分析。


以上为本篇毕业论文范文猪PNLIPRP2基因的克隆、原核表白、启动子调控及其与出产性状的关的介绍部分。
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