沉默p53基因表白的牢固Vero细胞系的树破及初步利用

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沉默p53基因表白的牢固Vero细胞系的树破及初步利用

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毕业论文范文题目：沉默p53基因表白的牢固Vero细胞系的树破及初步利用，论文范文关键词：沉默p53基因表白的牢固Vero细胞系的树破及初步利用
沉默p53基因表白的牢固Vero细胞系的树破及初步利用毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：p53基因广泛存在于各种动物细胞中,在进化程度不同种属的动物中,p53基因存在异样类似的基因构造。而由p53基因所编码的p53蛋白分子被称之为肿瘤克制蛋白,存在参加细胞周期调控、引诱细胞凋亡、参加细胞分化与衰老、抗病毒等多种生物学功能。当细胞受到各种外来应激如射线辐射、缺氧、病原微生物感染时,细胞核内的p53蛋白分子就会被激活,继而激活下游基因的表白,从而产生一系列生物学效应,目标都是为保护细胞基因组免受外来伤害,因此它又被尊称为“基因组的守护着”。p53的生物学功能如此重要,因此（本文此处忽略..）倍受细胞生物学家跟医学家的高度关注,为此进行了大量的研究。为研究p53及其介导的信号转导通路在动物病毒感染过程中的作用,本实验首先根据前期实验筛选的一条有效烦扰p53基因的小RNA烦扰片段,构建针对p53基因的RNA烦扰慢病毒载体,将构建好的慢病毒载体与病毒包装帮助质粒共转染293T细胞进行慢病毒的包装,最后在293T细胞中测定病毒滴度。将前期包装好的慢病毒感染Vero细胞,嘌呤霉素筛选阳性细胞株,采取部分消化法获得单细胞克隆以筛选阳性细胞系,利用RT-PCR跟Westernblo（本文此处忽略..）t检测p53的表白程度,利用虫荧光素酶报告体系,分析p53的转录激活功能。成果发明:慢病毒介导的shRNA有效地沉默了p53基因表白;与对比组细胞比拟,烦扰组细胞的p53的转录激活功能明显降落。因此成功获得了牢固沉默p53基因表白的Vero细胞系。以树破的牢固沉默p53基因表白的Vero细胞系为模型,将疱疹病毒家族典范代表伪狂犬病病毒(PRV)感染该细胞系,在病毒感染的不同时光点分辨收集病毒样品跟全细胞蛋白样品,采取TCID50方法测不同时光点的病毒滴度,绘制病毒的多步成长曲线;采取半定量（略..）RT-PCR方法测定唆使病毒复制的基因的转录程度的变更;采取Westernblot方法测定唆使病毒复制的基因的翻译程度的变更;分辨比较这三项指标在p53-knockdownVero细胞跟阴性对比组细胞中的差别变更。成果发明:PRV在p53-knockdownVero细胞中的复制情况与阴性对比组细胞比拟,病毒滴度有所降落,唆使病毒复制的基因的mRNA表白程度跟蛋白表白程度也有所降落,尤其在病毒感染晚期,这种变更趋势尤为明显。因此可能初步阐明:p53可能在PRV感染宿主细胞（本文此处忽略..）的晚期有助于病毒的复制,这为研究PRV与p53介导的信号转导通路之间的关联提供实际根据。总之,本研究首次采取慢病毒载体介导的RNA烦扰技巧树破了沉默p53基因表白的牢固Vero细胞系,并且初步利用于动物病毒复制机制中的研究,该细胞系将为研究p53的生物学功能提供有利的工具,阐明p53在某些动物病毒感染过程中的潜在作用机制,从而为研究新型抗动物病毒药物提供实际根据。

以上为本篇毕业论文范文沉默p53基因表白的牢固Vero细胞系的树破及初步利用的介绍部分。

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