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幽门螺旋杆菌抗原跟CTB融合基因在烟草、番茄中的遗传转化

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毕业论文范文题目:幽门螺旋杆菌抗原跟CTB融合基因在烟草、番茄中的遗传转化,论文范文关键词:幽门螺旋杆菌抗原跟CTB融合基因在烟草、番茄中的遗传转化
幽门螺旋杆菌抗原跟CTB融合基因在烟草、番茄中的遗传转化毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori,Hp)感染是慢性胃炎跟消化性溃疡的重要病因,与胃癌跟胃粘膜相干淋巴组织(MALT)淋巴瘤的产生也密切相干。目前多种药物结合医治铲除Hp存在疗效欠幻想、副反应高跟Hp耐药菌株始终增加等问题,疫苗有望为防治Hp感染提供一种新的道路。细胞毒素相干蛋白(Cytotoxin—associatedproteinA,CagA)是Hp的重要毒力因子。常与Hp空泡毒素(VacA)伴随存在,存在强免疫原性跟免疫保护性,是Hp疫苗的首选抗原之一。Hp尿(此处忽略..)素酶(Urease)作为Hp的定植因子跟毒力因子,表白量高,序列高度保守,其中以B亚单位(UreB)抗原性跟保护作用最强,是Hp免疫防治的重要候选疫苗之一。霍乱毒素B亚单位(CTB)是霍乱毒素的非毒性部分,有很强的免疫原性,作为免疫佐剂能加强抗原蛋白的免疫效力跟免疫特异性。用动物作为生物反应器来出产重要的、有经济价值的药用蛋白是“分子农业”发展的新趋势。多方面的报道证明动物可能高程度表白存在功能的重组蛋白质。烟草是基因工程中最为广泛利用的模式动物之一,成长速度快,成长周期短,农(略..)杆菌介导的遗传转化体系完美,因此广泛利用于动物疫苗的基本研究跟前期研究。番茄养分丰富,果实可直接生食,是研制动物口服疫苗的幻想载体。本研究分辨构建了含融合基因CTB—cagA_(3.1)、CTB-Linker-ureB跟CTB-Linker-cagA_(1.8)的动物表白载体,采取农杆菌介导的叶盘转化法,将融合基因转入烟草跟番茄中,以期获得同时表白HpCagA蛋白或UreB蛋白跟粘膜佐剂CTB的转基因植株,为研制防治人类Hp感染的有效跟保险的功能性食品奠定基本。同时优化番茄的转化体(本文此处忽略..)系,为树破以烟草跟番茄作为生物反应器来表白微生物抗原奠定了技巧平台。通过两年多的实验,获得了以下成果:(1)构建能在烟草跟番茄基因组中高效表白的含外源融合基因的动物表白载体p13-CC_1N、p23—35SCLUN、p23-35SCLCN跟p121-CLUN,由CaMV35S启动子启动,PCR分析、酶切鉴定及DNA序列测定验证成果正确后将质粒导入农杆菌EHA105或GV3101中。(2)构建原核表白载体pET28a-CLU,转入大肠杆菌BL-2l(DE3)中,ITPG引诱表白,以检测融合蛋白的原核表白情况;(3)利用农杆菌介导的遗传转化体系(此处忽略..)将融合基因导入烟草跟番茄基因组中,经过抗性筛选、分化跟生根培养获得了转基因烟草跟番茄植株。转化后烟草叶片抗性芽分化率可高达100%,优化前提后番茄抗性芽分化率达40%~60%。(4)PCR验证目标基因已整合到烟草跟番茄基因组中,PCR阳性率为80%~93.7%。Western-blot检测目标蛋白在转基因植株的含量及表白情况,此实验仍在进行中。


以上为本篇毕业论文范文幽门螺旋杆菌抗原跟CTB融合基因在烟草、番茄中的遗传转化的介绍部分。
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