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姜黄素对大鼠破骨细胞形成的抑制作用

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毕业论文范文题目：姜黄素对大鼠破骨细胞形成的抑制作用，论文范文关键词：姜黄素对大鼠破骨细胞形成的抑制作用
姜黄素对大鼠破骨细胞形成的抑制作用毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:骨是一种不断更新的组织,骨重建贯穿生命过程的始终。生理条件下,骨吸收与骨再生之间保持平衡状态。如果这种平衡被打破就会发生骨硬化症、骨质疏松症以及局灶性骨溶解等疾病。破骨细胞(osteoclast,OC)是肌体中最主要的骨吸收的效应细胞;多种炎性及非炎性的骨与关节的病变都与OC代谢异常有关。姜黄素(curcumin)是从姜黄中提取的有效成分,主要包括了姜黄素、去甲氧基姜黄素、去二甲氧基姜黄素3种活性成分。具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、清除自由基、抗微生物以及对心血管系统、消化系统等多方面药理作用。但姜黄素对破骨细胞的药理作用尚不清楚。本研究旨在探讨姜黄素对破骨细胞及破骨前驱细胞形成的抑制作用,为临床上治疗骨代谢性疾病提供新的药物方法:1全骨髓细胞系的培养:将一只4周龄SD雄性大鼠无菌状态下取其股骨及胫骨,去净骨表面的软组织,剪断长骨两骨垢端,暴露骨髓腔。用10ml注射器抽取a-MEM培养（略..）液10ml,自骨髓腔冲出细胞,至骨发白。吹打均匀后离心(2000转/分),5分钟。加15%胎牛血清a-MEM培养液40ml,吹打混匀成细胞悬液,计算细胞数,配制成2×10~6/ml细胞悬液,加入1,25(OH)2D(3终浓度为10~(-8)mol/l)和sRANKL(终浓度为20μg/ml)。将细胞悬液注入24孔培养板(0.5ml/孔),在24孔培养板中添加入不同浓度的姜黄素,分别为0,2.5,5,10,20,50ug/ml。每个浓度设4孔(n=4)。第一组为对照组。然后放入5%CO237℃孵育箱中培养。第4天更换一次培养液,去掉3/5体积的旧培养液,换以同体积的含1,25(OH)2D3和sRANKL新培养液。培养至第7天时行TRAP染色,经倒置相差显微镜下计算TRAP染色阳性细胞数。2破骨前驱细胞的培养全骨髓细胞提取后,用SephadexG10过滤除去骨髓间质细胞,搜集非附着性骨髓细胞,配制成2×106/ml细胞悬液,加入1,25(OH)2D3(终浓度为10-8mol/l)和sRANKL(终浓度为20μg/ml)。将细胞悬液注入24孔培养板(0.5ml/孔),在24孔培养板（略..）中添加入不同浓度的姜黄素,分别为0,2.5,5,10,20,50ug/ml。每个浓度设4孔(n=4)。第一组为对照组。然后放入5%CO237℃孵育箱中培养。第4天更换一次培养液,去掉3/5体积的旧培养液,换以同体积的含1,25(OH)2D3和sRANKL新培养液。培养至第7天时行TRAP染色,经倒置相差显微镜下计算TRAP染色阳性细胞数。另外,培养至第7天时对破骨细胞及破骨前驱细胞行TRAP染色,倒置荧光显微镜下观察OC的形态,计算TRAP染色阳性细胞数(3核以上及单核),观察姜黄素对OC及POC的抑制作用。结果:1全骨髓细胞培养TRAP染色阳性细胞的形态学特征:TRAP染色后,可见阳性细胞胞浆呈紫红色,有许多细长的伪足样突起,胞核多,胞浆丰富,胞浆内含许多空泡结构,胞核大、核仁清晰。2破骨前驱细胞培养TRAP染色阳性细胞的形态学特征:TRAP染色阳性细胞特征与全骨髓细胞培养的成熟破骨细胞相似,只是细胞体积较小,多呈单核,偶可见2核者,以类圆（略..）形和不规则多边形为主,有伪足。3全骨髓细胞培养阳性细胞计数结果在2.5,5,10,20μg/ml姜黄素组(实验组),TRAP染色阳性的破骨细胞数分别为142±19.71、77±17.40、76±1.41和64.25±7.54,而50μg/ml姜黄素组细胞全部死亡。对照组TRAP染色阳性的破骨细胞数为125±16.02。浓度为5,10,20μg/ml姜黄素组阳性破骨细胞数与对照组比较明显减少(P0.01),而浓度2.5μg/ml姜黄素组与对照组之间无明显差别(P0.05)。而且随姜黄素浓度(2.5,5,10,20,50μg/ml)升高,破骨细胞检出数随之减少。4破骨前驱细胞培养阳性细胞计数结果在2.5,5,10,20μg/ml姜黄素组(实验组),TRAP染色阳性的破骨细胞数分别为679±138.67、491±75.49、449.25±80.67和321.5±49.82,而50μg/ml姜黄素组细胞全部死亡。对照组TRAP染色阳性的破骨细胞数为704±67.93。浓度为5,10,20μg/ml姜黄素组阳性破骨细胞数与对照组比较明显减少(P0.01),而浓度2.5μg/ml姜黄素组与对照组之间无明显差别(P0.05)而且随姜黄素浓度(2.5,5,10,20,50μg/m（此处忽略..）l)升高,破骨细胞检出数随之减少。结论:1姜黄素对全骨髓细胞系的破骨细胞及破骨前驱细胞的形成,分化具有抑制作用。2其作用机理可能是直接作用于破骨细胞系列细胞,抑制其形成及分化。

以上为本篇毕业论文范文姜黄素对大鼠破骨细胞形成的抑制作用的介绍部分。

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