清开灵注射液不良反应性质及发生机制的初步研究

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清开灵注射液不良反应性质及发生机制的初步研究

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毕业论文范文题目：清开灵注射液不良反应性质及发生机制的初步研究，论文范文关键词：清开灵注射液不良反应性质及发生机制的初步研究
清开灵注射液不良反应性质及发生机制的初步研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：清开灵注射液具有清热解毒、化痰通络、镇静安神和醒脑开窍的功效,在临床上使用广泛。但随着临床应用日益增多,清开灵注射液的不良反应报告也逐渐增加。找出清开灵注射液中致不良反应的主要物质,是清开灵注射液安全使用的关键。目前报道的清开灵注射液不良反应主要表现为用药30min内即可发生药物热、皮肤反应或过敏性休克,同时还可能出现血液系统、消化系统、呼吸系统的不良反应及精神症状,表现为速发型过敏反应。但也有不少患者的不良反应发生于第一次用药时,即无用药史,缺乏对机体的致敏过程,它不具备Ⅰ型过敏反应的发生条件。近年来不少学者把这类不良反应纳入类过敏反应的范畴。类过敏反应是非IgE介导的肥大细胞脱颗粒、释放大量生物活性物质,从而引起系列过敏症状的反应。而引起类过敏反应发生的途径有两条,一是直接刺激肥大细胞、嗜碱粒细胞脱颗粒,二是通过经典途径和旁路途经激活补体,使过敏毒素C3a和C5a增多,刺激肥大细胞和嗜碱粒细胞脱颗粒。因此,确定清开灵注射液在临床引发的不良反应性质及其发生机制是找出致不良反应主要物质的首要条件。本论文从药物毒性反应实验着手,结合体外肥大细胞脱颗粒实验和体外补体激活的测定进行研究,为清开灵注射液不良反应的深入研究奠定基础。目的：1初步判断清开灵注射液在临床上引发的不良反应性质类型,主要区分毒性反应、过敏反应和类过敏反应。2初步研究清开灵注射液在临床上引发的不良反应发生机制,主要判断与补体系统激活的关系。方法：1单次给药毒性实验(1)血常规检测和组织（略..）病理学检查：昆明小鼠随机分为5组,每组10只,分别通过尾静脉注射的方式给予药物,即相当于清开灵注射液人临床最大给药剂量的1、5、10、15倍四个不同剂量的药液和生理盐水。给药前均禁食不禁水12h,给药后正常饲养14d。试验期间观察指标包括动物体重变化、饮食、外观、行为、分泌物、排泄物、死亡情况及中毒反应等。对濒死及死亡动物及时进行解剖,其他动物在观察期结束后抽样采血进行血常规检测(计数红细胞、白细胞、血小板,测定血红蛋白),采用One-WayANOVA方法比较组间各指标是否有差异。同时对动物进行解剖,当发现器官出现体积、颜色、质地等改变时,则对改变的器官进行组织病理学检查。(2)血清电解质检测：Wistar大鼠随机分为药液组(10倍剂量清开灵注射液)和生理盐水对照组,每组8只。给药前禁食不进水12h,通过腹腔注射给药,给药5min后水合氯醛麻醉,断头采血进行血清电解质检测(K+、Na+、Ca2+含量)。采用独立样本t检验,比较两组间各指标是否有差异。2体外溶血实验(1)体外溶血：按照药典相关内容,用新鲜兔血配制2%红细胞悬液,利用酶标仪在570nm波长下检测血红素的吸光值,通过计算分别考察不同批号的清开灵注射液、不同自制和厂家来源的拆方组分药液的体外溶血作用,每药液组设立1、5、10、15倍四个浓度。采用析因设计资料的方差分析比较主效应组间是否有差异,不同浓度下的组间多重比较用LSD方法。(2)多次给药后体外溶血：Balb/C小鼠分为实验组和对照组,每组6只,分别腹腔注射5倍剂量的清开灵注射液和生理盐水,隔日1次,共3次。于首次（文章此处忽略..）给药后的第15d,断头采血,分别制备2%红细胞悬液,考察不同浓度的清开灵注射液对其溶血作用。采用析因设计资料的方差分析比较主效应组间是否有差异。3肥大细胞脱颗粒实验(1)以PBS为空白对照,在不同浓度清开灵注射液与RBL-2H3细胞共培养24h后,通过MTT方法考察药液对细胞生长的影响。(2)不同药液分别与RBL-2H3细胞共孵育45min后,吸取上清,通过对其中过敏活性物质组胺的释放量或者β-氨基己糖苷酶的净释放度的计算,考察不同浓度、不同批号的清开灵注射液以及不同自制和厂家来源的拆方组分药液对肥大细胞的脱颗粒作用,以Tyrode's液为阴性对照,采用One-WayANOVA方法,比较不同组别间是否有差异。4体外血清补体激活实验人血清分别与PBS、清开灵注射液与在体外共孵育,通过检测血清补体系统激活最终产物SC5b-9的含量,考察药液对血清补体激活的作用,采用配对样本t检验,比较PBS、清开灵注射液两组间是否有差异。同时考察不同孵育浓度和时间的影响,采用析因设计资料的方差分析比较主效应组间是否有差异。结果：1单次给药毒性实验在给药后很短时间内,随药物剂量增加,小鼠出现乏力、抽搐、昏迷甚至死亡的不同反应；与生理盐水空白组比较,15倍剂量组小鼠在血常规检测中红细胞总数、血红蛋白含量有显著性差异,小于空白组(F=10.973,P=0.008:F=9.445,P=0.011)；在病理切片中显示肺部充血明显；用药组小鼠血清电解质((K+、Na+、Ca2+)含量与生理盐水对照组无显著性差异(t=0.404,P=0.692;t=-0.352,P=0.730；t=-0.803,（略..）P=0.436)。2体外溶血实验结合观察结果以及通过吸光值计算的结果来看,自制拆方组分金银花、栀子以及药厂来源拆方组分水牛角＆珍珠母的混合提取液具有溶血作用,药厂来源拆方组分黄芩苷以及两种来源的金银花、栀子、珍珠母和板蓝根在较大浓度的时候(5倍及以上)均能引起红细胞的凝集。不同批号的清开灵注射液中,在较大浓度(10倍及以上)时,除批号为812903A、811704A的药液外(两者来自同一个药厂),其他批号的都能引起溶血；批号为811704A和070702的注射液能引起轻度凝集。清开灵注射液在体外对多次给药的实验组、对照组Balb/C小鼠的溶血度无显著性差异(F=0.022,P=0.882)。3肥大细胞脱颗粒实验在对RBL-2H3细胞生长的影响上,各清开灵组、PBS空白组间有显著性差异(F=593.247,P=0.000)。其中清开灵注射液浓度在1/960～2/15(V/V))之间时表现为促进作用,而浓度高于2/15(V/V))时则抑制其生长。与Tyrode's液阴性组比较,不同浓度的清开灵注射液对RBL-2H3细胞组胺释放量和β-氨基己糖苷酶净释放度有显著性差异、不同批号的清开灵注射液对β-氨基己糖苷酶释放度有显著性差异(P0.05),表现为促进作用。但仅2/9个批号的促进释放作用强于阳性组。清开灵注射液自制拆方组分(浓度均为1/10(V/V))除珍珠母外,对RBL-2H3细胞β-氨基己糖苷酶净释放均具有促进作用,其中金银花促释放作用最强(F=17024.728,P=0.000)。清开灵注射液药厂来源拆方组分(浓度均为1/10(V/V))对RBL-2H3细胞β-氨基己糖苷酶净释放均具有促进作用,其中金银花和栀子促释放作用最强(F=2517.163,P=0.000)。4体外血清补体激活实验与PB（此处忽略..）S缓冲液相比,清开灵注射液和人血清1/1(V/V)在体外振荡孵育30min后,血清补体末端复合物SC5b-9的含量有显著性差异,但清开灵组的含量低于PBS药液组(t=2.897,P=0018)。同时不同孵育浓度、不同孵育时间组间比较F=3.436,P=0.066;F=1.97,P=0.182。结论：清开灵注射液在临床上的不良反应,不能简单归于Ⅰ型过敏反应,还应考虑毒性反应和类过敏反应的存在。不良反应的症状一部分可能是因为某些制剂工艺下提取的金银花、栀子等引起血管内急性溶血而出现的,且溶血作用与是否多次给药无关；一部分可能是因为金银花、栀子、板蓝根直接刺激肥大细胞脱颗粒发生类过敏反应而出现的,且清开灵注射液并不能引起人血清补体系统激活,而可能是抑制补体激活的,因此其引起肥大细胞脱颗粒的机制与补体系统激活无关。

以上为本篇毕业论文范文清开灵注射液不良反应性质及发生机制的初步研究的介绍部分。

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