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小鼠和人初级卵泡及未成熟卵母细胞体外成熟培养的研究

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毕业论文范文题目:小鼠和人初级卵泡及未成熟卵母细胞体外成熟培养的研究,论文范文关键词:小鼠和人初级卵泡及未成熟卵母细胞体外成熟培养的研究
小鼠和人初级卵泡及未成熟卵母细胞体外成熟培养的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目的通过建立卵泡和卵母细胞体外成熟培养模型,对卵母细胞的成熟机制进行研究,探讨卵母细胞成熟发育中颗粒细胞和激素的调节作用,增进对卵母细胞体外发育的认识。通过分析培养液中不同激素成分和浓度对小鼠初级卵泡体外生长成熟的作用,为人初级卵泡的体外成熟培养提供参考性实验依据。探讨小鼠未成熟卵母细胞在体外的成熟培养、受精以及受精后的胚胎发育,建立对成熟后卵母细胞活性及胚卵的检测方法;同时对人卵丘细胞-卵母细胞复合体(COCs)的体外成熟培养进行探讨性研究。方法本实验以性成熟前昆明系小白鼠卵巢和患卵巢囊肿病人的卵巢组织为(文章此处忽略..)实验材料,在37℃,5%CO_2培养箱中培养初级卵泡和未成熟卵母细胞,并利用双醋酸荧光素(FDA)进行荧光染色,验证形态学观察结果。具体内容如下:1、小鼠卵巢小组织块在不同组成的酶液中消化处理,所获初级卵泡与机械法所获初级卵泡在无胎牛血清(FBS)和促性腺激素的WaymouthmediumMB752/1培养液中比较培养。2、机械法所获小鼠初级卵泡在添加FBS以及卵泡刺激素(FSH)或人绝经期尿促性腺激素(hMG)的WaymouthmediumMB752/1培养液中比较培养。3、机械法所获小鼠未成熟卵母细胞的体外成熟、体外受精及胚胎培养。(此处忽略..)4、机械法及酶解法获取人初级卵泡和COCs的体外培养和成熟。结果1、在处理相同数量小鼠卵巢的情况下,含3mg/mL胶原蛋白酶IA和100IU/mLDNase的混合酶液组所获游离卵泡数多于其它组酶解结果;酶解所获卵泡的体外培养存活时间却较机械法所获卵泡短。2、八鼠初级卵泡在添加100mIU/mLhMG的培养液中有15.940(n=69)发育成小囊腔卵泡,在添加300mIU/mLhMG的培养液中有28.57%(n。56)发育成大囊腔卵泡。3、小鼠生发泡期卵田细胞体外培养24h,含300mIU/mLhm的AZ组卵日细胞体外受精率为33.33%…-84X与含300mIU/mLFSI的BZ组间存在(文章此处忽略..)极显著差异(P<0*1);含300mIU/mLhMG的AZ组培养48h,囚出细胞受精率为0(n=32),极显著低于含150mIU/。L或300mIU/mLFSH的BI、BZ组(P<0.01)。各组受精卵的卵裂率比较,培养24h组普遍高于培养48h组。4、双醋酸荧光素ODA*活胚卵及培养的正常卵母细胞发亮绿光。5、人初级卵泡在添加300m1U/mLhMG的培养液中能正常存活达20天以上,并由IV级卵泡生长成VI级卵泡。人COC。在添加150mIU/mLFSH的培养液中培养72h,释放Pbl而成熟。结论1、酶解法可获得较多游离卵泡,但刘卵泡的继续培养有不利影响。乙倍养液中添加适当浓度(文章此处忽略..)的伽G比陀[对卵泡的生长有利。3、小鼠GV期裸露卵日细胞能在体外培养成熟且受精分裂;培养液中促性腺激素的种类和剂量以及培养时间对卵田细胞的成熟和受精有明显影响。4、FDA使形态学观察正常的培养后卵母细胞及受精后胚卵发亮绿光,两者结果具有一致性。5、人卵泡和COCS在己建立的小鼠卵泡和卵母细胞培养系统中能生长和成熟。


以上为本篇毕业论文范文小鼠和人初级卵泡及未成熟卵母细胞体外成熟培养的研究的介绍部分。
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