肠上皮细胞内毒素反应性及其耐受内毒素的分子机制研究

搜索高级搜索

原创毕业论文

肠上皮细胞内毒素反应性及其耐受内毒素的分子机制研究

作者: 浏览:5次

免费专业论文
政治工作论文
计算机论文
营销专业论文
工程管理论文范文
医药医学论文范文
法律论文范文
生物专业论文
物理教学论文范文
人力资源论文范文
化学教学论文范文
电子专业论文范文
历史专业论文
电气工程论文
社会学专业论文
英语专业论文
行政管理论文范文
语文专业论文
电子商务论文范文
焊工钳工技师论文
社科文学论文
教育论文范文
数学论文范文
物流论文范文
建筑专业论文
食品专业论文
财务管理论文范文
工商管理论文范文
会计专业论文范文
专业论文格式
化工材料专业论文
英语教学专业论文
电子通信论文范文
旅游管理论文范文
环境科学专业论文
经济论文
人力资源论文范文
营销专业论文范文
财务管理论文范文
物流论文范文
财务会计论文范文
数学教育论文范文
数学与应用数学论文
电子商务论文范文
法律专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文
计算机专业论文
环境艺术专业论文
信息计算科学专业
物流专业论文范文
人力资源论文范文
教育管理论文范文
现代教育技术论文
小学教育论文范文
机械模具专业论文
报告,总结,申请书
理工科专业论文
心理学论文范文
学前教育论文范文

毕业论文范文题目：肠上皮细胞内毒素反应性及其耐受内毒素的分子机制研究，论文范文关键词：肠上皮细胞内毒素反应性及其耐受内毒素的分子机制研究
肠上皮细胞内毒素反应性及其耐受内毒素的分子机制研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景：肠上皮细胞(IEC)处于机体与外界抗原接触的第一线，时时刻刻都在接触大量的细菌及其内毒素却不被激活，其中必然存在相应的耐受机制。而且近年来研究发现肠粘膜屏障功能下降和由此所致的肠源性细菌、内毒素移位与外科重症病人的全身感染(sepsis)、多器官功能衰竭综合征(MODS)等并发症密切相关。因此深入认识肠粘膜屏障功能、阐明IEC耐受内毒素的机制有可能为内毒素血症的防治提供新的思路。目前国内尚无这方面的研究报导，而且由于没有人正常IEC细胞株，国外的研究资料都来自培养实验动物细胞和人结肠癌细胞。很显然，上述两种细胞都有其局限性，用它们作为研究对象所获得的结果不能完全人体实际情况。因此，本课题拟首先建立稳定的较纯的人肠上细胞原代培养模型，并在此基础上系统观察肠上皮细胞对LPS刺激的反应性，进而探讨其耐受内毒素的分子机（本文此处忽略..）制。目的：①探讨人正常肠上皮细胞(IEC)的分离、培养及鉴定方法。②观察人肠上皮细胞对内毒素刺激的反应性，探讨其耐受内毒素的分子机制。方法：①原代培养人正常肠上皮细胞(IEC)：取4～6个月合法引产胎儿小肠，用嗜热菌蛋白酶消化分离IEC，接种于含多种促IEC生长的营养成分的DMEM培养液内，根据IEC和成纤维细胞贴壁时间的差异来纯化IEC，通过观察IEC生长状态、形态特征、超微结构及检测上皮细胞膜抗原对IEC进行鉴定。②观察肠上皮细胞对内毒素刺激的反应性：收集内毒素量效刺激肠上皮细胞(HIC)18小时后的培养上清液，用ELISA法检测IL-8的水平；提取内毒素量效刺激1小时后的肠上皮细胞(HIC)核蛋白，用EMSA法检测NF-κB的活性变化。③检测肠上皮细胞内毒素相关受体mRNA表达：提取有、无内毒素刺激的人正常肠上皮细胞及阳性对照（此处忽略..）THP1细胞的总RNA，用RT-PCR方法检测TLR4,TLR2,CD14和MD2mRNA的表达，用RPA法检测TLR4,CD14和MD2mRNA的表达。用RT-PCR方法检测人小肠癌上皮细胞株(HIC)TLR4,CD14和MD2mRNA的表达。④检测转染内毒素相关受体基因后的HIC对内毒素刺激的反应性改变：用WP=7FUGENE6转染试剂将TLR4,TLR2,CD14表达质粒转染HIC，用内毒素刺激转染后的HIC，检测其NF-κB的活性和IL-8的水平变化。结果：①肠上皮细胞原代培养成功：嗜热菌蛋白酶消化2h可分离出大量的健全绒毛隐窝单位，进一步培养获得的IEC,上皮细胞膜抗原均呈阳性。②肠上皮细胞株(HIC)对内毒素刺激呈低反应性：内毒素量效刺激肠上皮细胞株(HIC)后，均检测不到NF-κB的激活和IL-8的分泌。③肠上皮细胞内毒素相关受体mRNA低表达或不（本文此处忽略..）表达：人正常肠上皮细胞TLR4,TLR2,CD14和MD2mRNA呈低表达。内毒素刺激后，TLR4,CD14和MD2mRNA表达进一步减弱，而TLR2的表达无显著变化。HIC不表达TLR4,CD14和MD2mRNA。④转染内毒素相关受体基因后的HIC对内毒素刺激具有明显的反应性：转染TLR4,CD14和MD2质粒的肠上皮细胞受LPS刺激后，检测到较强的NF-κB活性和明显的IL-8分泌；仅转染TLR4,CD14质粒的肠上皮细胞受LPS刺激后，检测到较弱的NF-κB活性，未检测到IL-8的分泌；不转染对照组、转染空质粒组均未检测到NF-κB活性和IL-8的分泌。结论：①选用嗜热菌蛋白酶作为分离IEC的消化酶，改善IEC的生长环境，经过简便的纯化，即可获得较纯的IEC，完全可供相关实验研究之用。②本研究以检测NF-κB的激活和IL-8的分泌为客观指标，首次观（文章此处忽略..）察了小肠上皮细胞对内毒素刺激的反应性，进一步证实，与单核/巨噬细胞不同，肠上皮细胞呈内毒素无反应性。③首次用RT-PCR和RPA两种方法同时研究了人原代小肠上皮细胞和人小肠癌上皮细胞内三种内毒素相关受体mRNA的表达特点，发现无论人原代小肠上皮细胞和人小肠癌上皮细胞TLR4,CD14和MD2呈低表达或不表达。④采用基因转染技术，首次揭示了肠上皮细胞表面TLR4,CD14和MD2低表达或不表达与细胞内毒素无反应性之间的内在联系，明确了肠上皮细胞耐受内毒素作用的分子机制，同时进一步反证了CD14,TLR4和MD2在调控单核/巨噬细胞内毒素跨膜信号转导中的作用。

以上为本篇毕业论文范文肠上皮细胞内毒素反应性及其耐受内毒素的分子机制研究的介绍部分。

本论文在医药医学论文栏目，由论文网(www.zjwd.net)整理,更多论文,请点论文范文查找

收费专业论文
汉语言文学论文
物理学论文
自动化专业论文
测控技术专业论文
历史学专业论文
机械模具专业论文
金融专业论文
电子通信专业论文
材料科学专业论文
英语专业论文
会计专业论文
行政管理专业论文
财务管理专业论文
电子商务国贸专业
法律专业论文
教育技术学专业论文
物流专业论文
人力资源专业论文
生物工程专业论文
市场营销专业论文
土木工程专业论文
化学工程专业论文
文化产业管理论文
工商管理专业论文
护理专业论文
数学教育专业论文
数学与应用数学专业
心理学专业论文
信息管理专业论文
工程管理专业论文
工业工程专业论文
制药工程专业论文
电子机电信息论文
现代教育技术专业
新闻专业论文
热能与动力设计论文
教育管理专业论文
日语专业论文
德语专业论文
轻化工程专业论文
社会工作专业论文
乡镇企业管理
给水排水专业
服装设计专业论文
电视制片管理专业
旅游管理专业论文
物业管理专业论文
信息管理专业论文
包装工程专业论文
印刷工程专业论文
动画专业论文
营销专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文范文
法律专业论文范文
教育管理论文范文
小学教育论文范文
学前教育论文范文
财务会计论文范文

电子商务论文范文

上一篇：基于闭环理论的复合曲面重构的研究

下一篇：交互式实验室门禁及管理系统的设..