双酚A对中国林蛙精巢中芳香化酶跟StAR的影响

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双酚A对中国林蛙精巢中芳香化酶跟StAR的影响

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毕业论文范文题目：双酚A对中国林蛙精巢中芳香化酶跟StAR的影响，论文范文关键词：双酚A对中国林蛙精巢中芳香化酶跟StAR的影响
双酚A对中国林蛙精巢中芳香化酶跟StAR的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：近年来,跟着工农业的迅猛发展,大量传染环境跟迫害人类健康的化学传染物被始终地开释到环境中。其中酚类环境传染物及其衍生物化学性质牢固、难降解,易进入生物体内,烦扰畸形的生理活动,对动物的生殖内分泌体系产生不良影响。研究表明,双酚A(bisphenol-A,BPA)可导致脊椎动物生殖功能降落,生殖异样跟捣乱畸形内分泌功能。同时,对于酚类物质烦扰动物类固醇激素合成中的关键酶有很多报到,然而有关BPA对中国林蛙类固醇激素合成中芳香化酶跟StAR的研究却很少。本实验以中国林蛙(Ranachensinensis)为研究对象,探讨BPA对中国林蛙精巢间质细胞中CYP19mRNA、芳香化酶(P450arom)跟StAR表白的影响,旨在揭示酚类环境化学传染物影响两栖类动物内分泌的机制,为由BPA传染所造成的两栖类繁殖才能降落提供必定的实际根据。本实验以雄性中国林蛙为实验动物,将中国林蛙裸露于10~(-7)、10~(-6)、10~(-5)MBPA水体中持续10d、20d、30d;以10~(-8)、10~(-9)M17β-雌二醇(17β-estradiol,E_2)作为阳性对比,取其精巢组织,用原位杂交方（略..）法检测CYP19mRNA的表白,用免疫组织化学方法检测P450arom跟StAR的表白。实验成果及论断如下:1.总RNA提取之后,测定RNAOD值,得到OD_(260)/OD_(280)比值在1.9跟2.2之间。经电泳检测,呈现28S、18S、5S三条带,阐明样品纯度合格。成功扩增了322bpCYP19基因cDNA序列,经测序与美洲豹蛙(Ranapipiens)P450arommRNA类似性为96%,与粗皮蛙(Ranarugosa)P450arommRNA类似性为95%,初步断定所获序列为CYP19基因cDNA序列的一个片段。将该片段成功转化后提取质粒测序,成果断定插入片段为目标片段,将质粒线性化后,成功合成RNA探针。2.用合成的探针进行原位杂交反应,检测BPA、E_2处理组跟对比组中国林蛙精巢中CYP19mRNA的表白,成果在间质细胞跟支撑细胞中均有CYP19mRNA阳性反应,胞质内有蓝紫色颗粒。CYP19mRNA阳性信号重要在间质细胞中表白,支撑细胞中仅有少量表白。间质细胞中CYP19mRNA的表白绝对值统计分析成果可见,在10~(-5)M、10~(-7)MBPA处理组中,随BPA处理时光不同CYP19mRNA表白绝对（本文此处忽略..）值变更不明显。在10~(-6)MBPA、10~(-8)ME_2浓度组中,随BPA、E_2处理时光不同CYP19mRNA表白绝对值均高于对比组,其中当BPA、E_2处理20d时,CYP19mRNA表白绝对值达到最大。在10~(-9)ME_2浓度组中,CYP19mRNA表白绝对值高于对比组,随E_2处理时光的增加CYP19mRNA表白绝对值增加,CYP19mRNA表白绝对值随处理时光上调。在处理时光雷同时,当BPA浓度为10~(-6)、10~(-7)M,E_2浓度为10~(-8)、10~(-9)M时CYP19mRNA表白绝对值随浓度增大而增加。表明间质细胞中CYP19mRNA表白量与BPA的累积剂量有关,CYP19mRNA分子表白量与BPA之间有剂量-时光效应关联。3.用免疫组织化学方法检测精巢中P450arom的表白,P450arom阳性反应重要在间质细胞。统计分析间质细胞中的P450arom的表白绝对值,在10~(-5)M、10~(-7)MBPA处理组中,随BPA处理时光不同P450arom表白绝对值变更不明显。在10~(-6)MBPA、10~(-8)ME_2处理组中,随BPA、E_2处理时光不同P450arom表白绝对值均高于对比组,其中当BPA、E_2处理20d时,P450arom表白（略..）绝对值达到最大。在10~(-9)ME_2浓度组中,P450arom表白绝对值高于对比组,随E_2处理时光的增加P450arom表白绝对值增加,P450arom表白绝对值随处理时光上调。在处理时光雷同时,当BPA浓度为10~(-6)、10~(-7)M,E_2浓度为10~(-8)、10~(-9)M时P450arom表白绝对值随浓度增大而增加。表明间质细胞中P450arom表白量与BPA的累积剂量有关,P450arom蛋白表白量与BPA之间有剂量-时光效应关联。这些成果与CYP19mRNA原位杂交成果基本一致。4.用免疫组织化学法检测精巢中StAR的表白,StAR阳性反应重要在间质细胞。统计分析间质细胞中的StAR的表白绝对值,成果与P450arom免疫组织化学反应成果类似。但不同的是,在10~(-5)MBPA处理组中,随BPA处理时光不同StAR表白绝对值变更明显,其中,当BPA处理10d时StAR表白绝对值较对比组降落,StAR表白下调。表明间质细胞中StAR表白量与BPA的剂量有关,StAR蛋白表白量与BPA之间同样有剂量-时光效应关联。5.本实验中E_2作为BPA的一个阳性对比,处理成果显示,10~(-8)ME_2浓（略..）度组中,随E_2处理时光不同CYP19mRNA、P450arom、StAR表白绝对值明显高于BPA处理组。显示雌激素活性E_2＞BPA。上述成果表明,BPA可能影响中国林蛙精巢间质细胞中类固醇激素合成中的关键性酶P450arom、StAR的表白。提示BPA通过调控P450arom、StAR的表白来烦扰动物的内分泌活动。

以上为本篇毕业论文范文双酚A对中国林蛙精巢中芳香化酶跟StAR的影响的介绍部分。

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