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内分泌烦扰物对鸡胚性腺发育的影响及其机理的研究

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毕业论文范文题目:内分泌烦扰物对鸡胚性腺发育的影响及其机理的研究,论文范文关键词:内分泌烦扰物对鸡胚性腺发育的影响及其机理的研究
内分泌烦扰物对鸡胚性腺发育的影响及其机理的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:近50年来,跟着产业、农业的飞速发展,大量的化学合成物质伴随古代化的出产流程及其副产物被开释到了环境中。其中有一些构造类似动物跟人体内激素,能烦扰体内天然激素畸形的合成、分泌、利用、作用跟代谢,这些化学物质被称为内分泌烦扰物(EDCs)。近年来,有关外源性化合物对动物跟人内分泌体系的烦扰进行了广泛的研究。已经证明EDCs对动物雌激素、甲状腺素、儿茶酚胺、睾酮等浮现明显的烦扰效应,而临床上以生殖妨碍、出生缺点、发育异样、代谢混乱以及某些癌症为特点。本实验选用鸡胚作为实验动物,采取体内外实验来研究激素跟多氯联苯(PCBs)及己烯雌酚(DES)对鸡胚性腺发育跟生殖细胞增殖分化的影响。体外实验:树破了鸡胚卵巢生殖细胞-体细胞体外无血清共培养模型,刚分别的卵巢细胞悬液中重要包含生殖细胞(重要是卵原细胞跟部分初级卵母细胞)跟体细胞(颗粒细胞、类固醇生成细胞跟上皮细胞等),生殖细胞的直径大于体细胞。培养24h(本文此处忽略..)后,细胞基本上贴壁,其中体细胞贴在培养板底部,呈梭状成长,到培养48h基本铺满全部板底,生殖细胞呈圆形或卵形紧贴生善于其上,它们的直径大概在15~25μm。生殖细胞c-kit染色呈阳性。在此共培养体系中,增殖细胞核抗原(PCNA)染色显示生殖细胞存在较高的增殖活性并且细胞在无血清的培养体系中可存活10天以上。首先验证该培养模型对激素的反应性,用卵泡刺激素(FSH)(0.25~1.0IU/ml)跟17β-雌二醇(E_2)(10~(-8)~10~(-5)M)单独或结合处理细胞,培养48h后,察看细胞数量变更并用PCNA免疫细胞化学显示增殖细胞,打算生殖细胞的PCNA标记率(LI)。FSH(0.25~1IU/ml)及E_2(10~(-7)~10~(-5)M)处理组生殖细胞数量明显增多(P<0.01),与对比组比拟,FSH跟E_2处理后细胞轮澄清楚,破体感更强。PCNA免疫细胞化学显示,FSH及E_2(10~(-7)~10~(-5)M)处理后,生殖细胞细胞核着色较深,阳性率明显高于对比组(P<0.05)。此外,FSH跟E_2还表示出协同作用(此处忽略..)。上述成果证明该模型对激素作用敏感,可用于评估外源性激素、药物、毒物对生殖细胞及体细胞作用的研究。利用此培养模型来评估PCBs对卵巢细胞体外增殖的影响,培养同时用浙江人学硕卜论文Aroclor1254(0.1一10pg/ml)处理细胞。成果发明,低浓度PCBs(0.1一l“g/m1)重要表示出雌激素样作用,促进了生殖细胞的增殖,而高浓度PC8s(1009/m”则对生殖细胞跟体细胞产生强烈的毒性作用,处理多少个小时内即可导致细胞核染色质固缩,细胞脱落崩解成碎片。处理6h后四甲基偶氮哇盐(MTT)法测定细胞的活性跟乳酸脱氢酶(LDH)开释程度检测显示PCBs(10pg/m1)导致卵巢细胞活性明显降落(P0.05)跟LDH开释量明显升高(PO.05),进一步证明了状况学察看的成果。pCBs对细胞的毒性作用可被抗氧化剂VE所缓解。24h后,PCBs的雌激素样作用开端浮现出来,幸存下来的生殖细胞开端增殖分化。用他莫西酚可阻断尸CBs的雌激素样作用并引起更强烈的(略..)毒性作用。以上成果表明,尸CBS可烦扰卵巢生殖细胞的增殖并可通过其毒性作用跟雌激素样作用烦扰鸡胚性腺发育。体内实验:将PCBS(AroClorz254,100pg/枚)、DES(100pg/枚)、EZ(100协g/枚)、克罗米酚(100协g/枚)等打针到10日龄艾维因鸡胚气室内,而后用石蜡封口,放置38℃、湿度为60%白勺恒温箱中持续孵化至19日龄,取鸡胚性腺及输精(卵)管,进行组织学分析。成果发明PCBs、DES明显促进卵巢皮质的发育(P0.05),后果类似E:;PCBs对皋丸发育浮现幽微的雌激素样作用,生精巧胞分化受到克制,细精管管壁明显变薄(p。.01),而雌激素DES、E,作用于攀丸会导致翠丸萎缩,甚至雌性化翠丸横截面积比对比组明显减少,细精管管壁也变薄(P0.05)。尸CBs以上雌激素样作用能被克罗米酚阻断。此外,与EZ比拟,PCBs、OES对雌性跟雄性生殖细胞表示出强烈的毒性作用,使大多数生殖细胞产生核固缩跟胞质空泡化,细胞缝隙增大,雄性的精巧管构造(文章此处忽略..)也受到破坏。以上成果表明DES更多浮现出雌性激素样作用,而PCBs对鸡胚性腺浮现出毒性跟雌性激素的双重作用。论断:体外实验成果表明FSH跟EZ对18日龄鸡胚卵巢生殖细胞存在促进增殖作用,PcBs则对卵巢细胞存在毒性跟雌性激素的双重作用。体外实验的成果得到体内实验的进一步验证。因此,鸡胚卵巢生殖细胞一体细胞体外共培养模型可用作评估激素跟EDCs对雌性生殖体系发育的影响及探讨其作用机制的研究。


以上为本篇毕业论文范文内分泌烦扰物对鸡胚性腺发育的影响及其机理的研究的介绍部分。
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