乌司他丁对脓毒症大鼠早期下丘脑—垂体—肾上腺轴的影响及意义

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乌司他丁对脓毒症大鼠早期下丘脑—垂体—肾上腺轴的影响及意义

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乌司他丁对脓毒症大鼠早期下丘脑—垂体—肾上腺轴的影响及意义毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:脓毒症(Sepsis)是创伤、烧伤、休克、感染等临床危重患者的严重并发症之一,也是诱发脓毒性休克、多器官功能障碍综合征(Multipleorgandysfunctionsyndrome,MODS)的重要原因。脓毒症是危重患者的主要死亡原因之一,现已成为进一步提高危重症救治成功率的最大障碍。近几十年来,人们对脓毒症的机制进行了非常投入研究和探索,以期寻找有效的干预的措施。然而迄今为止,结果难以令人满意。神经-内分泌-免疫网络理论的提出为我们提供了新的契机,其中下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴在神经内分泌免疫网络研究中备受关注。HPA轴是神经内分泌免疫网络的枢纽,在感染、创伤等应激反应中起关键性的作用。通过研究HPA轴在脓毒症过程中的变化,将有助于了解脓毒症的本质,并有望开辟脓毒症临床干预的新途径。乌司他丁是由肝脏分泌的酸性糖蛋白,属于人体内源性抑炎物质,是从健康男性尿液中提取精制而成的糖蛋白,乌司他丁能抑制多种蛋白酶活性,清除氧自由基,抑制心肌抑制因子产生,减少炎症介质释放,调节过度炎症反应,减轻组织损伤,促进机体康复。本研究采用盲肠结扎穿孔(CLP)法复制大鼠脓毒症模型,通过观察脓毒症早期大鼠,血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORTT)浓度及下丘脑组织促肾上腺皮质激素释放激素mRNA(CRH（本文此处忽略..）mRNA)水平及组织超微结构,以及对比乌司他丁药物干预后上述激素水平和组织超微结构的变化,探讨HPA对脓毒症早期大鼠血浆促肾上腺皮质激素、皮质酮浓度及下丘脑组织促肾上腺皮质激素释放激素mRNA水平的调节作用及乌司他丁对脓毒症大鼠HPA轴的潜在可能影响。方法:脓毒症动物模型的制备选用经典的盲肠结扎穿孔(CLP)法,选用健康雄性Wistar大鼠36只,体重在250-300g之间,随机分为4组:(1)空白对照组(Normalgroup):不给予任何处理,直接处死;(2)假手术组(Shamgroup):只开腹,翻动肠管,牵拉盲肠,关腹,不结扎和穿孔盲肠;(3)盐水组行CLP后给予生理盐水10mL/Kg腹腔注射;(4)乌司他丁组行CLP后给予乌司他丁10万U/Kg腹腔注射,浓度为1万U/mL。各组术后在腹部皮下注射生理盐水30ml/kg,补充术中丢失量和生理需要量。各组均于术后6小时经颈动脉取血2ml,离心后取血浆于-80℃冻存,采用放射免疫法测定血浆中ACTH、CORTT的水平;各组留取完整下丘脑组织,液氮保存,逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechaiaction,RT-PCR)半定量检测CRHmRNA在下丘脑中的表达水平。盐水组和乌司他丁组各取下丘脑、垂体和肾上腺组织制成3mm3大小,4%戊二醛固定,应用透射电镜观察这些组织的超（文章此处忽略..）微结构的变化。数据采用SPSS13.0版软件包(SPSSCompany,Chicago,Illinois,USA)进行统计分析,检验各组正态性,若符合正态数据以均数±标准差(x±s)表示,方差齐时采用完全单因素的方差分析,方差不齐时采用非参数的秩和检验。P0.05认为差异有统计学意义。结果:1实验动物术后一般情况的观察:假手术组大鼠术后清醒较早,清醒后活动较灵活,剖腹未见腹水,无恶臭,肠管无水肿。盐水组术后苏醒延迟,精神萎靡,眼角分泌物增多,竖毛,呼吸急促。剖腹可见血性腹水,恶臭,肠管水肿,部分盲肠末端发黑坏死。乌司他丁组大鼠与盐水组大鼠相比,表现较轻。2下丘脑、垂体和肾上腺组织超微结构变化2.1下丘脑组织超微结构变化盐水组下丘脑粗面内质网扩张,有脱颗粒现象;线粒体部分嵴和膜融合模糊不清,部分嵴有断裂。乌司他丁组较盐水组改变明显减轻。2.2垂体组织超微结构变化盐水组垂体ACTH细胞内可见大量而小的内分泌颗粒,密度较高;粗面内质网扩张,脱颗粒现象;线粒体部分嵴缺失、水肿。乌司他丁组垂体ACTH细胞内可见少量内分泌颗粒,椭圆形的致密芯,部分分泌颗粒外周有环形空晕及板层状线粒体。2.3肾上腺组织超微结构变化盐水组肾上腺皮质束状带细胞胞质水肿,脂滴减少,滑面内质网减少;线粒体水肿,部分嵴和膜缺失。乌司他丁肾上腺皮质束状带细胞较（此处忽略..）大,胞质丰富、颜色浅,胞质内有较多脂滴;管泡状线粒体,大量滑面内质网。3CLP模型盐水组下丘脑组织CRHmRNA(1.151±0.120)和血浆中ACTH(52.387±5.339pg/ml)、CORTT(24.446±0.561ng/ml)水平高于正常对照组和假手术组(CRHmRNA:1.151±0.120比0.412±0.038;1.151±0.120比0.797±0.130,均P0.05;ACTH:52.387±5.339pg/ml比21.704±0.492pg/ml;52.387±5.339pg/ml比24.354±1.238pg/ml,均P0.05;CORTT:24.446±0.561ml比12.459±1.472ng/ml;24.446±0.561ng/ml比12.486±2.614ng/ml,均P0.05)。4CLP模型乌司他丁组下丘脑组织CRHmRNA(0.603±0.069)和血浆中ACTH(24.832±2.426pg/ml)、CORTT(19.686±0.498ng/ml)水平低于盐水组(CRHmRNA:0.603±0.069比1.151±0.120,P0.05;ACTH:24.832±2.426pb/ml比52.387±5.339pg/ml,P0.05;CORTT:19.686±0.498ng/ml比24.446±0.561ng/ml,P0.05)。5假手术组血浆中ACTH(24.354±1.238pg/ml)、CORTT(12.486±2.614ng/ml)水平无差别于正常对照组(ACTH:24.354±1.238pg/ml比21.704±0.492pg/ml,P0.05)。假手术组下丘脑组织CRHmRNA(0.797±0.130)水平高于正常对照组(CRHmRNA:0.797±0.130比0.412±0.038,P0.05)。结论:1本实验采用CLP法可成功复制脓毒症大鼠动物模型。2脓毒症早期,大鼠血浆CORTT、ACTH和下丘脑组织CRHmRNA基因表达水平升高,说明此时HPA轴处于过度（文章此处忽略..）激活的状态;CLP制模术后6小时下丘脑、垂体和肾上腺组织超微结构发生了改变。3乌司他丁可明显改善脓毒症大鼠的临床表现及体征,减轻脓毒症所致的下丘脑、垂体、肾上腺超微结构的改变,并在脓毒症早期可降低脓毒症大鼠血浆中ACTH、CORTT浓度及下丘脑CRHmRNA水平,对HPA轴起到一定调节作用。

以上为本篇毕业论文范文乌司他丁对脓毒症大鼠早期下丘脑—垂体—肾上腺轴的影响及意义的介绍部分。

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