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鲈鱼Syntaxin1B基因部分序列克隆与分析

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毕业论文范文题目：鲈鱼Syntaxin1B基因部分序列克隆与分析，论文范文关键词：鲈鱼Syntaxin1B基因部分序列克隆与分析
鲈鱼Syntaxin1B基因部分序列克隆与分析毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：细胞胞吐及内分泌作用是生物体最基本的生命现象之一，它维系着个体正常的新陈代谢和生命活动，涉及到生物体从细胞到个体的不同层次，和生长、发育、生殖及防御等各个方面。细胞分泌活动涉及一系列复杂的分子活动和信号转导过程，它是许多重要生命活动如神经递质的释放、内分泌激素分泌、蛋白质转运等的基础。目前所知，其对生命活动的至关重要性使得真核细胞生物经过漫长的选择进化形成了一套确保其有序运行的忠实可靠的机制，即由SNARE蛋白的各（此处忽略..）个蛋白质家族相互协调，共同作用，在分子水平上形成了一套对这一基本生命现象进行严格精密调控的机制。SNARE蛋白复合体的核心蛋白包括VAMP(synaptobrevin)、SNAP-25和Syntaxin。迄今为止，Syntaxin是SNARE蛋白复合体中最大的蛋白家族，它位于质膜上。Syntaxin1B就是Syntaxin蛋白家族的一个异构体。Syntaxin1B基因已在多种哺乳动物中被克隆，如小鼠，大鼠和人等；在几种海洋生物（文章此处忽略..）中也被克隆出，如斑马鱼，鲑鱼和蟹。而海洋经济鱼类如鲈鱼，却从未被克隆与研究，本实验就以海洋经济鱼类鲈鱼作为实验材料，对Syntaxin1B基因进行克隆和序列分析。本实验从鲈鱼脑组织中提取总RNA，通过反转录得到cDNA第一条链，根据已克隆出的其它生物的Syntaxin1B基因序列，设计并合成引物，在妒鱼syntaxin1B基因部分序列克隆与分析cDNA第一条链的基础上使用降落PCR(TD一PCR)，进行体外扩增妒鱼Synta（文章此处忽略..）xinIB基因的部分序列，得到长度为75lbP的片断，在胶中洗脱下该片段，与pMD18一T载体链接，转化入感受态细胞，挑取阳性克隆扩大培养，提取质粒，经HindIH和x一gaH两内切酶消化得到751bp的片断，证明链接成功。将含有阳性克隆的菌液送出测序，所测序列在NCBI网站上进行BLAsT，比对结果证实该序列就是syntaxinIB，而且该序列(235个氨基酸)己占SyntaxinIB全序列(288个氨基酸)的81.59%。在该序列中也发现了神经毒素一肉毒（此处忽略..）杆菌毒素的结合位点，还有syntaxinIB与SNAP一25结合的双螺旋区域。使用Megalign和Bioodit等生物学分析软件，对克隆出的妒鱼的SyntaxinIB这段序列与己报道的其它生物的SyntaxinlB序列进行比对，得出该基因在不同生物间存在高度同源性，因此说明SNARE蛋白复合体在海洋经济鱼类妒鱼的囊泡膜转运中也起重要的调控作用。

以上为本篇毕业论文范文鲈鱼Syntaxin1B基因部分序列克隆与分析的介绍部分。

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