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淫羊藿苷体内外代谢行为及其代谢产物相关活性研究

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毕业论文范文题目：淫羊藿苷体内外代谢行为及其代谢产物相关活性研究，论文范文关键词：淫羊藿苷体内外代谢行为及其代谢产物相关活性研究
淫羊藿苷体内外代谢行为及其代谢产物相关活性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：淫羊藿(HerbaEpimedii)系小檗科(Berberidacae)淫羊藿属(Epimedium)植物，具有补肾壮阳，强筋健骨，祛风除湿之功效。淫羊藿苷(icariin,ICA)是其主要活性成分，现为淫羊藿药材的主要法定质量控制标准。迄今已发现ICA的主要药理活性在于改善心脑血管系统功能、增强机体免疫力及调节内分泌等方面；并有报道淫羊藿复方制剂具有典型的植物雌激素样作用，因此淫羊藿很有可能是通过植物雌激素样作用来发挥其主治功效，对作为药材和/或制剂质控指标成分的ICA进行植物雌激素样活性测定，在阐明其主治功效的物质基础方面具有重要意义。文献报道一些黄酮类化合物在经口给药吸收过程中，通常经历代谢过程而呈现雌激素样活性。淫羊藿入药通常为口服给药，探索ICA口服后是否也转化为可能的代谢产物，如淫羊藿素(Icaritin,ICT)和去甲淫羊藿素(Desmethylicaritin,DICT)等，并评价ICA经历代谢前后的构效关系，对阐明药材淫羊藿主治功效的物质基础极有必要。本文通过建立毛细管区带电泳(Capillaryzoneelectrophoresis,CZE)对ICA体内药代动力学（文章此处忽略..）研究方法，以及CZE,HPLC与LC-MS相结合进行体内代谢产物测定、HPLC与LC-MS相结合进行肠内菌群代谢产物的测定；并通过化学修饰法制备主要代谢产物观察构效关系，为淫羊藿制剂口服生物活性与机制研究提供实验依据。1．ICT和DICT的修饰纯化采用纤维素酶水解制备ICT，加入三溴化硼溶液氧化获DICT。并以制备型HPLC分离纯化获ICT和DICT纯品，EI-MS鉴定确认。面积归一化法定量分析显示，水解产物的纯度达98.9％，EI-MS鉴定显示分浙江大学硕士学位论文淫羊若昔体内外代谢行为及其代谢产物相关活性研究子离子峰n订z为368，与ICT分子量一致。采用LC尼sI一MS法检测去甲基化反应，根据HPLC图谱分析，ICT去甲基反应产物主要有5种成分，峰5所对应的负离子质谱图，给出n订z为352.6的「M一H]一峰，其对应的化合物相对分子质量应为354，与DlcT的分子量相符。制备型HPLC分离纯化去甲基化反应产物，收集峰5流分经干燥获纯品。根据HPLC面积归一化法定量分析，该峰对应的化合物纯度达到了98.6%。EI一MS鉴定，显示分子离子峰而z为354，与DICT的分子量一致。2.生物样品中ICA毛细管（本文此处忽略..）电泳法测定的方法学研究采用以下电泳条件进行生物样品血清、尿液和粪便中ICA及其代谢产物测定:毛细管柱:50林mX48.2cm(有效长度43.6cm)，未涂渍熔融石英毛细管柱:缓冲液为3ommol/LN处B4O7一sonunol几NaHZpo材乙睛(50:50，V瓜)，pH为10.0;毛细管柱和样品室温度分别为25℃和10℃;分离电压为12kV;检测波长为27onm;压力进样10psiXsee，内标卡马西平(Carbamaxepine，CMp)。准确吸取ICA储备液(lmg/mL)和内标溶液，再加入空白大鼠血清、尿样和粪便至o.lml，配成一系列浓度的ICA工作液，涡漩混合器混合均匀。每管血清分别加入乙睛沉淀蛋白，尿样和粪便则分别加入乙酸乙酷，漩涡混匀并离心，然后取上清或有机层，于空气流下挥干，加甲醇溶液，进行电泳分析。结果显示，血清、尿液和粪便样品中:ICA在2.5~15Omg/L范围内呈良好的线性关系，回归方程分别为:Y=0.02巧x一0.0314(扩=0.9947)(血清)，Y=0.025X一0.0256(护二0.9943)(尿液)，和Y=o.02s6x一0.0229(扩=0.9944)(粪便)。采用逐步稀释法测得检测限分别为1.0m叭(血清)，0.7m留L(尿液)，和0.8m留L(粪便)(S加〕3)。低、中、高浓度的日内精密度(RSD%)分别为4.47%、4.18%、2.53%(血清)，4.73%、1.（此处忽略..）03%、1.02%(尿液)，4.56%、2.04%、1.08%(粪便)，平均日内精密度(RSD%)5%;低、中、高浓度时的日间精密度(RSD%)分别为6.48%、5.22%、4.28%(血清)，6.06%、2.64%、2.01%(尿液)，和5.89%、3.20%、1.92%(粪便)，平均日间精密度(RSD%)10%。低、中、高浓度时的相对回收率分别为693%、742%、77.2%(血清)，75.3%、85.9%、90.8%(尿液)，78.0%、86.4%、92.1%(粪便)。浙江大学硕士学位论文淫羊挂昔体内外代谢行为及其代谢产物相关活性研究3.ICA在大鼠体内的药代动力学取SD大鼠4只，经18h空腹(禁食不禁水)后灌胃，按IcA12Om叭g给药，给药后5，10，20，30，40，60，80，120，180，240min各于尾静脉取血0.30ml，离心后取血清o.10ml，按前述毛细管电泳方法测定。结果表明，ICA血药浓度一时间数据经计算机曲线拟合后，动力学行为符合开放性单隔室一级吸收模型。吸收速率参数T，几k。为(26.71士1.94)min，消除半衰期TI尼k。为(59.18士8.26)min，达峰时lhJ为(51.81士2.67)min，药峰浓度Cmax为(13.22士1.01)mg，L一l，Aue为(2471.1士269.6)mg·min·L一，。4.ICA大鼠灌胃后血清、尿液和粪便中代谢产物测定取SD大鼠6只，经18h空腹(禁食不禁水)后灌胃，按ICA12Om叭g给药，于给药后24Omin尾静脉取血，同时收集0~96h的尿液和粪便，尿液和粪便最后均浓缩5倍，按前述生物样品预（略..）处理方法进行操作。并以毛细管电泳法测定血清、尿液和粪便中代谢产物。以HPLC分析尿液和粪便中代谢产物如下，分析柱:DiamonsilC18(250mmX4.6mm，5协m);流动相:甲醇一水一

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