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γδT细胞对肺巨噬细胞的免疫调节作用的研究

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毕业论文范文题目:γδT细胞对肺巨噬细胞的免疫调节作用的研究,论文范文关键词:γδT细胞对肺巨噬细胞的免疫调节作用的研究
γδT细胞对肺巨噬细胞的免疫调节作用的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:T淋巴细胞名义表白两种抗原受体(TCR)即αβTCR跟γδTCR。人们目前研究较多的是αβT细胞,γδT细胞所占比例较小,仅占畸形人外周血淋巴细胞总数的3%~10%,然而在机体免疫调节及免疫监督中起侧重要的作用。γδT细胞重要辨认以下类型的抗原:MHC分子;磷酸化抗原;热休克蛋白;非肽类抗原等。本文首先利用三种不同的抗原(即IPP,HSP70跟EP6)刺激小鼠脾脏γδT细胞,以懂得三种抗原在不同浓度跟不同方法干涉下小鼠脾脏γδT细胞的增殖纯度。实验中重要采取流式细胞术检测细胞培养中脾脏γδT细胞的比例。成果表明,在IPP,HSP70跟EP6持续刺激下脾脏γδT细胞在培养第三地利均呈现增殖的顶峰,而后增殖有所降落。跟着三种抗原浓度的增加,IPP的浓度在1.25ng/ml时呈现脾脏γδT细胞的增殖顶峰,扩殖的百分比为5.45%±0.02%(P0.05);而后跟着浓度的增加增殖减低。在雷同浓度下不同干涉方法中发明,三种抗原一次性单次刺激时亦均在作(本文此处忽略..)用后第三天呈现增殖顶峰,扩增的百分比分辨为3.60%±0.27%,4.54%±0.16%,3.20%±0.11%(P0.05);IPP跟EP6组第三天增殖顶峰时,持续性刺激的增殖纯度大于一次性单次刺激,扩增的百分比分辨为(6.38%±0.58%VS3.60%±0.27%,5.41%±0.11%VS3.20%±0.11%)(P0.05)。本实验证明了在体外刺激脾脏γδT细胞时,增殖顶峰呈当初培养的第三天。不同抗原刺激的γδT细胞品种不同,因此增殖的纯度亦不雷同。持续性的抗原刺激较一次性单次刺激更能促进γδT细胞的增殖。γδT细胞的免疫调节作用越来越受研究者的器重,已知另一种在免疫反应中起重要作用的巨噬细胞广泛分布于全身各组织中,是机体抵抗外界入侵的重要防线。雷帕霉素是一种大环内酯类免疫克制剂,已知的重要靶点是胞浆内的激酶mTOR。通过体外培养LPS引诱的小鼠急性肺伤害模型中脾脏γδT细胞跟肺组织巨噬细胞,以懂得脾脏γδT细胞跟肺组织巨噬细胞之间是否存在彼此作用以及体外雷帕霉素对这种彼此作用是否有影响。实验中,树破LP(略..)S引诱的小鼠急性肺伤害的模型,采取HE染色固定肺组织并察看其病理改变;流式细胞术检测磁珠分选前后肺组织巨噬细胞跟脾脏γδT细胞的纯度,荧光显微镜下察看脾脏γδT细胞的状况,ELISA法检测小鼠脾脏γδT细胞跟肺组织巨噬细胞培养的上清液中炎症因子IL-4,IL-12,IFN-γ跟TNF-α的分泌程度;Real-timePCR检测培养细胞中IL-4,IL-12,IFN-γ跟TNF-α的mRNA程度。实验成果显示在LPS引诱的急性肺伤害模型中,LPS组支气管肺泡灌洗液的总细胞跟中性粒细胞浓度明显大于PBS组跟LPS+RAPA组,总细胞分辨为(85.6±31.2VS10.8±2.5,48.6±26.0)×104个/ml,中性粒细胞的分辨为(73.4±28.8VS1.5±0.5,39.8±24.8)×104个/ml(PO.05)。脾脏γδT细胞与肺组织巨噬细胞按1:1混淆培养时,LPS组上清液IFN-γ高于PBS组,RAPA组跟LPS+RAPA组(174.17±42.16VS16.80±8.80,12.19±4.14,7.16±3.03)pg/ml,(P0.05)。I(略..)L-4高于PBS组跟LPS+RAPA组(73.82±61.71VS19.19±10.01,12.35±1.86)pg/ml,(P0.05)。而TNF-α只高于RAPA组跟LPS+RAPA组(34.24±8.08VS12.20±4.56,10.56±2.99)pg/ml,(P0.05)。混淆培养时LPS组IFN-γmRNA的表白明显高于PBS组(10.67±4.62VS1),(P0.05)。本研究中体外将脾脏γδT细胞跟肺组织巨噬细胞分别纯化掉队行培养,使得细胞成长的内环境受外界烦扰较少,较实在的反应细胞的生物学活性。本实验成果证明了体内实验中RAPA能克制LPS引诱小鼠急性肺伤害的支气管肺泡灌洗液中总细胞跟中性粒细胞的增殖,体外实验中显示了脾脏γδT细胞跟肺组织巨噬细胞单独培养时未见明显的变更,但混淆培养时细胞因子分泌产生很大变更,阐明脾脏γδT细胞跟肺组织巨噬细胞可能存在细胞间的彼此作用从而影响了各自的生物学活性。在混淆培养时,LPS能刺激脾脏γδT细胞跟肺组织巨噬细胞分泌较多的IFN-γ跟IL-4,并能增加混淆培养细胞中I(此处忽略..)FN-γmRNA的表白。RAPA能克制混淆培养分泌的IFN-γ,IL-4跟TNF-α,阐明RAPA克制了脾脏γδT细胞跟肺组织巨噬细胞的彼此作用,该克制造用对基因转录程度不任何影响。其具体作用机制还须要咱们在今后的研究中探讨以寻找炎症疾病医治的新靶点。


以上为本篇毕业论文范文γδT细胞对肺巨噬细胞的免疫调节作用的研究的介绍部分。
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