吗啡对体外培养女性成骨细胞MORmRNA、ERmRNA表白的影响

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吗啡对体外培养女性成骨细胞MORmRNA、ERmRNA表白的影响

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毕业论文范文题目：吗啡对体外培养女性成骨细胞MORmRNA、ERmRNA表白的影响，论文范文关键词：吗啡对体外培养女性成骨细胞MORmRNA、ERmRNA表白的影响
吗啡对体外培养女性成骨细胞MORmRNA、ERmRNA表白的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：研究背景跟目标：寰球性的药物滥用跟药物依附已经成为当前社会最受关注的问题,其中吸毒人数的始终增加,尤其是女性吸毒者的绝对数跟绝对数大幅度增加给社会、家庭及个人带来了极大的迫害。大量实验研究表明内源性阿片肽不仅作用于中枢体系(下丘脑、垂体等)引起靶器官变更,而且还直接作用于外周体系(子宫、卵巢、骨等),但后者国内外研究较少见。因此,本课题用酶消化法从畸形女性松质骨中分别成骨细胞,进行体外培养跟功能鉴定,在研究μ阿片受体(μ-opioidreceptor,MOR)、雌激素受体(estrogeeceptor,ER)存在于人成骨细胞的基本上,从mRNA程度研究吗啡对体外培养人成骨细胞MOR、ER表白的影响,探讨吗啡对成骨细胞的直接作用。材料及方法：实验材料取自2009年3月-2009年6月山西医科大学第一病院骨科15例骨折接收手术的女性患者（文章此处忽略..）(重要取松质骨),年纪20-45岁,除外内分泌疾病及全身性疾病,就诊前3个月未服用过激素类药物,所有标本在无菌前提下收集,30min内送实验室培养用胰酶-胶原酶消化法从畸形人松质骨中分别培养成骨细胞,用茜素红染色法、Gomoi改进钙钻法鉴定成骨细胞,将培养并鉴定的成骨细胞分为两部分：一部分进行细胞增殖实验,另一部分进行RT-PCR实验。细胞增殖实验：将细胞分为对比组、17-β雌二醇组、17-β雌二醇+吗啡组、17-β雌二醇+吗啡+纳洛酮组,每组30孔,加药后,按照设定时光(1、2、3、5、7天),各取6孔进行MTT法检测,绘制细胞成长曲线。RT-PCR实验：(1)吗啡对MORmRNA表白的影响：将细胞分为对比组、吗啡组(10-4，10-5,10-6,10-7mol/L)、吗啡+纳洛酮组,每组8瓶。(2)吗啡对ERmRNA表白的影响：将细胞分为对比组、吗啡组(10-4,10-5,10-6,10-7mol/L)、吗（文章此处忽略..）啡+纳洛酮组、17-β雌二醇+吗啡组、17-β雌二醇+吗啡+纳洛酮组、17-β雌二醇组,每组8瓶。其中对比组为空白对比,吗啡组单纯参加吗啡,其它组中吗啡与纳络酮二者的终浓度均为10-5mol/L,17-β雌二醇的终浓度为10-8mol/L。用倒置显微镜察看细胞状况学改变。在细胞近长满时加药,加药24h后收集各组细胞进行RT-PCR,利用样本与β-actin的灰度比值,打算出MORmRNA、ERmRNA的含量,用SPSS13.0统计软件进行统计分析,所有数据以均数±标准差表示,采取单因素方差分析,组间比较采取LSD法,量效关联用Spearman等级相干测验,以α=0.05为测验水准。成果：刚接种的成骨细胞呈球形,3天后成骨细胞多少乎全部贴壁,8-15天细胞多少乎充斥,构成单层细胞,有的细胞借崛起彼此连接。细胞合成的碱性磷酸酶经改进钙钴法(Gomori（文章此处忽略..）法)染色呈棕黑色轻微颗粒；细胞在前提培养液中培养10天以上,细胞汇合成铺路石样重叠成长,构成细胞小结,为不透光的矿化结节,茜素红染色可见矿化结节浮现红色。从成长曲线可能看出,E2组细胞数较对比组增加,E2+M组细胞数较E2组降落,差别有明显性(P0.05),E2+M+N组细胞数与E2组比较,差别无明显性(P0.05)。细胞近长满时加药,加药24h后收集细胞行RT-PCR,成骨细胞的琼脂糖凝胶电泳分辨在342bp与249bp处呈现特点性条带，证明MOR与ER的存在。不同浓度吗啡组成骨细胞上MORmRNA、ERmRNA表白与对比组比较有明显性降落(P05)且与吗啡浓度负相干(r=046，P0.05；r=0.962，P0.05)，不同浓度吗啡组中两两比较MORmRNA、ERmRNA表白差别有统计学意思(P0.05)，E2组与对比组比较ERmRNA表白差别有统计学意思(P0.05)，吗啡+纳络酮组与对比组比较M（本文此处忽略..）ORmRNA、ERmRNA表白差别无统计学意思(P0.05)。论断：1.人成骨细胞上存在MOR、ER。2.外源性阿片类物质吗啡可直接影响雌激素对人成骨细胞的促增殖作用，而这种作用在必定程度上可被特异性阿片受体拮抗剂纳络酮所阻断。3.吗啡可能引起人成骨细胞MOR、ER数量下和谐基因表白降落，且与吗啡浓度负相干，这种作用在必定程度上也可被特异性阿片受体拮抗剂纳络酮所阻断。

以上为本篇毕业论文范文吗啡对体外培养女性成骨细胞MORmRNA、ERmRNA表白的影响的介绍部分。

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