抗β_1肾上腺素受体本身抗体与心律变态的关联及其意思分析

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抗β_1肾上腺素受体本身抗体与心律变态的关联及其意思分析

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毕业论文范文题目：抗β_1肾上腺素受体本身抗体与心律变态的关联及其意思分析，论文范文关键词：抗β_1肾上腺素受体本身抗体与心律变态的关联及其意思分析
抗β_1肾上腺素受体本身抗体与心律变态的关联及其意思分析毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：研究背景G蛋白耦联受体(Gprotein-coupledreceptor,GPCR)是人体内最大的膜受体蛋白家族,广泛分布于全身组织器官,其中位于心肌细胞膜上的β1肾上腺素受体(β1-adrenoceptor,β1-AR)在调节心脏功能活动中发挥侧重要作用。生理情况下,β1-AR通过辨认并抉择性地与儿茶酚胺类物质结合,引起胞内信号转导通路激活,进而发挥心脏的正性变时、正性变力跟正性变传导作用,在介导机体对心脏功能活动的神经-体液调节中发挥重要作用。近二十年来,诸多学者接踵在扩大型心肌病、风湿性心脏病、Chagas病跟原发性心电混乱等心脏病中均检测到抗β1-AR细胞外第二环的本身抗体(antibodiesagainstthesecondextracellularloopofβ1-adrenoceptor,β1-AAB),提示这种本身抗体可能与多种心脏疾患的病理生理机制有关。有研究表明:在扩心病伴发室性心律变态及传导阻滞患者的血清中检测到高程度的β1-AAB,提示β1-AAB可能与心律变态的产生有关。但β1-AAB在其余类型心律变态患者血清中的分布情况如何尚不得而知。1990年Magnusson等的研究发明,抗β1-AR本身抗体(β1-AAB)可能专一性辨认β1-AR细胞外第二环的功能表位肽段,并存在类冲动剂样的正性变时效应。然而与冲动剂不同的是,该本身抗体表示为对β1-AR持续的刺激效应,即存在不脱敏性。1996年Mijares等研究发明,β1-AAB可能通过cAMP依附性的蛋白激酶道路激活心肌细胞膜上的L型Ca2+通道,进而加强钙离子内流,并且可缩短QT间期。鉴于L型Ca2+通道电流是自律细胞动作电位0期去极化、非自律细胞动作电位平台期的重要内向离子电流,那么,存在类冲动剂样作用的β1-AAB是否有可能通过影响钙电流而导致心电活动异样（略..）,进而导致心律变态的产生呢?然而,证明这一揣测的前提是须要阐明在心律变态患者血清中是否存在这种抗体,假如存在,那么这种本身抗体在心律变态患者中的分布特点如何,这些问题的解决将为证明β1-AAB是否参加了心律变态产生发展的病理生理过程提供第一手材料。大量的研究已经表明,在健康机体中存在有产生本身抗体的B淋巴细胞株,但它们通常被克制或处于低程度状况,不足以造成组织伤害或引起疾病。本身免疫在畸形人体内亦屡有产生,个别起保持机体生理自稳的作用,畸形人血清中含有多种针对本身抗原的本身抗体,但其效价极低,可能帮助机体清除本身衰老变性的成分,故被称为生感性抗体。在某些病理状况下,本身抗体较原有的生感性抗体在效价上有大幅度增加的趋势,这些在质跟量上表示异样的本身抗体,或通过攻打本身靶抗原细胞跟组织,或反过来影响机体的免疫体系使其功能混乱,进而使组织或细胞产生病理改变跟功能妨碍,构成本身免疫性疾病。机体免疫体系中淋巴细胞增殖是机体对抗原刺激产生免疫应答过程中的重要事件,淋巴细胞增殖成果表示为产生效应淋巴细胞,终极清除抗原,保护机体内环境牢固,而T淋巴细胞在免疫应答起始阶段起着必不可少的帮助作用。已有研究表明,存在冲动剂样作用的β1-AAB是机体免疫体系功能失衡的产物,并且,T淋巴细胞膜上存在β1-AR,那么,由免疫应答产生的β1-AAB除了先前所发明的对心脏的作用外,是否还可能与T淋巴细胞膜上的相应受体结合,反过来影响机体的免疫调节功能,从而进一步影响心律变态,这些问标题前均未见报道。咱们的前期研究发明,抗血管缓和素Ⅱ(AT1)受体本身抗体对大鼠脾脏T淋巴细胞存在促增殖作用。因为β1-AR与AT1受体同属于G蛋白耦联受体,且根据文献报道,T淋巴细胞上亦分布有β1-AR,因此咱们揣测,免疫体系可能也是β1-（本文此处忽略..）AAB的作用靶点之一。假如这种假设成破,β1-AAB对T淋巴细胞有何作用,对机体免疫体系的功能有无影响等问题,均有待通过实验进行逐个分析。研究目标1.断定心律变态患者血清中是否存在β1-AAB,假如存在,分析该本身抗体在各型心律变态患者中的分布特点及其可能的临床意思。2.察看β1-AAB对畸形大鼠跟心衰大鼠是否存在致心律变态作用,假如有,分析其有何特点。3.初步探讨β1-AAB是否可能影响机体免疫体系的功能,假如能,对T淋巴细胞的增殖有何作用?研究方法1.以合成的人β1-AR细胞外第二环氨基酸肽段(197-222位)为抗原,采取SA-ELISA方法筛查106例心律变态患者、100例冠心病患者跟100例畸形人血清中的β1-AAB,并分析其在各型心律变态患者中的分布特点。2.以合成的人β1-AR细胞外第二环氨基酸肽段(197-222位)为抗原主动免疫大鼠,免疫过程中按期鼠尾静脉采血,采取流式细胞测定技巧检测外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值的变更;免疫结束后,用亲跟层析法分辨提纯免疫鼠血清中β1-AAB阳性跟阴性的IgGs。3.采取缩窄腹主动脉法制备心力衰竭大鼠模型,模型成功后,筛选β1-AAB阴性的模型鼠,经鼠尾静脉急性给予β1-AABIgGs,察看该抗体对心衰大鼠、伪手术跟畸形大鼠心电图的影响。4.培养肠系膜淋巴结细胞,采取CCK-8检测试剂盒,察看β1-AAB对刀豆球蛋白A(concanavalinA,ConA)刺激的T淋巴细胞增殖功能的影响。研究成果1.β1-AAB在心律变态患者血清中的分布呈高阳性率在筛查的106例心律变态患者血清中,有58例呈β1-AAB阳性,其阳性率为52.8%,与畸形对比组的5.0%及冠心病组的24.0%比拟,有明显性差别(P0.01)(见表1-1,1-2)。阐明心律变态患者血清中这种本身抗体的阳性率高于冠心病人跟畸形人。22.β1-AAB在在在不不同类型心律变态患者血清中的分布情况以OD（文章此处忽略..）值表示血清中β1-AAB的含量,对其进行分析发明,室性、房性跟传导异样性心律变态患者血清中β1-AAB均匀OD值分辨为0.35±0.02、0.20±0.01跟0.22±0.02,均高于畸形对比组的OD值0.13±0.01(P0.01);且室性心律变态组β1-AAB均匀OD值与房性及传导异样性比拟均有明显性差别(P0.01)(见图1-1)。这些成果阐明,β1-AAB在室性、传导异样性跟房性心律变态患者中的分布均高于畸形人,而且可能跟室性心律变态的相干性更高。3.主动免疫大鼠模型树破成功跟β1-AAB的提纯用β1-AR细胞外第二环的抗原肽段主动免疫大鼠后,血清β1-AAB含量在免疫4周时已明显升高,10周时达顶峰(稀释度1:20时OD值为3.43±0.72,P0.01,vs.同期对比组)(见图2-1)。提纯大鼠的抗血清,得到以β1-AAB为主的总IgGs。4.心力衰竭大鼠模型树破成功心衰大鼠建模后12周,心衰组左心室紧缩压(LVSP)、室内压回升跟降落的最大速率(±dp/dtmax)均低于伪手术组(P0.05),而左心室舒张末压(LVEDP)则高于伪手术组(P0.05)(见表2-1);且心衰组心脏分量与体重之比明显高于同期伪手术组(P0.01)(见表2-2)。以上指标均阐明心衰大鼠模型树破成功。5.β1-AAB对畸形大鼠跟心衰大鼠心电图的影响经鼠尾静脉急性给予β1-AAB后,在畸形大鼠跟心衰大鼠均监测到不同程度及不同类型的心律变态,其中以室性心律变态最为多见(见图2-2);心衰大鼠心律变态的产生频率明显高于畸形大鼠(见图2-3)。6.免疫鼠外周血T淋巴细胞亚群的改变β1-AR抗原肽段免疫组跟对比组大鼠的外周血T淋巴细胞亚型CD4+/CD8+的比值在处理24小时后即开端增加,β1-AR抗原肽段免疫组在第7地利达较高程度(3.26±0.32),随后在察看时光内呈逐步增高趋势;而对比组的CD4+/CD8+之比在第3地利达峰值(2.72±0.47),随后逐步降落(见表3-1)。这一成果表明与对比组比拟,β1-AR抗原肽段免疫组呈现明显的免疫功能亢进。7.β1-A（文章此处忽略..）AB对T淋巴细胞增殖功能的影响经CCK-8试剂盒检测成果显示,三个浓度的β1-AAB(0.01,0.1,1mol/L)均可能促进ConA激活的T淋巴细胞增殖,并呈浓度依附性趋势(OD值分辨为0.49±0.05,0.69±0.08,0.82±0.07),该作用类似于β1-AR冲动剂异丙肾上腺素的作用(见图3-1)。此外,β1-AAB的作用可被β1-AR特异性阻断剂Metoprolol跟β1-AR细胞外第二环的抗原肽段所中跟,而单纯Metoprolol或β1-AR抗原肽段对T淋巴细胞的增殖功能无明显影响(见图3-2)。论断1.在心律变态患者血清中,β1-AAB的阳性率明显高于冠心病病人跟畸形人,且该本身抗体可能跟室性心律变态的相干性更高。2.β1-AAB存在直接致畸形大鼠跟心衰大鼠心律变态的作用,并以室性心律变态最为多见。此外,本实验首次发明心衰大鼠产生心律变态的易感性明显增加,提示心衰患者血清中β1-AAB的存在可能存在更为重要的病理意思。3.通过本研究首次证明β1-AAB可能影响机体的免疫调节功能,并促进T淋巴细胞的增殖。

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