复方胰岛素凝胶的研制及其促大鼠皮肤溃疡愈合的初步实验研究

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复方胰岛素凝胶的研制及其促大鼠皮肤溃疡愈合的初步实验研究

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毕业论文范文题目：复方胰岛素凝胶的研制及其促大鼠皮肤溃疡愈合的初步实验研究，论文范文关键词：复方胰岛素凝胶的研制及其促大鼠皮肤溃疡愈合的初步实验研究
复方胰岛素凝胶的研制及其促大鼠皮肤溃疡愈合的初步实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：研究背景及目的：慢性皮肤溃疡(Chronicskinulcey，CSU)是一种常见的病因复杂、难治性疾病，其愈合需经历三个即相互区别又相互联系的阶段，是一个复杂而又连续的生物反应过程。在欧美国家，慢性皮肤溃疡发病率的增加及其严重性已引起人们的高度重视，其中以糖尿病性溃疡和下肢血管性溃疡为多：而我国以创伤或创伤合并感染为多，近年来，糖尿病足、血管性溃疡的发病率有上升趋势。不管是创伤还是糖尿病等其他原因引起的溃疡，局部治疗是非常重要的一种手段，但目前尚未发现满意的疗法和药物。近年来，国内外诸多学者将胰岛素用于治疗(全身用药或局部应用)各种创伤或溃疡创面，发现创面能提前愈合，起到了很好的疗效。胰岛素是一个分子量为56kD的水溶性酸性蛋白质分子，有A和B两条多肽链组成，共有三个二硫键，在等电点时具有最低溶解度。它作为一种多功能的蛋白质激素，除调节物质代谢作用外，还有促进创面修复的效应。大量研究证明，胰岛素在体外能够促进或维持细胞的增殖与分化，在体内可能是一种生长调节因子。我们在临床实践中将胰岛素混合液外敷于各种顽固性溃疡创面，均能取得满意的临床疗效，监测血糖未发现有低血糖现象，使用安全又经济。但（本文此处忽略..）将其制成外用制剂用于创面的实验研究在国内外则鲜见报道，因此本研究欲将其制成复方制剂、外用于溃疡创面并探讨其可能的促愈机制，为临床应用提供理论和实验依据。方法：1．按正交试验设计筛选最优化处方，以卡波姆为基质制备复方胰岛素凝胶剂，采用紫外分光光度法测定胰岛素含量变化并考察其稳定性。2．以Wistar大鼠为研究对象，依据文献复制急性创伤模型，设立复方胰岛素凝胶治疗组(A)、空白基质组(B)、阴性对照组(C)，以治疗后不同时间点各组溃疡面积变化、溃疡愈合速度及组织病理学检查评价修复效果。3．以糖尿病大鼠为研究对象，依据文献复制糖尿病皮肤溃疡模型，设立复方胰岛素凝胶治疗组(A)、金因肽(重组人表皮细胞生长因子)阳性对照组(B)、阴性对照组(C)，以治疗后不同时间点各组创面愈合百分率、HE染色、免疫组化染色及透射电镜分析来评价修复效果。4．统计学分析应用SPSS10.0统计软件包处理，实验数据以均数±标准差((?)±s)表示，创面面积及创面愈合率采用重复测量方差分析(RepeatedMeasures)，不同时间点组间比较以及每组不同时间点比较采用单因素方差分析(One-WayANOVA)；PCNA、VEGF表达采用析因分析(Factoriala（文章此处忽略..）nalysis)，不同时间点组间比较及每组不同时间点分别采用单因素方差分析(One-WayANOVA)和t检验；组间两两比较采用LSD法，以P＜0.05为差异有显著性意义。结果：1．正交设计试验结果：表明PH对胰岛素的稳定性影响最大、卡波姆浓度次之、胰岛素浓度最小；最优化处方组成为：A381C1，即卡波姆1.5％，pH为6，胰岛素浓度14U／g。2．稳定性实验结果：发现我们研制的复方胰岛素凝胶在冰箱(4℃±3)或室温保存稳定性较好。3．药效学研究3．1急性创伤模型实验①创面面积：不同时间各处理组间有显著性差异(F=5.880，P＜0.01)；从伤后7天开始，各时间点A与B、C组比较均有显著性差异(P＜0.01或P＜0.05)，而B与C组比较无显著性差异(p＞0.05)。②光镜观察：伤后7d，A组肉芽组织增生旺盛，成纤维细胞及毛细血管含量丰富；而B、C组，肉芽组织增生不如A组旺盛，成纤维细胞、毛细血管含量相对A组少。伤后14d，A组创面基本上皮化，皮肤结构完整；而B、C组创面未完全上皮化，皮肤结构不完整。3．2糖尿病皮肤溃疡模型实验①创面愈合百分率：各处理组间有显著性差异(F=8.302，P＜0.01)；致伤3天以后，各时间点各组间创面愈合百分率的比较差异均有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01)；组间两两比较时（文章此处忽略..），治疗组、阳性组与阴性组比较差异均有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01)；而治疗组与阳性组比较差异无显著性意义(P＞0.05)。②光镜观察：伤后7天，治疗组、阳性组肉芽组织生长较活跃，其毛细血管芽胚及成纤维细胞数量显著多于阴性组对照组。伤后14天，治疗组、阳性组大部分创面已被表皮所覆盖，上皮化加快，肉芽组织生长旺盛；而阴性组残留创面较治疗组、阳性组大，上皮化慢，肉芽组织不如治疗组、阳性组丰富。伤后21天，治疗组、阳性组创面基本愈合，细胞间有大量胶原沉积，上皮层较厚，结构完整；而阴性组胶原沉积相对较少，上皮层较薄。③免疫组化观察：各处理组间有显著性差异(P＜0.05)；伤后7天，治疗组、阳性组PCNA、VEGF阳性表达率明显高于阴性组，它们之间的差异有显著性意义(均为P＜0.05)；而伤后14天，治疗组、阳性组PCNA、VEGF阳性表达率有所下降，而阴性组则上升，它们之间的差异无显著性意义(P＞0.05)。各间段治疗组与阳性组PCNA、VEGF阳性表达率的差异均无显著性意义(P＞0.05)。说明治疗组、阳性组有提前促修复细胞增殖作用。④透射电镜观察：伤后14天，治疗组、阳性组及阴性组创面组织中均有较多的成纤维细胞，细胞呈梭形，胞浆丰富。胞浆中粗面内质网、线粒（此处忽略..）体等细胞器较为丰富，说明各组的细胞代谢比较旺盛。治疗组、阳性组细胞间质内有粗大的胶原纤维形成，胶原沉积明显；而阴性组间质内胶原纤维细少，胶原沉积不明显，数目明显少于治疗组、阳性组；说明治疗组、阳性组较阴性组有提前促胶原沉积作用。结论：1．按正交试验筛选出的最优化处方为：中性胰岛素注射液140U，维生素。B_(12)8.75mg，卡波姆9410.15g，甘油1.0g，三乙醇胺适量调节PH至6.0～6.5，加蒸馏水至10g。2．该制剂处方设计合理，制备工艺简单，稳定性好，对皮肤无刺激性，测定方法快速而准确。3．复方胰岛素凝胶能使血管内皮细胞、成纤维细胞、上皮细胞等修复细胞增殖、分裂、分化能力增强，加快肉芽组织生长，提前上皮化，从而加速溃疡创面愈合，在创伤愈合的三个时期均具有促修复效应。

以上为本篇毕业论文范文复方胰岛素凝胶的研制及其促大鼠皮肤溃疡愈合的初步实验研究的介绍部分。

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